microRNA與胃癌關(guān)系的研究進(jìn)展

覃新干

胃癌是世界上最常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，發(fā)病率位居第4位，而在中國(guó)胃癌發(fā)病率更高，僅次于肺癌，位居第二，然而，目前對(duì)進(jìn)展期胃癌治療的療效仍沒(méi)有顯著改善，而且臨床上早期胃癌癥狀不典型，就診時(shí)往往已是進(jìn)展期。因此，如何提高早期診斷水平，復(fù)發(fā)早期的及時(shí)發(fā)現(xiàn)及提高治療效果成為提高胃癌患者治療水平的關(guān)鍵。近年來(lái)，以 microRNA 為基礎(chǔ)的癌癥診斷與治療備受關(guān)注，取得了很大的進(jìn)展。本文就microRNA 與胃癌關(guān)系的研究進(jìn)展做一綜述，供臨床參考。

1 MicroRNA概述

MicroRNA（miRNA）是一類(lèi)長(zhǎng)度約為22個(gè)左右核苷酸的內(nèi)源性非編碼子單鏈RNA，具有高度遺傳穩(wěn)定性。初始的miRNA轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物由核糖核酸酶 Drosha和 Dicer1剪接后形成成熟的miRNA，后者主要通過(guò)與目的基因mRNA的3'非翻譯區(qū)結(jié)合，使 mRNA 降解或抑制其翻譯，從而發(fā)揮基因調(diào)節(jié)作用，調(diào)節(jié)RNA穩(wěn)定和基因表達(dá)。miRNA對(duì)約30%人類(lèi)蛋白的表達(dá)具有調(diào)節(jié)作用。miRNA通過(guò)轉(zhuǎn)錄后水平調(diào)節(jié)基因的表達(dá)而參與調(diào)控一列生命活動(dòng)，包括參與調(diào)控細(xì)胞增殖，分化，生長(zhǎng)，凋亡，代謝等功能；參與腫瘤發(fā)生，發(fā)展，轉(zhuǎn)移的各個(gè)階段。microRNA 在不同組織中，癌癥發(fā)展的不同時(shí)期，其表達(dá)水平也不同[1]。

2 MicroRNA的研究方法[2]： （ 1） 鑒定 miRNA： 包括小分子 RNA直接克隆鑒定，miRNA 芯片分析和生物信息學(xué)預(yù)測(cè)的方法。（ 2） 檢測(cè) miRNA 的表達(dá)水平： 主要包括芯片技術(shù)（ microarray） 、RT-PCR（ real time RT-PCR、Stem loop RT-PCR） 、RNA 印記雜交（ Northern blot） 、核糖核酸酶保護(hù)實(shí)驗(yàn)（ RPA） 、磁珠流式檢測(cè)（ Bead-based flow cytometric assay） 、寡核苷酸為基礎(chǔ)的原位雜交（ LNA-based ISH） 。（ 3） miRNA 的靶標(biāo)基因預(yù)測(cè)軟件： 目前主要有 TargetScan、miRanda、PicTar、DIANA-microT、RNAhybrid、RNA22等。

