西瓜果實總糖含量QTL分析

劉識　王學(xué)征　欒非時　朱子成

摘 要： 【目的】為了探討西瓜果實中總糖含量的遺傳規(guī)律并找到與總糖含量相關(guān)的QTL位點，【方法】以高糖品系‘花園母本為母本，低糖品系‘LSW-177為父本，配制雜交組合，構(gòu)建含有180個單株的F2代群體，分別測量成熟西瓜果實中心和邊緣部分果糖、蔗糖和葡萄糖含量，并將3者之和相加作為總糖含量進(jìn)行遺傳圖譜構(gòu)建及QTL分析。【結(jié)果】 構(gòu)建的遺傳連鎖圖譜共包含45個SSR標(biāo)記，分屬于13個連鎖群，覆蓋基因組長度為547.3 cM，標(biāo)記間平均距離為12.44 cM，檢測到與中心和邊緣總糖含量相關(guān)的QTL位點各一個，均為加性遺傳效應(yīng)，貢獻(xiàn)率分別為6.56%、7.90%，分布在第3、12連鎖群上，LOD值分別為3.1、3.29，找到與中心和邊緣總糖含量緊密連鎖的標(biāo)記4個（MU8184-3、MCPI-12、TJ116、MU8558-3），該研究結(jié)果為進(jìn)一步開展西瓜糖含量相關(guān)基因定位和克隆研究提供理論依據(jù)。【結(jié)論】 西瓜果實總糖含量為數(shù)量性狀遺傳，由多基因共同控制，中心部分總糖含量QTL位點表現(xiàn)為正向加性效應(yīng)，邊緣部分總糖含量QTL位點表現(xiàn)為負(fù)向加性效應(yīng)。

關(guān)鍵詞：西瓜； 總糖含量； SSR標(biāo)記； QTL分析

中圖分類號：S651 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A 文章編號：1009-9980？穴2013？雪01-0075-06

西瓜（Citrullus lanatus）是世界上重要的水果之一，西瓜果實中含糖量是衡量西瓜品質(zhì)成分的一項重要指標(biāo)。西瓜果實中可溶性糖為果糖、蔗糖和葡萄糖[1]，有研究表明果糖的甜度最高，蔗糖次之，葡萄糖最低[2-3]。近年來國內(nèi)外學(xué)者對瓜類作物果實糖分含量從不同角度開展了研究。Harel-Beja等[4]利用甜瓜組合PI414723（subspecies agrestis）與Dulce（subspecies melon）構(gòu)建了含有99個株系的重組自交系群體，運用SSR、AFLP和SNP 3種分子標(biāo)記，獲得了一張含有12個連鎖群，668個標(biāo)記的遺傳連鎖圖譜，圖譜總長度為1 222 cM，平均距離為2.672 cM。對控制蔗糖含量的4個QTL和葡萄糖含量的1個QTL進(jìn)行分析，連鎖距離分別為11 cM和19 cM。徐錦華等[5]選用6份網(wǎng)紋甜瓜材料按Griffing方法2配制了15個雜交組合，對網(wǎng)紋甜瓜果實的可溶性糖含量進(jìn)行配合力分析，結(jié)果表明可溶性糖含量的遺傳效應(yīng)以加性效應(yīng)為主。Burger等[6]利用高糖西瓜品種‘Noy Yizre el 與低糖西瓜品種‘Faqqous作為親本材料，分析其F2代和回交世代遺傳效應(yīng)，表明高糖含量由單隱性基因控制。郭少貴等[7]對西瓜不同環(huán)境條件下果實可溶性固形物含量的QTL進(jìn)行分析，利用西瓜栽培品種97103和野生品種PI296341- FR為親本構(gòu)建了由117個穩(wěn)定株系組成的F2S8代重組自交系永久群體，在新疆和北京2個地點的連續(xù)3 a對果實可溶性固形物含量進(jìn)行比較分析，在第1連鎖群上找到了可能控制西瓜可溶性固形物含量的2個主效基因位點。然而有關(guān)西瓜總糖含量的遺傳分析和相關(guān)分子標(biāo)記方面的研究未見報道。

我們利用高糖品系‘花園母本和低糖品系‘LSW-177配制的F2代群體為試驗材料，采用SSR分子標(biāo)記技術(shù)構(gòu)建遺傳連鎖圖譜，分析與中心和邊緣總糖含量相連鎖的QTL位點，為進(jìn)一步開展西瓜果實糖代謝相關(guān)基因定位和克隆研究提供理論依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 材料

由美國農(nóng)業(yè)部農(nóng)業(yè)研究屬南部農(nóng)業(yè)研究中心[8]的提供的低糖西瓜品系LSW-177（來源于美國）為父本材料，以東北農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝學(xué)院西甜瓜分子育種研究室提供的高糖西瓜品系花園母本（來源于中國）為母本材料。配制雜交組合，獲得F1代，F(xiàn)1代自交構(gòu)建由180個單株組成的F2代群體。

