食用菌菌種貯藏技術(shù)

1.低溫定期移植貯藏法

將需要貯藏的菌種接種在適宜的斜面培養(yǎng)基上，適溫培養(yǎng)，當菌絲健壯地長滿斜面時取出，放在3℃～5℃低溫干燥處或4℃冰箱、冰柜中貯藏，每隔4～6個月時間移植轉(zhuǎn)管一次，具體應(yīng)根據(jù)菌種特性決定。貯藏時要注意環(huán)境溫度不能太高，以防霉菌通過棉塞進入管內(nèi)。因此，若用棉塞，可用干凈的硫酸紙或牛皮紙包扎棉塞，既可減少污染的機會，也可防止培養(yǎng)基干燥。除草菇菌種外，其他食用菌菌種都能采用此法貯藏。

2.液體石蠟貯藏法

取化學(xué)純液體石蠟（要求不含水分、不霉變）裝于三角瓶中加棉塞并包紙，在1kg/cm2壓力下高溫滅菌1小時，再放入40℃恒溫箱中數(shù)天，以蒸發(fā)其中水分，至石蠟油完全透明為止。將處理好的石蠟油移接在空白斜面上，在28℃～30℃溫度下培養(yǎng)2～3天，確定無雜菌生長方可使用。然后用無菌操作的方法把液體石蠟注入待貯藏的斜面試管中。注入量以高出培養(yǎng)基斜面1～1.5cm為宜，塞上橡皮塞，用固體石蠟封口，直立于低溫干燥處貯藏。貯藏時間在1年以上，在低溫下，保藏時間還可延長。

3.沙土管貯藏法

取河沙用水浸泡洗滌數(shù)次，過60目篩除去粗粒，再用10%鹽酸浸泡2～4小時，除去其中有機物質(zhì)，再用水沖洗至pH值達到中性，烘干備用。同時取貧脊土或菜園土用水浸泡，使其呈中性，沉淀后除去上清液，烘干碾細，用100目篩子過篩，將處理好的沙與土以（2～4）：1比例混勻，用磁鐵吸出其中的鐵質(zhì)，然后分裝小試管或安瓿瓶內(nèi)，每管裝0.5～2g，塞棉塞，用紙包扎滅菌（1.5kg/cm2，1小時），再干熱滅菌（160℃，2～3小時）1～2次，進行無菌檢驗，合格后使用。將已形成孢子的斜面菌種，在無菌條件下注入無菌水3～5mL，刮菌薹，制成菌懸液，再用無菌吸管吸取菌液滴入沙土管中，以浸透沙土為止。將接種后的沙土管放入盛有干燥劑的真空干燥器內(nèi)，接上真空泵抽氣數(shù)小時，至沙土干燥為止。真空干燥操作需在孢子接入后48小時內(nèi)完成，以免孢子發(fā)芽。制備好的沙土管用石蠟封口，在低溫下可保藏2～10年。

4.濾紙片貯藏法

取白色（收集深色孢子）或黑色（收集白色孢子）濾紙，剪成4×0.8cm的小紙條，平鋪在培養(yǎng)皿中用紙包裹進行滅菌（1kg/cm2，30分鐘）。采用鉤懸法收集孢子，讓孢子落在濾紙條上。將載有孢子的濾紙條放入貯藏試管中，再將貯藏試管放入干燥器中1～2天，除去濾紙水分，使濾紙水分含量達2%左右，然后低溫貯藏。

5.自然基質(zhì)貯藏法

麥粒貯藏法。取無癟粒、無雜質(zhì)的小麥淘洗干凈，浸泡12～15小時，加水煮沸15分鐘，繼續(xù)熱浸15分鐘，使麥粒脹而不破，瀝干水分攤開晾曬，使麥粒的含水量在25%左右。將碳酸鈣、石膏拌入熟麥粒中（麥粒、碳酸鈣、石膏重量為10kg、133g、33g），拌和均勻后裝入試管中，每管2～3g，然后清洗試管，塞棉塞，滅菌（1.5kg/cm2，2小時），經(jīng)無菌檢查合格后備用，試管基質(zhì)冷卻后接種，適溫培養(yǎng)，待菌絲長滿基質(zhì)后用石蠟涂封棉塞，放低溫貯藏、2年左右轉(zhuǎn)接一次。麩曲保藏法。取新鮮麩皮，過60目篩除去粗粒。將麩皮和自來水按1∶1拌勻，裝入小試管，每管約裝1/3高度，加棉塞用紙包扎，高壓滅菌（1.5kg/cm2，30分鐘），經(jīng)無菌檢查合格后備用，將生長在斜面培養(yǎng)基上的健壯菌種，移種至無菌麩曲管中，移種時注意盡量搗勻小試管中的麩皮，使其呈疏松狀態(tài)，在適溫下培養(yǎng)至菌絲長滿麩皮為止，將麩曲小管置干燥器中，在低溫或適溫下貯藏。

6.生理鹽水貯藏法

取純氯化鈉0.7～0.9g，放入100%mL蒸餾水中，攪拌均勻分裝試管，每管5～10mL，進行滅菌（1kg/cm2，30分鐘），經(jīng)無菌檢查合格后備用，將待保藏的菌種接入馬鈴薯葡萄糖液體培養(yǎng)基中，適溫振蕩培養(yǎng)5～7天。無菌操作吸取少許培養(yǎng)菌種，注入經(jīng)檢驗合格的生理鹽水試管中，塞上無菌橡皮塞，用石蠟涂封，在室溫或低溫貯藏。

7.冷凍真空干燥法

將已培養(yǎng)、生長豐富的菌體或孢子懸浮于滅菌的血清、卵白、脫脂奶制成的菌懸液上，將懸液以無菌操作分裝于滅菌的玻璃安瓿中，每管0.3～0.5mL，然后用耐壓橡皮管與冷凍干燥裝置連接，安瓿瓶放在冷凍槽中于-30℃～-40℃迅速冷凍，然后在冷凍狀態(tài)下抽空干燥，并在真空狀態(tài)下熔封安瓿瓶，在-20℃低溫下保存，一般可保存10年以上，但成本較高。

8.液氮超低溫保藏法

首先將要保藏的菌種制成菌懸液備用。其次準備安瓿瓶，每瓶加入0.8mL冷凍保護劑10%（體積比）甘油蒸餾水溶液，塞棉塞滅菌（1kg/cm2，5分鐘）。無菌檢查后，接入要貯藏的菌種，火焰熔封瓶口，檢查是否漏氣，將封好口的安瓿瓶放在凍結(jié)器內(nèi)，以每分鐘下降1℃的速度緩慢降溫，使保藏品逐步均勻地凍結(jié)，直至-35℃，以后凍結(jié)速度就不需控制，安瓿瓶凍結(jié)后立即放入液氮罐內(nèi)，在-150℃～-196℃低溫下保藏，該法只有少數(shù)科研單位使用。摘自《當代蔬菜》