3 MicroRNA與胃癌關(guān)系

3.1 MicroRNA與胃癌發(fā)生、發(fā)展

胃癌發(fā)生、發(fā)展是多基因參與，多步驟演變的過(guò)程，其中有癌基因與抑癌基因的失衡，細(xì)胞周期及代謝等的改變。miRNA通過(guò)轉(zhuǎn)錄后水平調(diào)節(jié)基因的表達(dá)而參與調(diào)控一列生命活動(dòng)，包括參與調(diào)控細(xì)胞增殖，分化，生長(zhǎng)，凋亡，代謝等功能，不除外參與胃癌發(fā)生，發(fā)展。Matsushima[3]等采用基因芯片、RT-PCR 方法研究發(fā)現(xiàn)幽門(mén)螺桿菌感染引起55種 microRNA表達(dá)改變，提示這些 microRNA 分子可能參與幽門(mén)螺桿菌的致炎或致癌過(guò)程。Liu[4]等研究表明microRNA-146a高表達(dá)與幽門(mén)螺桿菌感染相關(guān)。Shinozaki[5]等在研究EB病毒相關(guān)性胃癌中，發(fā)現(xiàn)microRNA-200家族（microRNA-200a 和 microRNA-200b）在 EB 病毒感染引起胃癌變中起了重要的作用。Sun等[6]發(fā)現(xiàn)miRNA-429作用于靶基因c-myc，抑制胃癌細(xì)胞的黏附與遷移，轉(zhuǎn)染miRNA-429后胃癌細(xì)胞活性、增殖能力、黏附能力均明顯下降，顯示miRNA-429與原癌基因相互作用可能是胃癌發(fā)生、發(fā)展的機(jī)制之一。Liu 等[7]應(yīng)用 Solexa及 qRT-PCR 技術(shù)檢測(cè)164名胃癌患者及127名健康者血清miRNA表達(dá)并比較，結(jié)果血清 miRNA 表達(dá)譜中有 5 種miRNA（miR-1、miR-20a、miR-27a、miR-34 和 miR-423-5p）上調(diào)，對(duì)胃癌的診斷有意義，而且從早期胃癌（Ⅰ、Ⅱ）到晚期胃癌（Ⅳ、Ⅴ）這 5 種 miRNA 表達(dá)逐漸升高，這表明血清中 miRNA 與胃癌的發(fā)展有關(guān)。

3.2 MicroRNA與胃癌浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移

MicroRNA 在不同組織中，癌癥發(fā)展的不同時(shí)期，其表達(dá)水平也不同。Ueda等[8]研究353例胃癌組織與其相應(yīng)的正常胃組織標(biāo)本，發(fā)現(xiàn)胃癌組織中有22種miRNA分子表達(dá)上調(diào)、13種miRNA分子表達(dá)下調(diào)；miRNA分子的表達(dá)情況與組織類(lèi)型有關(guān)：在彌散型胃癌中有8種miRNA分子上調(diào)，腸型胃癌中4種miRNA分子表達(dá)上調(diào)：miR-125b、miR-199a以及miR-100與胃癌進(jìn)展有關(guān)，而Let-7g和miR-433低表達(dá)、miR-214高表達(dá)則提示腫瘤具有較強(qiáng)的侵襲、轉(zhuǎn)移能力和較高的臨床分期。Xiao B[9]等檢測(cè)55例胃癌和17例非腫瘤胃組織的 microRNA-106a表達(dá)水平，胃癌組織microRNA-106a表達(dá)水平高于非腫瘤胃組織，并且microRNA-106a表達(dá)水平與腫瘤大小、分化程度，侵襲性，淋巴結(jié)和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移及分期有關(guān)。Chen等[10]采用miRNA芯片比較5例胃癌組織及相應(yīng)轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)組織，分析發(fā)現(xiàn)miR-10a表達(dá)與胃癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)。有報(bào)道[11]胃癌患者miR-21高表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，并認(rèn)為miR-21有可能成為胃癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的標(biāo)志物。以上表明MicroRNA與胃癌浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移有關(guān)，但是目前這些研究結(jié)果還需進(jìn)一步研究，方可應(yīng)用于臨床。

