不同產(chǎn)地白芷中歐前胡素的含量測(cè)定

鄭立紅 李衛(wèi)敏 陳志峰 莊志宏 黃 健 毛克臣

(首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京中醫(yī)醫(yī)院，北京市東城區(qū)美術(shù)館后街23號(hào)，100010)

白芷為傘形科植物白芷Angelica dahurica(Fisch.ex Hoffm.)Benth.et或杭白芷Angelica dahurica(Fisch.exHoffm.)Benth.etHook.f.var.formosana(Boiss.)Shan et Yuan的干燥根。原名白茝，徐鏳云:“初生根干為芷，則白芷之義取乎此也?！比胨幨纵d于《神農(nóng)本草經(jīng)》［1］，常用別名有香白芷、杭白芷、川白芷、會(huì)白芷、祁白芷、禹白芷、香大活，夏、秋間葉黃時(shí)采挖，除去須根及泥沙，曬干或低溫干燥，以條粗壯、體重、粉性足、香氣濃郁者為佳。其味辛，性溫，歸肺、脾、胃經(jīng)，具有散風(fēng)除濕，通竅止痛，消腫排膿的功能，用于感冒頭痛，眉棱骨痛，鼻塞，鼻淵，牙痛，白帶，瘡瘍腫痛［2］。白芷所含成分中歐前胡素是其質(zhì)量的標(biāo)定檢測(cè)成分［2］，也是白芷鎮(zhèn)痛的活性成分之一，有明顯的解痙作用［3］。本試驗(yàn)采用RP-HPLC法，選取四川、杭州、河北等3種不同產(chǎn)地的白芷，考察不同生長(zhǎng)環(huán)境對(duì)白芷中歐前胡素(C16H14O4)含量的影響。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 Agilent 1200高效液相色譜儀，包括Agilent G1311A四元泵(Quatpump)，Agilent G1322A真空在線脫氣機(jī)(Degasser)，Agilent G1329A自動(dòng)進(jìn)樣器(ALS)，Agilent G1315D DAD 檢測(cè)器，Agilent 1200化學(xué)工作站，Agilent G1316A(TCC)柱溫箱，色譜柱Agilent Eclipse XDB-C18(150mm × 4.6mm，5μm);AL204型電子天平。

1.2 試藥 歐前胡素對(duì)照品(中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào)110826—200712)，甲醇為色譜純，其余試劑為分析純。白芷為川白芷(090705)、杭白芷(091028)、祁白芷(090528)，由北京杏林藥業(yè)有限公司提供。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件［2］色譜柱:Agilent Eclipse XDB-C18(150mm ×4.6mm，5μm);流動(dòng)相為甲醇 -水(55：45);流速1.0mL·min-1;柱溫25℃;檢測(cè)波長(zhǎng)300nm。進(jìn)樣量為10μL。色譜柱的理論板數(shù)(n)按歐前胡素峰計(jì)算為3000nm。按歐前胡素峰計(jì)算為在此條件下，歐前胡素與其他組分均能達(dá)到基線分離。

2.2 對(duì)照品溶液的制備 取歐前胡素對(duì)照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1mL含10μg的溶液。

2.3 供試品溶液制備 分別取川白芷、杭白芷、祁白芷粉末(過三號(hào)篩)約0.4g，精密稱定，置50mL量瓶中，加甲醇45mL，超聲處理(功率300W，頻率50kHz)1h，取出，放冷，加甲醇置刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。

2.4 線性關(guān)系 精密吸取歐前胡素對(duì)照品溶液0.05、0.1、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mL，分別用甲醇稀釋。按上述色譜條件進(jìn)樣測(cè)定。以歐前胡素的質(zhì)量濃度為縱坐標(biāo)、平均峰面積積分值為橫坐標(biāo)，進(jìn)行線性回歸，其回歸方程 Y=44.697X-29.092，r=0.9997。結(jié)果表明，在0.515 ～10.3μL/mL 的范圍內(nèi)，進(jìn)樣量與峰面積響應(yīng)值呈良好的線性關(guān)系。

2.5 回收率試驗(yàn) 采用加樣回收，精密稱取已測(cè)定含量的同一樣品 6 份各 0.2005g、0.2142g、0.2150g、0.2072g、0.2070g、0.2148g 分別加歐前胡素對(duì)照品，按供試液的制備方法制備供試液，進(jìn)樣，記錄色譜，計(jì)算回收率。平均回收率為111%，RSD=2.64，結(jié)果見表1。

表1 加樣回收率實(shí)驗(yàn)結(jié)果(n=6)

2.6 樣品測(cè)定 分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10μL，注入液相色譜儀，按“2.1”項(xiàng)下色譜條件測(cè)定，對(duì)照品平均峰面積為370.1831，樣品含量按干燥品計(jì)算，結(jié)果見表2。

表2 歐前胡素含量測(cè)定結(jié)果

3 討論

通過實(shí)驗(yàn)觀察，測(cè)定白芷中歐前胡素的含量分別為川白芷0.191%、杭白芷0.183%、祁白芷0.141%。結(jié)果顯示白芷在不同的生長(zhǎng)環(huán)境和地域中，其有效成分含量有所不同。按照《中國(guó)藥典》規(guī)定白芷中歐前胡素的含量不得少于0.080%［2］的標(biāo)準(zhǔn)，3種產(chǎn)地的白芷中歐前胡素的含量均達(dá)到藥典標(biāo)準(zhǔn)，其中以川白芷的含量為高。

［1］宋立人，洪恂，丁緒亮，等.現(xiàn)代中藥學(xué)大辭典(上冊(cè))［M］.北京:人民衛(wèi)生出版社，2001:648.

［2］國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典(一部)［M］.北京:化學(xué)工業(yè)出版社，2005:38.

［3］王夢(mèng)月.白芷的古今藥用概況及香豆素類成分研究［D］.成都:成都中醫(yī)藥大學(xué)，2003.

(2011-10-24 收稿)