意外膽囊癌組織層粘連蛋白受體的表達(dá)與腫瘤轉(zhuǎn)移的關(guān)系研究

宋政煒 倪全法 蔣達(dá)峰 費(fèi)建國(guó) 秦紅波

意外膽囊癌組織層粘連蛋白受體的表達(dá)與腫瘤轉(zhuǎn)移的關(guān)系研究

宋政煒 倪全法 蔣達(dá)峰 費(fèi)建國(guó) 秦紅波

目的 探討意外膽囊癌組織層粘連蛋白受體（LN-R）表達(dá)與腫瘤組織學(xué)類型、分化程度、臨床分期及轉(zhuǎn)移的關(guān)系。 方法 對(duì)49例意外膽囊癌患者的臨床資料進(jìn)行回顧性分析，采用免疫組織化學(xué)法（EnVision二步法）對(duì)膽囊癌組織進(jìn)行LN-R的檢測(cè)。 結(jié)果 LN-R的陽(yáng)性表達(dá)率為71.4%（35/49），LN-R的陽(yáng)性表達(dá)與腫瘤臨床分期密切相關(guān)；59.2%（29/49）的患者術(shù)后發(fā)現(xiàn)腫瘤轉(zhuǎn)移；LN-R陽(yáng)性組及LN-R陰性組腫瘤轉(zhuǎn)移率分別為68.6%（24/35）及35.7%（5/14），兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。 結(jié)論 意外膽囊癌組織LN-R的表達(dá)與否與腫瘤臨床分期及轉(zhuǎn)移率有關(guān)，LN-R的陽(yáng)性表達(dá)提示轉(zhuǎn)移可能性大，需嚴(yán)格把握再次根治手術(shù)指征。

意外膽囊癌 腫瘤轉(zhuǎn)移 層粘連蛋白受體

Unexpected gallbladder carcinoma Neoplasm metastasis Laminin receptor

膽囊癌是膽道系統(tǒng)常見的惡性腫瘤，由于缺乏特異性的癥狀及體癥，早期診斷困難，往往以膽囊良性病變行膽囊切除術(shù)時(shí)在術(shù)中或術(shù)后病理學(xué)檢查發(fā)現(xiàn)膽囊癌變，稱為意外膽囊癌（unsuspected gallbladder carcinoma, UGC）[1]。意外膽囊癌一旦發(fā)現(xiàn)，需再次行根治性手術(shù)，但如果發(fā)生轉(zhuǎn)移即便再次手術(shù)亦不能明顯延長(zhǎng)患者的生存期[2]。因此，再手術(shù)前判斷是否已經(jīng)發(fā)生轉(zhuǎn)移具有重要的臨床應(yīng)用價(jià)值，有研究發(fā)現(xiàn)層粘連蛋白受體（laminin receptor,LN-R）的表達(dá)水平與膽囊癌的侵襲轉(zhuǎn)移相關(guān)[3]，但LN-R的表達(dá)與意外膽囊癌的轉(zhuǎn)移是否相關(guān)尚不明確，本研究采用免疫組化法對(duì)嘉興學(xué)院附屬第二醫(yī)院近10年來(lái)收治的49例意外膽囊癌組織進(jìn)行LN-R的檢測(cè)，結(jié)合臨床資料探討LN-R的表達(dá)與其組織學(xué)類型、分化程度、臨床分期及轉(zhuǎn)移的關(guān)系，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料和方法

1.1 一般資料 收集我院2002-01—2012-01意外膽囊癌病例的臨床資料和存檔的石蠟標(biāo)本，共49例，其中男l(wèi)5例，女34例，男女之比為1∶2.3，年齡36～77歲，平均61.8歲。術(shù)前B超檢查診斷為慢性結(jié)石性膽囊炎38例，膽囊息肉8例，膽囊腺肌癥3例。腹腔鏡膽囊切除術(shù)39例，開腹手術(shù)10例。術(shù)中或術(shù)后病理學(xué)檢查發(fā)現(xiàn)膽囊癌后均再次行手術(shù)治療，其中45例行根治性切除，4例因術(shù)中發(fā)現(xiàn)廣泛轉(zhuǎn)移改行姑息膽道引流或組織活檢術(shù)。術(shù)后病理學(xué)檢查提示，29例（59.2%)）發(fā)現(xiàn)腫瘤轉(zhuǎn)移，其中膽囊周圍淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移13例，肝臟轉(zhuǎn)移8例，轉(zhuǎn)移至膽總管4例，廣泛轉(zhuǎn)移4例。

