稽留流產(chǎn)的胚胎絨毛染色體分析

徐婉芳

（東莞市婦幼保健院，廣東 東莞 523700）

稽留流產(chǎn)的胚胎絨毛染色體分析

徐婉芳

（東莞市婦幼保健院，廣東 東莞 523700）

目的 稽留流產(chǎn)是婦科最常見的疾病之一，近幾年來不斷呈現(xiàn)上升趨勢(shì)。探討胚胎染色體異常與稽留流產(chǎn)之間的關(guān)系。方法 在無菌條件下采集稽留流產(chǎn)患者的胚胎絨毛，利用培養(yǎng)法進(jìn)行絨毛染色體檢測(cè)，并進(jìn)行分析。結(jié)果 在采集的 100例絨毛標(biāo)本中，成功培養(yǎng) 94例。檢出絨毛染色體異常核型有 62 例，其中數(shù)目異常造成的絨毛染色體異常高達(dá) 90.32%。結(jié)論 染色體異常是導(dǎo)致稽留流產(chǎn)的重要因素之一。胚胎染色體異常的研究，對(duì)于了解稽留流產(chǎn)發(fā)生的原因以及指導(dǎo)下一次正常懷孕有著非常重要的意義。

稽留流產(chǎn)胎兒；胎兒絨毛；染色體分析

稽留流產(chǎn)（MAB，missed abortion）是自然流產(chǎn)的一種特殊類 型，又稱過期流產(chǎn)或者死胎不下，是臨床妊娠的并發(fā)癥之一。稽留流產(chǎn)在早期自然流產(chǎn)中占了一半以上的比例，并且近幾年來不斷呈現(xiàn)上升趨勢(shì)。隨著研究的深入，人們發(fā)現(xiàn)胚胎染色體異常是導(dǎo)致稽留流產(chǎn)的最為常見的原因之一。染色體異常與稽留流產(chǎn)的關(guān)系越來越引起人們的重視[1]。為了探討胚胎染色體異常與稽留流產(chǎn)之間的關(guān)系和在分析稽留流產(chǎn)原因中的價(jià)值，我們?cè)诒驹撼槿×?00名稽留流產(chǎn)患者的胎兒絨毛進(jìn)行了絨毛染色體檢測(cè)，并進(jìn)行分析。

表1 62例稽留流產(chǎn)胎兒絨毛染色體異常分析結(jié)果

1 臨床病例與標(biāo)本處理

1.1 病例來源

這次抽取的100名患者都是從2011年3月至2012年6月到我院婦科門診就診的稽留流產(chǎn)患者。這些患者年齡均在20～44歲，平均年齡為33歲?；颊咴趹言衅陂g感到下腹疼痛的有34人，占到34%的比例，陰道出血有53人，占到53%的比例。這53個(gè)人，陰道出血時(shí)間最短的是1d，最長的是26d，平均出血4.5d。患者的胚胎已經(jīng)停止發(fā)育，但是胚胎仍然稽留在宮腔里面，經(jīng)過臨床診斷確定是稽留流產(chǎn)。

1.2 標(biāo)本處理

絨毛采集一般是在進(jìn)行無菌人流手術(shù)的時(shí)候進(jìn)行。挑選絨毛時(shí)應(yīng)該挑選枝狀絨毛，以防止母體細(xì)胞的感染。由于稽留流產(chǎn)通常壞死組織和血塊較多，對(duì)采集出來的胎兒絨毛，應(yīng)先用生理鹽水反復(fù)漂洗干凈，再在解剖鏡下仔細(xì)分離，挑取絨毛組織。絨毛染色體檢測(cè)可以分為直接法和培養(yǎng)法兩種。直接法操作快捷方便，但是難以獲得染色體的中期分裂相，成功率較低。培養(yǎng)法所需時(shí)間較長，但是絨毛染色體標(biāo)本制作成功率很高。在挑取絨毛組織之后把絨毛組織剪成糊狀，放在濃度為0.09mg/mL膠原酶的PRIM-1640中，在37攝氏度恒溫的狀態(tài)下靜置0.5～1h。離心11000轉(zhuǎn)5min，清洗干凈之后再次離心清洗。將絨毛組織分布均勻的接種到培養(yǎng)瓶中，在二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)3～4d，直至看見絨毛細(xì)胞克隆后，再次更換液體。在看到圓形及雙圓形細(xì)胞后，按照常規(guī)羊水細(xì)胞的收獲方法處理絨毛染色體，用固定液固定、離心、滴片。最后，制作成G顯帶染色體，在顯微鏡下分計(jì)數(shù)10～20個(gè)分裂相，分析5～10個(gè)細(xì)胞的核型，對(duì)染色體核型進(jìn)行命名，Leica染色體分析系統(tǒng)拍照保存。

