昆蟲耐寒性的類型、測定方法及影響因素綜述

王錦林 馮宇倩 宗世祥

摘 要：昆蟲為了生存繁衍均要受外界環(huán)境的影響，遭受冬季寒冷低溫的侵襲。闡明了近些年國內(nèi)外關(guān)于昆蟲耐寒性的類型、測定方法及影響因素等方面的研究進展，以期為耐寒性研究提供參考和借鑒。

關(guān)鍵詞：昆蟲；耐寒性；過冷卻點；影響因素

中圖分類號 Q96 文獻標識碼 A 文章編號 1007-7731（2013）09-32-04

生活在溫帶和寒帶地區(qū)的昆蟲在長期的發(fā)育過程中均要經(jīng)受冬季寒冷低溫的影響。昆蟲的耐寒性是指昆蟲長期或短期暴露于低溫下抵御寒冷仍然存活的能力，這種能力與諸多非生物因素及生物因素均有關(guān)。昆蟲耐寒性研究至今已成為昆蟲生物學(xué)及生態(tài)學(xué)研究的熱門領(lǐng)域，本文從昆蟲耐寒性的類型、測定方法及影響因素等方面綜述了近些年來國內(nèi)外關(guān)于昆蟲耐寒性的研究進展。

1 昆蟲的耐寒性類型

通常情況下，根據(jù)不同昆蟲的耐寒特性，可將其分為耐結(jié)冰型和不耐結(jié)冰型。耐結(jié)冰型昆蟲的過冷卻點較高，可以在過冷卻點以下生存，忍受蟲體結(jié)冰，此類昆蟲通過提高過冷卻點來誘導(dǎo)胞外結(jié)冰，從而避免寒冷對胞內(nèi)亞細胞結(jié)構(gòu)的傷害。如二化螟（Chilo suppressali）幼蟲的過冷卻點為-11℃，而冬季在-15℃暴露24h后的存活率仍達60%以上（Atapour et al.，2009）；紅脂大小蠹（Dendroctonus valens）越冬幼蟲的過冷卻點為-11.98℃，但卻能在-23.5℃條件下安全越冬（趙建興等，2009）。不耐結(jié)冰型昆蟲的過冷卻點較低，昆蟲不能在過冷卻點以下溫度存活，一旦結(jié)冰就會死亡（Lee，1991），此類昆蟲通過降低過冷卻點來增加耐寒能力，以降低體液結(jié)冰的概率。如大菖蒲夜蛾（Holotropha leucostigma laevis）卵的過冷卻點為-34.1℃，以較強的過冷卻能力避免寒冷結(jié)冰，越過寒冷的冬天（筒井等，1991）。

隨著昆蟲耐寒性研究的不斷深入，許多專家學(xué)者又對其進行了更細致地劃分。孫緒艮將其分為7種類型：以耐凍性為主的種類，耐凍性+行為回避，以過冷卻為主的種類，過冷卻+行為回避，過冷卻+耐凍性，行為回避以及復(fù)合型（耐凍+過冷卻+行為回避）（孫緒艮，2001）。但大多數(shù)學(xué)者比較認同Bale根據(jù)昆蟲死亡出現(xiàn)時間而進行的類型劃分方式，即耐結(jié)冰型、避免結(jié)冰型、抗寒冷型、寒冷敏感型和隨機型（Bale，1996）。

