2010-2011年我院新生兒敗血癥病原菌分布及耐藥性研究

夏衛(wèi)良 華春珍 朱銀燕 王琦婧 徐立群 黃邢邢

2010-2011年我院新生兒敗血癥病原菌分布及耐藥性研究

夏衛(wèi)良 華春珍 朱銀燕 王琦婧 徐立群 黃邢邢

目的 探討新生兒敗血癥的病原菌分布及其耐藥性，為臨床經(jīng)驗性診治提供科學(xué)依據(jù)。方法 選取疑診為新生兒敗血癥的住院患兒常規(guī)進行血培養(yǎng)。將系統(tǒng)提示陽性的血培養(yǎng)瓶及時取出，劃種于固體培養(yǎng)基上，經(jīng)細菌自動鑒定系統(tǒng)（Vitek 2-compact）進行菌種鑒定和藥敏試驗。結(jié)果 確診為新生兒敗血癥113例，共培養(yǎng)出細菌117株，血培養(yǎng)陽性率10.2%，革蘭陽性菌92.3%，革蘭陰性菌僅占7.7%。凝固酶陰性葡萄球菌93株，占79.5%，其中表皮葡萄球菌和溶血葡萄球菌最多見，分別為49.6%和12.4%。葡萄球菌對苯唑西林的耐藥率高達81%，所有陽性球菌均對萬古霉素敏感，亞胺培南對革蘭陰性桿菌保持較強抗菌活性。結(jié)論 葡萄球菌是新生兒敗血癥的主要致病菌，且該菌對苯唑西林耐藥率高，臨床醫(yī)師應(yīng)根據(jù)藥敏試驗結(jié)果選擇抗生素。

新生兒 敗血癥 病原菌 耐藥性

新生兒敗血癥是我國新生兒期常見的感染性疾病，是新生兒致死或致殘的主要原因之一。該病早期癥狀不典型，并且因病原菌種類的不同，患者的臨床表現(xiàn)和病情進展有很大差別，醫(yī)生在治療時應(yīng)根據(jù)病原菌選擇抗生素。因此，研究新生兒敗血癥病原菌的分布及其耐藥性具有重要意義，能為臨床早期經(jīng)驗治療提供依據(jù)。

1 對象和方法

1.1 對象 選取我院2010-01—2011-07擬診為新生兒敗血癥的住院患兒1 108例，在使用抗生素前，嚴格無菌操作采集全血標(biāo)本，常規(guī)進行血培養(yǎng)。經(jīng)培養(yǎng)確診為新生兒敗血癥113例，男63例，占55.8%，女50例，占44.2%，男女比例1.26∶1，年齡1～28d，平均6.8d，其中≤7d 80例，占70.8%，＞7d 33例，占29.2%，早產(chǎn)兒9例，占8.0%?；A(chǔ)疾病分布顯示，先天性心臟病9例，新生兒肺炎19例，新生兒臍炎16例；白細胞計數(shù)＜5×109或＞15×109為99例，占90.8%，超敏C反應(yīng)蛋白（hs-CRP）＞10mg/L有9例，占8.5%。

1.2 方法 使用的液體血培養(yǎng)瓶（編號259794）、固體血培養(yǎng)基（直徑9cm）、細菌自動鑒定系統(tǒng)（Vitek 2-compact）和細菌鑒定卡（GN和GP）、藥敏試驗卡（GN13和GP67）均為法國生物梅里埃公司產(chǎn)品。全血標(biāo)本經(jīng)恒溫培養(yǎng)，將系統(tǒng)提示陽性的血培養(yǎng)瓶及時取出，劃種于固體血培養(yǎng)基上，35℃隔夜培養(yǎng)。挑取菌落，革蘭染色分類后，經(jīng)Vitek 2-compact進行菌種鑒定和藥敏實驗。所有菌株的藥敏試驗參照美國臨床和實驗室標(biāo)準(zhǔn)化研究所（CLSI）的指南M100-S20版進行操作和結(jié)果判讀。

1.3 統(tǒng)計學(xué)處理 采用SPSS17.0統(tǒng)計軟件，病原菌耐藥率的比較采用χ2檢驗。

2 結(jié)果

2.1 培養(yǎng)結(jié)果 共送檢新生兒血培養(yǎng)標(biāo)本1 147例次，其中113例共117次培養(yǎng)到致病菌，陽性率為10.2%，其中4例患兒2次均分離到病原菌：2例先后分離得到表皮葡萄球菌和人葡萄球菌，1例先后分離到屎腸球菌和人葡萄球菌，1例同時分離到肺炎克雷伯桿菌和溶血葡萄球菌。