3.3 MicroRNA與胃癌診斷

目前胃癌的預(yù)后取決于確診時(shí)的分期，分期越早，預(yù)后越好，反之則越差，但是臨床上早期胃癌癥狀不典型，就診時(shí)往往已是進(jìn)展期。如何提高早期診斷率是提高胃癌療效的關(guān)鍵。Tsujiura等[12]對(duì)69例胃癌患者和30例健康志愿者的血漿進(jìn)行分析時(shí)發(fā)現(xiàn)miRNA-17-5p，miRNA-21，miRNA-106a和miRNA-106b在胃癌患者的血漿中表達(dá)明顯上調(diào)，而let-7a表達(dá)明顯下降。認(rèn)為這幾個(gè)miRNA有可能作為一種血清診斷標(biāo)志物對(duì)胃癌患者進(jìn)行篩查。Cai等[13]采用QRT-PCR檢測(cè)比較30例胃癌患者血清及30例健康自愿者血清的15個(gè)miRNA發(fā)現(xiàn)miRNA-106b，miRNA-20a， miRNA221對(duì)早期胃癌診斷有潛在價(jià)值。Song 等[14]研究發(fā)現(xiàn)，血清miR-221，miR-376c 和miR-744 對(duì)胃癌早期診斷有價(jià)值。Jiang[15]等研究發(fā)現(xiàn)microRNA-421在73.33%的胃癌樣本中過(guò)表達(dá)，以 microRNA-421作為標(biāo)志物檢測(cè)胃癌，胃癌檢出率明顯高于以血清癌胚抗原（ CEA） 的檢出率（ P<0.001） 。以上結(jié)果均提示了 microRNA 有可能成為新的胃癌診斷的標(biāo)志物。

3.4 MicroRNA與胃癌治療

臨床上早期胃癌癥狀不典型，就診時(shí)往往已是進(jìn)展期，而早期胃癌治療效果好，對(duì)進(jìn)展期胃癌治療方法仍沒(méi)有顯著延長(zhǎng)胃癌患者的生存時(shí)間，提高進(jìn)展期胃癌治療效果成為提高胃癌患者治療水平的關(guān)鍵。MicroRNA參與胃癌發(fā)生，發(fā)展，轉(zhuǎn)移的各個(gè)階段，目前研究發(fā)現(xiàn)在胃癌治療方面有其應(yīng)用價(jià)值。Xia等[16]研究發(fā)現(xiàn)，促進(jìn)多藥耐藥胃癌細(xì)胞株 SGC7901/VCR miR-15b 及 miR-16 表達(dá)可以提高耐藥株對(duì) VCR、ADM、VP-16 及順鉑（ CDDP） 的化療敏感性，而其機(jī)制之一是通過(guò)靶基因 BCL2促進(jìn)胃癌細(xì)胞對(duì)抗腫瘤藥物誘導(dǎo)凋亡的敏感性。Jiang等[17]通過(guò)對(duì) 28 例 S-1/oxaliplatin 治療后的患者和 27 例 doxifluridine/oxaliplatin 治療后的患者的 miRNA 表達(dá)情況進(jìn)行評(píng)估，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，胃癌組織中MIR-181b和 miR-21表達(dá)顯著高于正常胃組織。miR-21和miR-181b低表達(dá)與使用S-1和 Doxifluridine 為基礎(chǔ)的治療方案的患者的總生存期密切相關(guān)。

3.5 MicroRNA與胃癌預(yù)后

胃癌是世界上最常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，發(fā)病率位居第4位，而在我國(guó)胃癌發(fā)病率更高，僅次于肺癌，位居第二，死亡率位居第三。如何早預(yù)測(cè)預(yù)后，對(duì)胃癌將有深遠(yuǎn)意義。Brenner等[18]采用miRNA芯片及RT-PCR研究45例胃癌病人手術(shù)后36個(gè)月內(nèi)復(fù)發(fā)與非復(fù)發(fā)患者比較，發(fā)現(xiàn)miR-451、miR199a-3p和miR195與胃癌復(fù)發(fā)相關(guān)。Konishi等[19]應(yīng)用miRNA芯片加RT-PCR驗(yàn)證的方法研究手術(shù)前后血清發(fā)現(xiàn)手術(shù)后miR-486、miR-451明顯下調(diào)，認(rèn)為可作為評(píng)估個(gè)體療效的腫瘤標(biāo)志物。

4 結(jié)語(yǔ)

MicroRNA與胃癌關(guān)系密切，參與胃癌發(fā)生、發(fā)展、浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移等，發(fā)現(xiàn)一些有價(jià)值的MicroRNA標(biāo)志物。然而，它們相關(guān)機(jī)制仍未完全闡明，仍需進(jìn)一步研究與探索，相信隨著研究的深入，MicroRNA將在胃癌診斷、治療、預(yù)防等方面起積極作用。

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