1.2 方法 采用EnVision二步法檢測(cè)LN-R，常規(guī)脫蠟，依次采用鼠抗人67KDa LN-R抗體（購(gòu)自福州邁新公司），山羊抗兔EnVision二抗（1∶100）（購(gòu)自美國(guó)DAKO公司）染色，常規(guī)脫水，透明，封片。陽(yáng)性結(jié)果判定：染色陽(yáng)性為棕黃色，位于胞膜和/或胞漿內(nèi)，以前者為主，對(duì)免疫組化染色的每張切片隨機(jī)取5個(gè)視野，當(dāng)染色陽(yáng)性的膽囊癌細(xì)胞數(shù)＜30%時(shí)為陰性表達(dá)，≥30%時(shí)為陽(yáng)性表達(dá)（圖1）。

圖1 膽囊癌組織中LN-R陽(yáng)性表達(dá)（免疫組化EnVision法，×100）

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 應(yīng)用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)軟件，計(jì)數(shù)資料比較采用χ2檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 LN-R的表達(dá)與臨床、病理指標(biāo)的關(guān)系 LN-R的陽(yáng)性表達(dá)與膽囊癌臨床分期密切相關(guān)，晚期病例LN-R的陽(yáng)性表達(dá)率高于早期病例，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.05）；LN-R的陽(yáng)性表達(dá)在不同性別、不同年齡及是否伴膽石癥的患者中無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，在不同膽囊癌組織學(xué)類型及不同分化程度患者中亦無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（均P＞0.05），見表1。

表1 意外膽囊癌組織LN-R的表達(dá)與臨床病理指標(biāo)的關(guān)系（例）

2.2 LN-R的表達(dá)與轉(zhuǎn)移的關(guān)系 本組49例意外膽囊癌組織中，35例為L(zhǎng)N-R陽(yáng)性，陽(yáng)性率為71.4%，其中LN-R（+）組及LN-R（-）組腫瘤轉(zhuǎn)移率分別為68.6%（24/35）及35.7%（5/14），兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），見表2。

表2 意外膽囊癌組織LN-R的表達(dá)與其轉(zhuǎn)移的關(guān)系（例）

3 討論

意外膽囊癌多合并有膽囊結(jié)石或膽囊息肉，早期缺乏特異的臨床癥狀，一旦發(fā)現(xiàn)多數(shù)需要再次手術(shù)治療，但再次手術(shù)的方式和范圍尚存在爭(zhēng)議，早期膽囊癌（NevinⅡ、Ⅲ期）行根治性膽囊切除術(shù)可獲得較好的效果。Kaneoka等[4]報(bào)道根治性手術(shù)可以提高患者的3年生存率（65.6%）；而膽囊癌一旦出現(xiàn)肝臟、膽管、腹腔及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移（NevinⅣ、Ⅴ期），即便行根治性切除亦無(wú)法延長(zhǎng)患者生存時(shí)間[5]。意外膽囊癌再手術(shù)前應(yīng)盡可能明確是否發(fā)生轉(zhuǎn)移，以避免不必要的手術(shù)，減少患者的創(chuàng)傷和經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。但目前臨床缺乏有效的檢查指標(biāo)來(lái)判斷術(shù)前意外膽囊癌有無(wú)轉(zhuǎn)移，而腹部超聲、CT等影像學(xué)檢查效果也欠佳[6]。因此期待新的檢查指標(biāo)能夠在術(shù)前準(zhǔn)確提示膽囊癌轉(zhuǎn)移。

