藍(lán)唾液酸酶法快速檢測(cè)細(xì)菌性陰道病的臨床應(yīng)用

阮麗明 周艷潔 梁立陽 丁進(jìn)龍 何桂瓊 梁蕭

細(xì)菌性陰道病(bacterial vaginosis，BV)是由于陰道微生態(tài)環(huán)境菌群與分泌物生化性質(zhì)變化所引起的一種陰道炎癥，是育齡期婦女常見的疾病之一，國(guó)內(nèi)感染率為15%～50%［1］。陰道加德納菌(GV)是細(xì)菌性陰道病毒的常見病原體。在婦產(chǎn)科中，BV主要與輸卵管炎、盆腔炎、異位妊娠、不孕癥、泌尿系感染、術(shù)后感染及婦科腫瘤有關(guān)［2］。并使感染艾滋病和患宮頸癌的風(fēng)險(xiǎn)增高［3］。由于BV可以直接威脅到廣大婦女的身心健康，對(duì)其準(zhǔn)確及時(shí)的診斷就尤為重要。BV的檢測(cè)方法有傳統(tǒng)的金標(biāo)準(zhǔn)方法(Amsel法)［4］、培養(yǎng)法、改良胺試驗(yàn)法、五聯(lián)干化學(xué)法、唾液酸酶法等，其中唾液酸酶法有干化學(xué)法、唾液酸酶法(Blue)等，為評(píng)價(jià)Blue法在BV診斷中的價(jià)值，本研究以Amsel法為金標(biāo)準(zhǔn)對(duì)Blue法的診斷價(jià)值進(jìn)行比較，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集2012年6月到12月期間在本單位門診及體檢中心1280例疑為細(xì)菌性陰道病的女性分泌物標(biāo)本1280例。標(biāo)本由婦科醫(yī)生采集。要求對(duì)象在72 h內(nèi)無性生活及陰道灌洗、局部用藥史。嚴(yán)格按照操作技術(shù)規(guī)范以專用女性拭子收集患者陰道壁下三分之一處分泌物標(biāo)本兩份，置于無菌管中保存，立即送檢。

1.2 方法

1.2.1 Blue法 使用由北京青元盛康生物醫(yī)藥科技有限公司提供的藍(lán)唾液酸酶檢測(cè)試劑盒。該試劑反應(yīng)管中已含有細(xì)菌唾液酸酶專一特異的生色底物，將沾取分泌物的無菌棉拭子置于唾液酸酶反應(yīng)管中旋轉(zhuǎn)保溫，當(dāng)?shù)孜锱c唾液酸酶接觸時(shí)，發(fā)生生物化學(xué)反應(yīng)，產(chǎn)生唾液酸，滴顯色液到反應(yīng)管中以20 min內(nèi)拭子呈淡黃色為陰性結(jié)果，變藍(lán)色綠色判斷為陽性結(jié)果。

1.2.2 診斷標(biāo)準(zhǔn) Amsel法有四項(xiàng)診斷指標(biāo):①陰道分泌物的性狀為白色勻質(zhì)稀薄乳液狀。②分泌物 pH＞4.5。③加10%NaOH時(shí)，陰道分泌物產(chǎn)生魚腥樣氨氣味。④ 陰道分泌物涂片可見線索細(xì)胞，以線索細(xì)胞占上皮細(xì)胞的20%以上為陽性。符合以上標(biāo)準(zhǔn)中任何三項(xiàng)(最后一項(xiàng)是必須的)，即可確診。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 使用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行分析處理，所有的計(jì)數(shù)資料的比較采用卡方檢驗(yàn)，數(shù)值的比較使用t檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

細(xì)菌性陰道病傳統(tǒng)的Amsel法及BV Blue法兩種檢測(cè)方法結(jié)果分析:在1280例女性分泌物標(biāo)本中，傳統(tǒng)的Amsel法檢測(cè)出陽性274例，陽性率為21.41%，而BV Blue法檢測(cè)出陽性295例，陽性率為23.05%，兩種方法檢測(cè)陽性率比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=1.00，P＞0.05)。根據(jù)檢測(cè)結(jié)果，以Amsel法為對(duì)照，BV Blue法敏感性為93.07%，特異性為96.02%，假陽性率為3.98%，假陰性率為6.93%，陽性預(yù)測(cè)者為86.44%，陰性預(yù)測(cè)者為98.07%，說明該診斷方法良好，臨床應(yīng)用效率較高。結(jié)果見表1。