1.2 試驗時間與地點

2010年3月將兩親本種植于東北農(nóng)業(yè)大學(xué)香坊實驗實習(xí)基地24號溫室內(nèi)，雜交授粉獲F1代種子，8月份收獲并種植F1代種子，自交得到F2代種子。2011年5月將兩親本、F1代和F2代群體定植于東北農(nóng)業(yè)大學(xué)香坊實驗實習(xí)基地24號大棚內(nèi)，進(jìn)行自交授粉及常規(guī)田間管理，以主蔓第2雌花為結(jié)實花。自授粉后35 d為收獲日期，采收兩親本和F1代各24株，F(xiàn)2代180株，分別測定果實中心與邊緣部分果糖、蔗糖和葡萄糖含量。分子標(biāo)記試驗分別于2011年2月和9月在東北農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝學(xué)院西甜瓜分子育種研究室進(jìn)行。

1.3 田間試驗設(shè)計

分別種植兩親本和F1代各30株，每小區(qū)種植10株，行株距80 cm×50 cm，小區(qū)面積12 m2，3次重復(fù)；隨機(jī)種植F2代群體180株，株行距80 cm×50 cm，小區(qū)面積72 m2，采用吊蔓栽培方式，并對試驗材料進(jìn)行雙蔓整枝。

1.4 糖含量測定

將收獲的果實縱切，將中心為圓點3 cm為半徑的區(qū)域做為中心部分待測樣品區(qū)域，緊貼近內(nèi)果皮部分2 cm區(qū)域做為邊緣部分待測樣品區(qū)域，在待測樣品區(qū)域內(nèi)分別取中心部瓜瓤和邊緣部瓜瓤各5 g，放于-80 ℃冰箱中保存。參照萬學(xué)閃等[9]方法略有改動，利用比色法，分別測量中心和邊緣部分果糖、蔗糖和葡萄糖含量，3者數(shù)據(jù)相加作為總糖含量進(jìn)一步分析[10]。

1.4.1 西瓜果實中3種糖類含量的測定方法 分別將取樣的5 g西瓜果肉用勻漿機(jī)破壁處理，加入10 mL 80%乙醇溶液，混勻后放于80 ℃水浴鍋中浸提40 min，加入2 g活性炭脫色20 min，10 000 r·min-1離心30 min，吸取上清液，并將殘渣重復(fù)上述操作，合并上清液，定容至25 mL待用。果糖和蔗糖采用蒽酮比色法測定，還原糖采用3，5-二硝基水楊酸比色法測定，用所得的還原糖數(shù)值減去果糖數(shù)值即為葡萄糖數(shù)值，設(shè)置3次重復(fù)，取平均值。

1.4.2 數(shù)據(jù)分析 進(jìn)行以下幾個項目的分析。

果糖含量（g·kg-1）=（5.93A-0.123） ×f

還原糖含量（g·kg-1）=（19.23A-0.342）×f

蔗糖含量（g·kg-1）=（11.36A-0.15）×f

A為吸光值，f為稀釋倍數(shù)，以鮮質(zhì)量計。

總糖含量=果糖+蔗糖+葡萄糖

1.5 SSR分子標(biāo)記

采集親本及F1代單株幼嫩真葉2 g，分別混樣，對F2代群體各單株分別采樣，每單株采取2 g幼嫩真葉，采用改良CTAB法提取西瓜基因組DNA[11]。西瓜SSR引物來源于公開發(fā)表文獻(xiàn)[12-14]。甜瓜SSR 引物序列來自公開發(fā)表文獻(xiàn)[15-20]和互聯(lián)網(wǎng)（http：//www. ncbi. nlm. nih. gov/dbEST；http：//www. icugi. org/）中葫蘆科作物 EST 信息庫和中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院，共計1 574對引物。引物合成由上海生工生物工程公司完成。西瓜SSR-PCR擴(kuò)增體系參照張法惺等[21]、盛云燕等[22] PCR反應(yīng)體系，擴(kuò)增產(chǎn)物用6%變性聚丙烯酰胺凝膠電泳進(jìn)行檢驗并記錄帶型。

1.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計和QTL分析

對分子試驗數(shù)據(jù)進(jìn)行卡方檢驗，選擇符合1∶2∶1分離比例的標(biāo)記，用MAPMAKER/EXP 3.0軟件構(gòu)建遺傳連鎖圖譜，使用MapChart 2.1軟件繪制遺傳連鎖圖譜。使用Microsoft Excel 2003軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)記錄和整理，頻次分布圖利用DPS V7.05軟件進(jìn)行繪制，QTL分析使用Windows QTL Cartographer V2.5軟件。采用1 000 次重復(fù)置換測驗，估算基因組范圍內(nèi) α = 0.05 水平上的 LOD閾值。以LOD > 2.5為總糖含量閾值。采用復(fù)合區(qū)間作圖法，以 1.0 cM步行速度在全基因組內(nèi)進(jìn)行掃描。以2-LOD區(qū)間作為95%置信區(qū)間[23]。