2 耐寒性測定方法

2.1 過冷卻點和冰點 昆蟲在0℃以下的低溫條件仍不結(jié)冰的現(xiàn)象稱為過冷卻現(xiàn)象，而蟲體在低溫條件下體溫持續(xù)下降，直至開始結(jié)冰，釋放潛熱，體溫陡然上升的點為過冷卻點，當釋放熱量結(jié)束后體溫又一次開始下降的折點為冰點。盡管一些研究表明部分昆蟲在過冷卻點以上溫度已經(jīng)死亡，無法用過冷卻點來判斷昆蟲的耐寒性，但這些昆蟲中絕大多數(shù)的死亡過程都發(fā)生在體液溶點以下的過冷卻狀態(tài)，因此，測定過冷卻點有助于全面了解昆蟲的耐寒性。測定時，一般先將蟲體用封口膜包裹固定在熱敏電阻探頭上，另一端與四路昆蟲過冷卻點測試系統(tǒng)相連；然后將固定蟲體的探頭放入高低溫試驗箱中并用隔熱材料（如脫脂棉）包裹，使其從零度開始持續(xù)降溫；最后，由昆蟲過冷卻點測試系統(tǒng)通過計算機軟件記錄蟲體表面溫度的變化，測出昆蟲的冰點和過冷卻點。

2.2 低溫暴露實驗 耐結(jié)冰型昆蟲的過冷卻點較高，在較高的亞致死溫區(qū)提早細胞外結(jié)冰以避免寒冷對細胞內(nèi)組織造成傷害，雖然這種昆蟲的過冷卻能力較弱，但卻能在低于過冷卻點以下的溫度存活。不耐結(jié)冰型昆蟲的冷卻點較低，通過降低過冷卻點來抵御寒冷，雖然這種昆蟲的過冷卻能力較強，但在過冷卻點以上的亞致死溫區(qū)也存在死亡現(xiàn)象。因此，對于昆蟲耐寒性強弱的評價除了依據(jù)過冷卻點的變化，還要通過低溫暴露實驗中的低溫存活率、致死中溫度或致死中時間、冷傷害上限溫度與有效低溫總和的關(guān)系等進行綜合評價（景曉紅等，2004）。而在實驗過程中，需要解決以下幾方面的問題：

2.2.1 暴露溫度的設(shè)置 根據(jù)不同昆蟲的種類來設(shè)置不同梯度的低溫處理，在溫度選擇過程中要保證在選定的中間溫度下，被測種群的存活率達到50%～60%，不能過低導(dǎo)致全部死亡，或太高又全部存活，這樣就無法進行不同溫度梯度的處理和統(tǒng)計學(xué)分析（景曉紅等，2004）。對于熱帶昆蟲，0℃以上的亞低溫都有可能對其造成傷害，因此，一般設(shè)置較高的低溫進行處理，如紅棕象甲（Rhynchophorus ferrugineus）的卵、1齡、5齡和9齡幼蟲以及成蟲的溫度梯度分別設(shè)置為6℃、4℃、2℃、0℃、-2℃和-4℃（鞠瑞亭等，2010）。而對于溫帶或寒帶的昆蟲，在0℃以下的低溫中都有可能存活較長的時間，因此，溫度梯度的設(shè)置則偏向于較低溫度，如在小翅雛蝗（horthippus fallax）的低溫暴露研究中，溫度梯度為-15℃、

-20℃、-25℃、-30℃、-35℃和-40℃（Hao et al.， 2004）。

2.2.2 暴露時間 過冷卻點以上的低溫造成的傷害一般包括直接冷傷害（由快速冷卻導(dǎo)致）和間接冷傷害（由長期的冷暴露導(dǎo)致），而低溫存活率在一定范圍內(nèi)隨著低溫暴露時間的延長而降低，因此，研究昆蟲耐寒性時，不僅要考慮昆蟲瞬間耐受低溫的能力，也要考慮昆蟲持續(xù)耐受低溫的能力。在實驗中要根據(jù)實際情況設(shè)置不同的時間梯度，以全面反映昆蟲的耐寒性強弱和有針對性地揭示其耐寒性機理。

2.2.3 低溫冷卻速率 較快的低溫冷卻速率對昆蟲耐寒能力的影響較大，通過采用接近自然晝夜變溫情況的0.05℃/min或0.1℃/min降溫速率，可以提高昆蟲的耐寒性。如對德國小蠊進行低溫處理時，以0.1℃/min的速率降溫比以1.0℃/min的速率降溫的存活率提高了2倍多（劉峰等，2004）。因此，在進行低溫處理時要選擇較慢的速率進行降溫。