LN-R是存在于細(xì)胞表面的跨膜糖蛋白，它廣泛存在于腫瘤細(xì)胞及某些附著于基底膜的正常細(xì)胞表面。腫瘤細(xì)胞表面的LN-R則散布于整個(gè)細(xì)胞表面，數(shù)量異常增高，且大多數(shù)沒(méi)有被LN所飽和，使細(xì)胞能結(jié)合更多LN，為腫瘤細(xì)胞的粘著和侵襲過(guò)程提供了分子基礎(chǔ)。LN-R不僅促進(jìn)細(xì)胞在LN基質(zhì)上的粘著，而且促進(jìn)細(xì)胞的趨化性遷移和Ⅳ型膠原酶的分泌。LN-R在多種活體癌組織中的表達(dá)及其與腫瘤的轉(zhuǎn)移和預(yù)后的關(guān)系引起人們高度重視[7]。國(guó)內(nèi)趙欣松等[3]報(bào)道肝內(nèi)浸潤(rùn)和/或淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組LN-R染色陽(yáng)性指數(shù)明顯高于無(wú)肝內(nèi)浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移組，提示LN-R在人膽囊癌組織中的表達(dá)上調(diào)與腫瘤細(xì)胞的侵襲轉(zhuǎn)移能力及惡性表型有關(guān)聯(lián)，LN-R或許能成為判斷意外膽囊癌轉(zhuǎn)移的重要輔助指標(biāo)之一。本研究對(duì)收集的49例意外膽囊癌組織標(biāo)本檢測(cè)LN-R的表達(dá)，結(jié)果顯示LN-R的表達(dá)率為71.4%，其大部分存在于細(xì)胞膜，少部分胞漿內(nèi)亦有表達(dá)，有研究報(bào)道[3]在正常膽囊組織、膽囊良性病變組織中表達(dá)陽(yáng)性率分別為3.33%和10%，這提示LN-R的表達(dá)與膽囊癌密切相關(guān)。LN-R與膽囊癌發(fā)生及侵襲轉(zhuǎn)移的機(jī)制正處于研究過(guò)程中，通過(guò)干預(yù)LN與其受體的結(jié)合作為治療手段已用于臨床,但具體效果有待觀察。同時(shí)本研究發(fā)現(xiàn)LN-R陽(yáng)性表達(dá)組的意外膽囊癌轉(zhuǎn)移率明顯升高，達(dá)68.6%；LN-R陰性表達(dá)者，轉(zhuǎn)移率僅為35.7%，兩組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。LN-R在意外膽囊癌再手術(shù)前判斷是否發(fā)生轉(zhuǎn)移方面有潛在的臨床應(yīng)用價(jià)值。由此可見LN-R陽(yáng)性表達(dá)的意外膽囊癌患者，絕大多數(shù)已出現(xiàn)肝臟和或淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，再次根治手術(shù)創(chuàng)傷大、預(yù)后差，對(duì)這部分患者再次手術(shù)前應(yīng)完善相關(guān)影像學(xué)檢查，充分評(píng)估病情及預(yù)后情況，行再次根治性手術(shù)或擴(kuò)大根治性手術(shù)方案時(shí)要慎重。而LN-R陰性表達(dá)的患者，絕大多數(shù)尚未出現(xiàn)轉(zhuǎn)移，應(yīng)盡快行根治性切除。本研究回顧性地研究了意外膽囊癌組織LN-R的表達(dá)情況及其與腫瘤轉(zhuǎn)移的關(guān)系，進(jìn)一步需要前瞻性研究來(lái)證實(shí)以上結(jié)論，同時(shí)為膽囊癌的治療提供新的思路及方法。

綜上所述，本研究通過(guò)回顧性分析意外膽囊癌組織中LN-R的表達(dá)及與腫瘤轉(zhuǎn)移的關(guān)系，說(shuō)明LN-R在意外膽囊癌的轉(zhuǎn)移判斷上有潛在的應(yīng)用價(jià)值，但尚需前瞻性研究進(jìn)一步證實(shí)。

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2012-07-20）

（本文編輯：胥昀）

314000 嘉興學(xué)院附屬第二醫(yī)院肝膽外科

宋政煒，E-mail:xiaoguangwangs@163.com

【 Abstract】 ObjectiveTo investigate the expression of laminin receptor(LN-R)and its relation to clinicopathological features of unexpected gallbladder carcinoma (UCG).Methods The expression of LN-R was detected by immunohistochemical assay in 49 patients with UCG;its relation to clinicopathological features of UCG patients was analyzed. Results The positive rate of LN-R expression was 71.4%in 49 cases.The expression of LN-R was correlated with the clinical stage of carcinoma．The metastasis rate of UGC accounted for 59.2%(29/49)after surgery;68.6%(24/35)patients with LN-R expression had metastasis compared to 35.7%(5/14)in those without LN-R expression(P＜0.05). Conclusion The expression of LN-R may predict postoperative metastasis in patients with UCG and suggests the necessity of secondary radical resection.