2 結(jié) 果

在對(duì)100例稽留流產(chǎn)患者的絨毛染色體檢測(cè)中，成功培養(yǎng)94例，培養(yǎng)成功率高達(dá)94%。失敗6例，占6%的比例。在94例培養(yǎng)成功的病例中，檢出絨毛染色體異常核型有62例，正常核型32例。在染色體異常中，以數(shù)目異常居多，檢測(cè)出56例，其中常染色體三體又占據(jù)了絕大比例。異常染色體核型具體情況列表如下表1。

3 結(jié) 論

精神壓力過大，遺傳基因缺陷，環(huán)境因素，母體的不良習(xí)慣都會(huì)造成稽留流產(chǎn)。稽留流產(chǎn)不僅給患者，也給患者的家庭帶來極大的痛苦和負(fù)擔(dān)。近幾年來，稽留流產(chǎn)不斷呈現(xiàn)上升趨勢(shì)。研究稽留流產(chǎn)的原因已經(jīng)是當(dāng)今醫(yī)學(xué)研究刻不容緩的事情。研究表明，絨毛細(xì)胞具有和胚胎組織一樣的遺傳性。人們發(fā)現(xiàn)胎兒遺傳因素的缺陷，胚胎染色體異常是導(dǎo)致稽留流產(chǎn)的最為常見的原因之一。大約有一半的稽留流產(chǎn)的原因是因?yàn)槿旧w的異常引起的。染色體異常與稽留流產(chǎn)的關(guān)系越來越引起人們的重視。

分析表明，胚胎早期死亡與染色體異常有關(guān)，其中數(shù)目異常造成的絨毛染色體異常高達(dá)90.32%。而在數(shù)目異常中，常染色三色體異常所占比例最大。共有38例，約占66%的比例。這主要是因?yàn)樯臣?xì)胞在減數(shù)分裂的時(shí)候，染色體沒有進(jìn)行分離，染色體增多或者減少。這之中，只有大約20%的21三體可以存活出生，其他常染色體的三體性大多會(huì)造成流產(chǎn)。在常染色三體中，16號(hào)染色體發(fā)生異常的概率最高，檢測(cè)出8例，占到21%左右。這也可能與16號(hào)染色體發(fā)生異變頻率較高有關(guān)系。這也就說明，染色體異常的胚胎流產(chǎn)也是對(duì)胎兒的優(yōu)勝劣汰的過程。胚胎染色體異常的研究，對(duì)于了解稽留流產(chǎn)發(fā)生的原因以及指導(dǎo)下一次正常懷孕有著非常重要的意義。

絨毛染色體的長期培養(yǎng)已經(jīng)在國外成為常規(guī)的產(chǎn)前診斷。但在我國，只有是多次稽留流產(chǎn)的患者才會(huì)進(jìn)行胎兒絨毛染色體的分析。而且我國常用的絨毛染色體檢測(cè)方法熒光原位雜交技術(shù)和微陣列比較基因組雜交技術(shù)的檢測(cè)費(fèi)用高昂，如何能夠結(jié)合實(shí)際，使絨毛染色體的檢測(cè)更為快速、簡(jiǎn)便，更為普通民眾的經(jīng)濟(jì)能力所能接受，是我們?cè)趯砑毙杞鉀Q的問題。

[1]張 穎 新.51例 稽 留 流 產(chǎn) 胎兒 絨 毛 染 色體 分 析[J].臨 床 輸 血與 檢驗(yàn),2011,13(2):157-159.

Embryonic Villi Chromosome Analysis of Missed Abortion

XU Wan-fang
(Doangguan Maternal and Child Health Hospital, Dongguan 523700, China)

ObjectiveMissed abortion is one of the most common gynecological diseases, in recent years, constantly showed a rising trend. To explore the embryo chromosome abnormality and the relationship between the missed abortion.MethodsUnder aseptic conditions acquisition missed abortion patients embryonic nap, use culture method for villi chromosome detection, and to carry on the analysis.ResultIn the collection of 100 cases of villi specimens, 94 cases of successful culture. Detection villi anomaly of chromosome karyotype 62 cases, including number abnormality in the nap of chromosome abnormality is as high as 90.32%.ConclusionChromosome abnormality is the leading cause of missed abortion is one of the important factors. Embryonic chromosome abnormality of research, to understand the cause of missed abortion and guiding the next normal pregnancy has a very important significance.

Missed abortion fetal; Fetal nap; Chromosome analysis

R714.21

：B

：1671-8194（2013）05-0048-02