2.3 低溫馴化 在冬季來臨之前，通過對昆蟲進行低溫脅迫處理來提高其抵御寒冷侵襲的能力。馴化方式主要有2種，一種是短時間的低溫馴化，不同種群的飛蝗在0℃和5℃馴化后耐寒性均有所提高，且地理分化特征不受影響（Jing et al.， 2003），但在馴化時要注意低溫脅迫的溫度及時間；另一種是模擬環(huán)境溫度，有些昆蟲是在實驗室內(nèi)飼養(yǎng)獲得的，未經(jīng)歷自然環(huán)境下的低溫馴化，可以利用氣候箱模擬環(huán)境溫度變化來進行低溫馴化后來判斷其耐寒性，但在應(yīng)用時需注意模擬環(huán)境溫度變化應(yīng)與昆蟲分布區(qū)的環(huán)境溫度變化相一致。

準確測定昆蟲的耐寒性對于完整地描述其耐寒性水平，預(yù)測其在低溫下的存活率以及比較不同種類的耐寒性水平都是非常重要的，而在實際研究中要根據(jù)昆蟲自身的耐寒類型、試驗條件、研究目的等綜合因素來確定最佳的測定方法。

3 耐寒性的影響因素

影響昆蟲生長發(fā)育的非生物因素有很多，包括氣候因子（如溫度、濕度等）、土壤因素（土壤結(jié)構(gòu)、質(zhì)地、理化性質(zhì)等）、地形因素（如坡度、坡位）等（李成德，2004）。在復(fù)雜的自然環(huán)境條件下，昆蟲耐寒性的強弱也受到這些因素的影響，而大多數(shù)情況下并不是單一因素作用的結(jié)果，而是多種因素共同作用的結(jié)果。

3.1 非生物因素

3.1.1 季節(jié)性氣候變化 生活在溫帶和寒帶昆蟲，每年要抵御季節(jié)性變化的低溫天氣，為了適應(yīng)環(huán)境，保證種群的繁衍生長，在長期的進化過程中，昆蟲表現(xiàn)出明顯的隨季節(jié)性變化而變化的耐寒特性。如紅火蟻（Solenopsis invicta）工蟻的過冷卻點按春、夏、秋、冬依次降低（陳浩濤，2010）；飛蝗（Locusta migratoria）卵在夏季和越冬后的耐寒性明顯低于秋季，夏季和越冬后平均過冷卻點分別為（-22.0±0.8）℃和（-23.4±0.7）℃，致死終溫度為-4.8℃和-6.7℃，而秋季平均過冷卻點為-26.0±0.1℃，致死終溫度為-14.2℃（Jing et al.，2003）；光滑鱉甲（Anatolica polita borealis）成蟲在3月和9月的耐寒能力明顯強于7月（馬延龍等，2009）；冬季蘋果蠹蛾（Cydia pomonella）的過冷卻點低于夏季（Abbas et al.， 2010）；桔小實蠅（Boctrocera dorsalis）冬季種群的耐寒性顯著強于夏季種群（任璐等，2007）。

3.1.2 地理分布區(qū) 不同地理分布區(qū)域內(nèi)的昆蟲，其耐寒能力也不盡相同。通常情況下，高緯度高海拔地區(qū)昆蟲的耐寒性強于低緯度低海拔地區(qū)，極地地區(qū)的桃蚜（Myzus persicae）種群的耐寒能力明顯強于溫帶和熱帶地區(qū)（Hazell et al.，2010）；我國飛蝗（Locusta miratoria）的半致死溫度從南到北逐漸升高（Jia et al.，1999）；新疆棉鈴蟲（Helicoverpa armigera）滯育蛹的過冷卻能力、低溫生存能力顯著強于內(nèi)地（吳孔明等，2000）；南美斑潛蠅（Liriomyza huidobrensis）的過冷卻點隨緯度的升高而降低（陳兵，2003）。然而，雖然有些昆蟲的地理位置不同，但平均過冷卻點卻基本相同，如菜粉蝶（Pierisrapae linne）和歐洲卷葉蛾（Adoxop hyesorana）的幼蟲。