表1 BV Blue法和Amsel法檢測(cè)BV結(jié)果

3 討論

BV是多種細(xì)菌的復(fù)合感染，BV患者陰道內(nèi)乳酸桿菌的數(shù)目減少或缺失，其他微生物數(shù)量增加，乳酸桿菌和優(yōu)勢(shì)被加德納菌及混合性厭氧菌所替代，因此BV的發(fā)病是各種因素引起陰道微生態(tài)失衡所致。1983年Amsel等提出的Amsel法是目前診斷BV公認(rèn)的金標(biāo)準(zhǔn)，此法診斷結(jié)果準(zhǔn)確，但易受與BV感染無關(guān)的其他因素或人為主觀因素等諸多影響。首先，pH＞4.5對(duì)診斷的敏感性很高但缺乏特異性。陰道分泌物在不同部位的pH值有差異，如宮頸分泌物pH較高，此外陰道灌洗、用藥等會(huì)影響pH值［5］。另外，當(dāng)感染滴蟲時(shí)，滴蟲可阻礙乳酸桿菌的酵解作用，使乳酸生成減少，從而導(dǎo)致陰道內(nèi)的pH值轉(zhuǎn)變?yōu)橹行曰驂A性，并伴有魚腥樣氣味，從而誤導(dǎo)臨床判斷［6］，因此胺試驗(yàn)敏感性較低。線索細(xì)胞可作為診斷BV的主要檢測(cè)指標(biāo)，線索細(xì)胞百分率要達(dá)到20%以上才具有診斷價(jià)值，受一定主觀因素的影響。

唾液酸酶是引起B(yǎng)V的加德納菌分泌的一種特異性胞外酶，正常女性陰道中由于不存在能分泌該酶的致病菌，在唾液酸酶法檢測(cè)時(shí)不顯色。BV時(shí)，此酶可通過致病菌排泄至陰道分泌物中，與含有細(xì)菌唾液酸酶專一特異的生色底物反應(yīng)，生成藍(lán)色反應(yīng)產(chǎn)物［7］。BV Blue法敏感性為93.07%，特異性為96.02%，假陽性率為3.98%，假陰性率為6.93%，陽性預(yù)測(cè)者為86.44%，陰性預(yù)測(cè)者為98.07%。經(jīng)過多方面的評(píng)價(jià)BV Blue法操作簡(jiǎn)便快速，技術(shù)易于掌握，無需特殊的儀器設(shè)備，敏感性和特異性較高，是一種較好的輔助診斷方法，值得臨床推廣。

［1］馬玉楠.細(xì)菌性陰道病及其診斷.中華醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)雜志，2000，23(5):303-304.

［2］寧?kù)o，于莉，南志敏.BV藍(lán)-細(xì)菌性陰道炎快速檢測(cè)法的臨床應(yīng)用.第三軍醫(yī)大學(xué)報(bào)，2005，27(10):1054.

［3］袁俊萍，陳衛(wèi)斌，白明海.細(xì)菌性陰道病的研究進(jìn)展.國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2008，29(3):263.

［4］Amsel R，Totten PA，Splegel CA，et al.Non specific vaginitis:diagnosticcnite and mibrobial and epide miologis.AmJ med-patri，1983，74(3):14-22.

［5］張?jiān)虑?，王揚(yáng).細(xì)菌性陰道病的實(shí)驗(yàn)室診斷200例分析.黑龍江醫(yī)藥科學(xué)，2000，23(1):66.

［6］楊冬梓.陰道乳酸桿菌在細(xì)菌性陰道病診斷中的意義.中華婦產(chǎn)科雜志，1997，32(2):180.

［7］楊曉英.唾液酸酶法在細(xì)菌性陰道病診斷中的應(yīng)用.國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2009，30(11):1128-1129.