2.2 病原菌分布 血培養(yǎng)分離到病原菌共117株，其中革蘭陽性菌108株，占92.3%，革蘭陰性菌9株，占7.7%。革蘭陽性菌中，凝固酶陰性葡萄球菌（CNS）93株，占全部病原菌的79.5%；最常見的是表皮葡萄球菌，共60株，占51.3%，其次是溶血葡萄球菌，共16株，占12.8%，人葡萄球菌12株，占10.3%，沃氏葡萄球菌2株，頭狀葡萄球菌2株，雞葡萄球菌1株，路鄧葡萄球菌1株。凝固酶陽性的葡萄球菌即金黃色葡萄球菌4株，占3.4%；其他革蘭陽性球菌有屎腸球菌5株，占4.3%，明串珠菌2株，糞腸球菌1株，無乳鏈球菌1株，緩癥鏈球菌1株，毗鄰顆粒鏈球菌1株。革蘭陰性菌中鮑曼不動桿菌5株，占4.3%，大腸埃希菌2株，占1.7%，陰溝腸桿菌1株和肺炎克雷伯菌1株。

2.3 藥敏結(jié)果 93株CNS中，89株因產(chǎn)生β內(nèi)酰胺酶而對青霉素耐藥，占95.7%，51株對苯唑西林耐藥，占81.0%，所有菌株均對萬古霉素敏感。溶血葡萄球菌對克林霉素、慶大霉素、左旋氧氟沙星、諾氟沙星和四環(huán)素的耐藥率均顯著高于表皮葡萄球菌，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（χ2=15.90、16.73、6.05、5.41、4.70，均 P＜0.05），對青霉素和苯唑西林的耐藥率相似（χ2=0.56、0.03，均P＞0.05），見表1。

表1 表皮葡萄球菌、溶血葡萄球菌和金黃色葡萄球菌的藥敏結(jié)果

6株腸球菌中均對紅霉素和氯潔霉素耐藥，其中1株對左旋氧氟沙星耐藥，3株對莫西沙星和青霉素耐藥，未發(fā)現(xiàn)呋喃妥因和萬古霉素的耐藥株。5株鮑曼不動桿菌均對哌拉西林-他唑巴坦、左旋氧氟沙星、丁胺卡那霉素、亞胺培南、慶大霉素和環(huán)丙沙星敏感，其中1株對頭孢吡肟、復(fù)方新諾明和妥布霉素耐藥，2株對頭孢曲松和頭孢他啶耐藥，4株對呋喃妥因、氨芐西林、頭孢唑啉和頭孢替坦均耐藥。2株大腸埃希菌均為ESBL陽性，對頭孢替坦、頭孢曲松和頭孢他啶的耐藥率均為50%，且對亞胺培南敏感。

3 討論

新生兒按出生后周齡可分為早期新生兒（1周之內(nèi)）和晚期新生兒（1周之后）。本組資料顯示，70.8%的新生兒敗血癥發(fā)生于早期新生兒，平均發(fā)病年齡僅6.8d，提示早期新生兒是我院新生兒敗血癥的好發(fā)人群，其中早產(chǎn)兒、先天性心臟病以及罹患肺炎、臍炎等基礎(chǔ)疾病的患兒占較大比例，是新生兒敗血癥的常見誘因。張申等[1]曾對該院2007-01—12確診的121例新生兒敗血癥患兒作過臨床研究，發(fā)現(xiàn)出生后7d內(nèi)發(fā)病的僅45例，早期新生兒的比例明顯低于本研究的結(jié)果，考慮因不同地區(qū)、不同醫(yī)院，患者來源、病種、常見感染途徑不同，臨床癥狀出現(xiàn)的時間也有較大差異，當(dāng)然患兒是否及時就診也影響早期新生兒敗血癥的檢出率。對于細菌感染性疾病的診斷，血常規(guī)白細胞計數(shù)、分類和hs-CRP是重要的輔助指標(biāo)。在新生兒期，白細胞計數(shù)波動較大，而hs-CRP作為一種由肝細胞合成的急性時相蛋白，在微生物感染或組織炎癥時，其生成大輻增加，是細菌感染的敏感指標(biāo)。本組hs-CRP升高者僅占8.5%，可能與新生兒肝功能尚不成熟，在感染應(yīng)激情況下合成hs-CRP能力弱有關(guān)[2]。