3.1.3 環(huán)境濕度 昆蟲體內(nèi)的水分除了來自食物以外，還通過呼吸系統(tǒng)、體表滲透等吸收周圍空氣中的水分，環(huán)境濕度的大小對昆蟲越冬蟲態(tài)的存活率和耐寒性的影響較大。環(huán)境濕度主要包括空氣濕度、土壤濕度等棲息地內(nèi)的小環(huán)境濕度。黑粉蟲（Tenebrio Obscurus）在未達到嚴重低濕環(huán)境下飼養(yǎng)時，其耐寒性隨濕度的增加而減弱（張志建，1989）；在30℃條件下，將東亞飛蝗的卵分別在含水量為7%、11%、15%、19%和23%的土壤中放置7d，其過冷卻點隨著含水量的增大而減?。≦i et al.， 2007）；甜菜夜蛾（Spodoptera exigua）越冬蛹的存活率隨著土壤含水量的增加而大幅度降低（鄭霞林等，2011）。這種現(xiàn)象產(chǎn)生的原因可能是由于冰晶對昆蟲的接種效應(yīng)而造成的，昆蟲在適應(yīng)不良環(huán)境條件過程中能改變表皮對水的通透性，以增強對冰晶接種的抵抗力，提高耐寒性，相反，在濕度較大的環(huán)境中，由于蟲體不能及時脫水而導(dǎo)致其過冷卻點升高，耐寒能力降低（梅增霞等，2006）。

3.1.4 低溫快速冷馴化 昆蟲在生長過程中不僅要抵御長時間的季節(jié)性寒冷，還要面對短時間的晝夜溫差及突然的降溫。在此過程中，部分昆蟲會產(chǎn)生冷休克現(xiàn)象，即快速抗寒的反應(yīng)，也就是說在面對環(huán)境溫度的突然變化，在昆蟲體內(nèi)會產(chǎn)生一系列變化以保護自身避免非凍害的傷害（Chen et al.， 1987；Lee et al.， 1987）。

低溫快速馴化，是通過短時間暴露在低溫條件下，誘導(dǎo)昆蟲的耐寒能力，提高冷休克下的存活率，以度過短時間寒冷的侵襲，秋季晝夜溫差大及短時間的驟然降溫是自然界低溫快速冷馴化的現(xiàn)象。光滑鱉甲成蟲在4℃下冷馴化120min后，在-10℃的存活率為70%（馬延龍等，2009），麻蠅（Sarcophaga crassipalpis）的一種非滯育蟲態(tài)，在0℃冷馴化10～60min后，在-10℃條件下的存活率可從20%提高到80%（Lee et al.， 1987）；異色瓢蟲（Harmonia axyridis）成蟲在5℃下分別冷馴化3d和5d后，在-5℃下暴露3d的存活率分別提高到60%和65%（趙靜等，2010）。

3.1.5 光周期 光周期作為昆蟲生活環(huán)境中最穩(wěn)定的因素，對昆蟲的越冬具有一定的作用。光周期有規(guī)律的季節(jié)性變化對昆蟲越冬準備具有一定的暗示作用。淡色庫蚊（Culex pipiens pallens）在進入越冬之前，通過短日照誘導(dǎo)，會發(fā)生一些生理變化。如卵巢滯育、胃緊縮、拒絕吸血、積聚脂肪等，以準備越冬（王仁賚，1979）。短光照誘導(dǎo)的飛蝗能產(chǎn)出耐寒性較強的卵，而長光照的飛蝗產(chǎn)出的卵的耐寒性則較弱（景曉紅等，2003）。光周期也是誘導(dǎo)昆蟲滯育的主要因素之一，短日照抑制麻蠅（Sarcophaga crassipalpis）腦部激素的釋放而導(dǎo)致其蛹滯育，而滯育昆蟲體內(nèi)甘油的積累則有利于提高其耐寒性。同時，光周期也是啟動幼蟲合成抗凍蛋白（AFPs）的一個重要環(huán)境因子，如赤翅甲蟲（Dendroides canadensis）抗凍蛋白的合成過程具有晝夜周期性變化，不僅需要適宜的溫度，也需要一定的光周期。此外，光周期也有啟動多元醇合成的作用。

3.2 生物因素 影響昆蟲耐寒性的生物因素主要包括昆蟲自身、寄主植物類型和人類活動等。

3.2.1 昆蟲自身 影響昆蟲耐寒性的自身因素主要包括3個方面：①個體生理狀態(tài)：生理狀態(tài)不同，耐寒性不同，家蠶（Bombyx mori）受傷卵的過冷卻點高于正常卵的過冷卻點（Suzuki et al.， 1983）。②不同發(fā)育蟲態(tài)：通常，昆蟲越冬期蟲態(tài)的耐寒性最強，其次為休眠或滯育期，而發(fā)育期的最差。舞毒蛾（Lymantria dispar）成蟲在-4℃時只能存活30min，而其卵在-20℃也不會死亡；凹唇壁蜂（Osmia excavate）越冬成蟲的滯育和非滯育階段的過冷卻點分別為-26.48℃和-18.4℃（魏永平，2001），甜菜夜蛾（Spodoptera exigua）不同蟲態(tài)耐寒性由強至弱分別是蛹、幼蟲、成蟲和卵（江幸福，2001）。③同一蟲態(tài)內(nèi)不同的發(fā)育階段：結(jié)繭2d的蘋果蠹蛾幼蟲過冷卻點為（-15.1±1.2）℃，而結(jié)繭5d的則為（-20.2±0.2）℃（Abbas et al.， 2010）；白馬蝠蛾（Hepialus baimaensis）1～3齡幼蟲的過冷卻點明顯低于其它蟲齡（楊大榮，1991）。

此外，有關(guān)昆蟲的耐寒性和滯育之間的關(guān)系有3種主要的模式：①耐寒性與滯育有關(guān)；②一些越冬昆蟲在滯育后達到最大的耐寒性；③耐寒性與滯育無關(guān)，在非滯育階段也有所表達（Chen et al.， 1987； Lee， 1991； Goto et al.， 2001）。了解昆蟲越冬蟲態(tài)是否存在滯育現(xiàn)象，也是研究其耐寒性的重要部分。

3.2.2 寄主植物的類型 越冬前，昆蟲取食大量的寄主植物，為越冬儲存能量（楊燕濤，2002；鐘景輝等，2009）。由于取食不同的寄主植物，其耐寒能力也有所不同。取食白菜、印度芥菜、包心菜和油菜的越冬豌豆細紋跳甲（Phyllotreta undulata）平均冷卻點分別約為-9.6、-10.9、-14.5和-13.5℃（Hiiesaar et al.， 2009）；棉鈴蟲（Helicoverpa armigera）幼蟲取食普通棉花和Bt抗蟲棉后，滯育率和耐寒性均有差異（Ouyang，2011）；黑豆蚜（Aphis fabae）從夏季豆類寄主轉(zhuǎn)移到冬季衛(wèi)矛上時其過冷卻點由-24℃上升到-10℃左右（Gash et al.， 1985）。這可能是由于不同的寄主植物表面或內(nèi)部的一些固體顆粒、微生物或植物本身產(chǎn)生的食物殘渣留在昆蟲消化道內(nèi)，促使昆蟲體內(nèi)結(jié)冰，降低耐寒性。此外，取食不同的寄主植物后，經(jīng)過新陳代謝，昆蟲的體內(nèi)的含水量、能量儲備、耐寒物質(zhì)積累、發(fā)育進度等均可能產(chǎn)生一定的變化，從而影響越冬期的耐寒能力（Hunter et al.， 1997）。