我國作為發(fā)展中國家，歷年來新生兒敗血癥最常見致病菌是葡萄球菌，第二位是大腸桿菌。但是隨著社會衛(wèi)生經(jīng)濟條件的發(fā)展和抗生素在醫(yī)療衛(wèi)生領(lǐng)域的廣泛應(yīng)用，新生兒敗血癥的病原菌譜發(fā)生較大變遷。郭春燕等[3]曾報道該院1985—1989年新生兒敗血癥病原菌中CNS占30.7%，金黃色葡萄球菌占37.6%，大腸桿菌占19.8%，而2000—2004年CNS增至56.5%，金黃色葡萄球菌和大腸埃希菌分別降至23.1%和9.5%。敖當(dāng)?shù)萚4]曾對廣東醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院兒科1997—2007年的新生兒敗血癥進行10年病原菌變遷及耐藥性分析，發(fā)現(xiàn)病原學(xué)中CNS的比例逐年增高，從2.3%增至54.0%，而金黃色葡萄球菌和大腸桿菌分別從28.4%和11.6%降至12.8%和7.1%。有研究發(fā)現(xiàn)，早期新生兒和早產(chǎn)兒、低出生體重兒敗血癥病原菌以CNS為主[4-7]。本研究結(jié)果中，92.3%的菌株為革蘭陽性球菌，CNS構(gòu)成比高達79.5%，但仍低于張申等[1]報道的82.3%，而大腸桿菌和金黃色葡萄球菌則少見，分別為1.7%和3.4%，該結(jié)果反映了近年本院新生兒敗血癥的病原菌分布特點。因表皮葡萄球菌等CNS是人體體表的常見寄生菌，侵襲力較弱，故血培養(yǎng)該類細菌生長應(yīng)排除污染可能[8]。

本研究中革蘭陰性桿菌僅9株，菌種分布較分散，藥敏結(jié)果對臨床的參考價值相對較小。而葡萄球菌是新生兒敗血癥的主流菌株，藥敏結(jié)果直接指導(dǎo)本院甚至本地區(qū)該類菌屬感染的經(jīng)驗用藥。本組95.7%的葡萄球菌因產(chǎn)生β內(nèi)酰胺酶而對青霉素耐藥，耐藥率與國內(nèi)外近期研究結(jié)果一致[4，9-10]，說明治療該菌感染，青霉素G已退出歷史舞臺。耐β內(nèi)酰胺酶的半合成青霉素苯唑西林或甲氧西林曾經(jīng)是治療葡萄球菌的歷史沿襲首選藥物，但CNS對該藥的耐藥程度顯著高于金黃色葡萄球菌[11-12]。本研究中81%的CNS對苯唑西林耐藥，與2007年張申等[1]報道的79.3%一致，高于敖當(dāng)?shù)萚4]報道的65.8%，但仍低于國外報道CNS對甲氧西林超過90%的耐藥率[6，10]。國外已有多篇關(guān)于耐萬古霉素葡萄球菌感染的研究報道，所幸本組研究中所有葡萄球菌均對萬古霉素敏感。對于治療該菌的感染，萬古霉素仍是最后一道抗生素屏障，但因其具有一定腎、耳、肝等毒性，臨床應(yīng)嚴格掌握應(yīng)用指針，避免濫用誘導(dǎo)細菌耐藥性的形成。本組表皮葡萄球菌和溶血葡萄球菌之間存在耐藥模式差異，反應(yīng)了CNS不同菌種間的差異，與國內(nèi)研究結(jié)果吻合[1，4]。非主要病原菌中，6株腸球菌均對紅霉素耐藥，對萬古霉素敏感；5株鮑曼不動桿菌和2株大腸桿菌均對亞胺培南敏感，以上菌種分布和耐藥模式均呈現(xiàn)一定地區(qū)特點，因此了解本地區(qū)常見菌種分布和耐藥模式對今后科學(xué)治療具有重要指導(dǎo)意義。

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Distribution and antibiotics resistance of bacteria isolated from neonates with septicemia

XIA Weiliang,HUA Chunzhen,ZHU Yinyan,

et al.Department of Pediatrics,the Affiliated Hospital of Hangzhou Normal University,Hangzhou 310018,China

【 Abstract】 Objective To investigate the distribution and antibiotics resistance of bacteria isolated from neonates with septicemia. Methods Blood samples from neonates suspected septicemia admitted from January 2010 to July 2011were collected and cultured.The blood samples with positive alarms in the Vitek system were inoculated on solid medium.Bacterial strains were identified and antibiotics susceptibility was tested with Vitek system. Results A total of 117 strains were isolated from 113 neonates with septicemia with a positive blood culture rate of 10.2%.The predominant strains(92.3%)were gram-positive,while the gram-negative strains accounted for only 7.7%.Ninety-three isolates were coagulase-negative staphylococci and most of them were staphylococcus epidermidis(49.6%)followed by staphylococcus hemolyticus(12.4%)and 81%of the staphylococcus strains were resistant to oxacilin.All gram-positive strains were susceptible to vancomycin and most of the gram-negative bacteria were susceptible to imipenem. Conclusion Staphylococcus is the most common pathogen causing neonatal septicemia,with a high rate of resistance to oxacilln.

Neonate Septicemia Etiology Antibiotics resistance

2012-03-06）

（本文編輯：嚴瑋雯）

310018 杭州師范大學(xué)附屬醫(yī)院兒科（夏衛(wèi)良、華春珍、朱銀燕、王琦婧、黃邢邢），細菌室（徐立群）

華春珍，E-mail:huachunzhen@yahoo.com.cn