3.2.3 人為因素 除了上述因素以外，昆蟲的耐寒性還受到人類活動的影響，我國北方農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中普遍的大棚種植為昆蟲提供了溫暖的越冬場所，降低了美洲斑潛蠅的抗寒性，限制了其在越冬緯度以上的更高緯度地區(qū)的基因交流（Chen et al.，2005）。

參考文獻

[1]陳兵，康樂南美斑潛蠅地理種群蛹過冷卻點隨緯度遞變及其對種群擴散的意義[J]動物學(xué)研究，2003，24（3）：168-172.

[2]陳浩濤我國紅火蟻主要行為特征、抗旱能力及發(fā)生風(fēng)險分析的研究[D]中國農(nóng)業(yè)科學(xué)，2010.

[3]筒井.寒地害蟲的越冬適應(yīng)[J].植物防疫，1991， 45（12）：23-26.

[4]江幸福，羅禮智，李克斌，等.甜菜夜蛾抗寒與越冬能力研究[J].生態(tài)學(xué)報，2001，21（10）：575-582.

[5]景曉紅，康樂.光照與飛蝗卵耐寒性的關(guān)系[J].動物學(xué)研究，2003.24（3）：196-199.

[6]景曉紅，康樂.昆蟲耐寒性的測定與評價方法[J].昆蟲知識，2004，41：7-10.

[7]鞠瑞亭，王鳳，曲娛玉，等.上海地區(qū)紅棕象甲的耐寒性研究[J].昆蟲學(xué)報.2010，53（2）：226-232.

[8]李成德.森林昆蟲學(xué)[M]. 北京：中國林業(yè)出版社，2004.

[9]劉峰，賴世宏.德國小蠊耐寒性研究方法的探討[J].醫(yī)學(xué)動物防制，2004，20（7）：396-397.

[10]馬延龍，候鳳，馬紀.荒漠昆蟲光滑鱉甲的耐寒性季節(jié)變化及其生理機制[J].昆蟲學(xué)報，2009，52（4）：372-379.

[11]梅增霞，李建慶.昆蟲抗寒性的生理機制及影響因子[J].濱州科學(xué)，2006，22（3）：57-60.

[12]秦玉川，楊建才.一種便攜式測定昆蟲過冷卻點的方法[J].昆蟲知識，2000，37（4）：236-238.

[13]任璐，陸永躍，曾玲.桔小實蠅自然種群蛹和越冬成蟲的耐寒性[J].昆蟲學(xué)報，2007，50（6）：588-596.

[14]王仁賚.光周期對淡色庫蚊滯育越冬影響的觀察[J].昆蟲學(xué)報，1979，3：294-300.

[15]魏永平，袁鋒，張雅林.凹唇壁蜂的耐寒性及生殖潛力研究[J].昆蟲知識，2001，38（2）：122-124.

[16]吳孔明，郭予元.新疆棉鈴蟲的抗寒性研究[J].植物保護學(xué)報，2000，27（1）：23-26.

[17]楊大榮，楊躍雄，沈發(fā)果，等.白馬蝠蛾幼蟲抗寒性的研究[J].昆蟲學(xué)報，1991，34（1）：32-37.

[18]張志建.黃粉蟲黑粉蟲耐寒性的研究[J].昆蟲知識，1989，5：300-301.

[19]趙靜，陳珍珍，曲建軍，等.異色瓢蟲成蟲冷馴化反應(yīng)及體內(nèi)幾種酶活力的相關(guān)變化[J].昆蟲學(xué)報，2010，53（2）：147-153.

[20]趙建興，楊忠岐.紅脂大小蠹Dendroctonus valens（Coleoptera，Scolytidae） 和大唼蠟甲Rhizophagus grandis （Coleoptera，Rhizophagidae）的耐寒性[J].環(huán)境昆蟲學(xué)報，2009，31（1）：20-28.

[21]鄭霞林，王攀，叢皖軍，等.土壤含水量及蛹室對甜菜夜蛾蛹越冬的影響[J].應(yīng)用昆蟲學(xué)報，2011，48（1）：126-131.

[22]Abbas K，and Saeid M. Cold Hardiness and Supercooling Capacity in the Overwintering Larvae of the Codling Moth[J]， Cydia pomonella. Journal of Insect Science，2010； 10（83）：1-12.

[23]Bale，J S.Insect cold hardiness： a matter of life and death[J]. European Journal of Entomology，1996，93：369-382.

[24]Chen B & Kang L.Can greenhouses eliminate the development of cold resistance of the leafminers？[J].Oecologia，2005，144：187–195.

[25]Chen C P，Denlinger D L. and Lee R E. Responses of nondiapausing flesh flees （Diptera： Sarcophagidae） to low rearing temperatures： developmental rate， cold tolerance， and glycerol concentrations[J].Annals of the Entomological society of America，1987，80：790-796.

[26]Gash A F，Bale J S. Host plant influences on supercooling ability of the black-bean aphid Aphis favae[J].CryoLetters， 1985，6：297-304.

[27]Goto M，Li Y P， and Honma. T. Changes of diapause and cold hardiness in the Shonai ecotype larvae of the rice stem borer， Chilo suppressalis Walker （Lepidoptera： Pyralidae） during overwintering[J] Applied Entomology and Zoology，2001，36：323-328.

[28]Hao S G，Kang L. Supercooling capacity and cold hardiness of the eggs of the grasshopper Chorthippus fallax （Orthoptera： Acrididae）[J].European journal of entomology. 2004，101：231-236

[29]Hazell S P，Groutides C，et al. A comparison of low temperature tolerance traits between closely related aphids from the tropics，temperate zone， and Arctic[J]. Journal of Insect Pysiology，2010，56（2）：115-122.

[30]Hunter MD，McNeil J N.Host-plant quality influences diapause and voltinism in a polyphagous insect heybivore[J].Ecology，1997，78（4）：977-986.

[31]Jia QX，Chen LJ，Zuo ZY. Comparison of cold tolerance among different artemia strains[J].Acta Zoologica Sinica，1999，45（1）： 32-39.

[32]Jing X H，Kang L. Geographical variation in egg cold hardiness：A study on the adaptation strategies of the migratory 1ocust Loctasta migratoria L.[J].Ecological Entomology，2003， 28：151-158.

[33]Külli Hiiesaar，Ingrid Williams， et al. Factors affecting cold hardiness in the small striped flea beetle， Phyllotreta undulata[J]. Entomologia Experimentalis et Applicata，2009，131：278–285.

[34]Lee R E Jr，Chen C P，Denlinger D L. A rapid cold-hardening process in insects[J]. Science，1987，238： 1 415-1 417.

[35]Lee R E，Chen CP.，Meacham MH and Denlinger DL. Ontogenetic patterns of cold-hardiness and glycerol production in Sarcophaga crassipalpis[J]. Insect Physiol. 1987，33： 587-592.

[36]Lee R.E.，Denlinger D.L，et al. Relationship between cold hardiness and diapause. In： Lee R E Jr，et al. eds： Insects at Low Temperature[J].New York and London： Chapmanand &Hall， 1991：174-198

[37]Ouyang F，Liu Z D. et al. Effects of transgenic Bt cotton on overwintering characteristics Helicoverpa armigera[J]. Journal of Insect Physiology，2011，57：153-160.

[38]Suzuki K.，F(xiàn)ujita M and Miya K. Changes in supercooling point of the silkworm eggs[J]. The Journal of sericultural science of Japan. 1983，52，185-190.

[39]Qi X L，WangX H，et al. Influence of soil moisture on egg cold hardiness n the migratory locust Locusta migratoria（Orthoptera：Acridiidae）[J]. Physiological Entomology，2007，32：219-224. （責(zé)編：張宏民）