2 結(jié)果與分析

2.1 中心和邊緣總糖含量分析

母本與父本中心和邊緣總糖含量分別為140.54±2.11 g·kg-1、84.75±1.53g·kg-1和95.33±1.81 g·kg-1、66.02±1.32g·kg-1。用DPS V7.05軟件對親本中心和邊緣總糖含量進(jìn)行差異性檢驗分析，結(jié)果表明兩親本在0.01水平上差異極顯著，可用于QTL分析。

F1代中心和邊緣總糖含量分別為124.8±2.49 g·kg-1和76.82±1.54 g·kg-1，介于兩親本之間并接近母本的總糖含量。

F2代群體中心和邊緣總糖含量多數(shù)介于雙親之間，中心和邊緣總糖含量平均值分別為104.19±2.08 g·kg-1和68.54 ±0.96 g·kg-1。單株中心和邊緣總糖含量最高值分別為157.43 g·kg-1和117.59 g·kg-1，分別高于供試親本，呈正向超親優(yōu)勢。最低值分別為54.35 g·kg-1和29.11 g·kg-1，均低于雙親，呈負(fù)向超親優(yōu)勢，F(xiàn)2代群體中心和邊緣總糖含量分離明顯，呈單峰連續(xù)分布，偏度和峰度均小于1，表現(xiàn)出明顯的數(shù)量性狀特征。親本及F2代群體總糖含量的分離情況見表1，分別對F2代群體中心和邊緣總糖含量進(jìn)行分析，運用DPS V7.05軟件繪制頻次分布圖，結(jié)果如圖1所示。

2.2 分子標(biāo)記

2.2.1 DNA提取與引物篩選 提取兩親本、F1及F2代群體中180個單株DNA，提取的DNA經(jīng)1%瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計檢測均適用于PCR反應(yīng)。選用355對西瓜SSR引物（g-SSR引物194對，EST-SSR引物161對），1 219對甜瓜SSR引物（g-SSR引物848對，EST-SSR引物371對）。對兩親本進(jìn)行擴(kuò)增篩選，共篩選出在親本間有多態(tài)性且能穩(wěn)定遺傳的SSR引物55對，其中包括西瓜SSR引物36對（g-SSR引物32對，EST-SSR引物4對），多態(tài)率為10.14%，甜瓜SSR引物19對（g-SSR引物13對，EST-SSR引物6對），多態(tài)率為1.56%。

2.2.2 SSR分子標(biāo)記及遺傳連鎖圖譜的構(gòu)建 對F2群體標(biāo)記進(jìn)行卡方檢驗，結(jié)果表明55個標(biāo)記中有45個標(biāo)記符合1∶2∶1分離比例，其余10個標(biāo)記呈現(xiàn)出不同程度的偏分離。

運用MAPMAKER/EXP 3.0軟件對符合卡方檢驗的標(biāo)記進(jìn)行連鎖分析及遺傳連鎖圖譜的構(gòu)建，獲得了一張包含有45個SSR標(biāo)記和13個連鎖群的遺傳連鎖圖譜，其中西瓜SSR標(biāo)記29個（g-SSR引物25對，EST-SSR引物4對），甜瓜SSR標(biāo)記16個（g-SSR引物11對，EST-SSR引物5對）。圖譜總長度547.3 cM，圖譜間平均距離12.44 cM，標(biāo)記最多的為第4連鎖群，分布9個標(biāo)記，標(biāo)記間平均距離為9.85 cM。最長的為第9連鎖群，總長101.0 cM，最短的為第8連鎖群，總長13.0 cM。甜瓜SSR引物在連鎖群上呈均勻分布。

2.3 QTL分析

根據(jù)所獲得的遺傳連鎖圖譜，再結(jié)合果實糖分含量田間數(shù)據(jù)，利用Windows QTL Cartographer V2.5軟件進(jìn)行QTL分析。結(jié)果表明，在第3和第12連鎖群上發(fā)現(xiàn)了2個與總糖含量緊密相關(guān)的QTL位點，均為加性效應(yīng)位點（表2、圖2）。以性狀的英文縮寫、連鎖群編號和QTL編號為依據(jù)命名其QTL。

從遺傳連鎖圖譜中可以看出與中心總糖含量相關(guān)的1個QTL位點被命名為Tmsc3.1，位于第3連鎖群，顯著性區(qū)間為35.4～42.1，位于標(biāo)記MU8184-3和MCPI-12之間，距離MU8184-3和MCPI-12兩標(biāo)記的遺傳距離分別為0.1 cM和4.4 cM，加性效應(yīng)正值，對增加總糖含量表現(xiàn)為增效加性效應(yīng)。與邊緣總糖含量相關(guān)的QTL位點被命名為Tesc12.1，位于第12連鎖群，顯著性區(qū)間為0～1.6，在標(biāo)記TJ116和MU8558-3之間，距離TJ116和MU8558-3兩標(biāo)記的遺傳距離分別為0.2 cM和1.6 cM。加性效應(yīng)負(fù)值，對減少總糖含量表現(xiàn)為增效加性效應(yīng)。

3 討 論

西瓜染色體數(shù)為2n=22，本研究采用‘花園母本和‘LSW-177雜交所獲得的F2代群體構(gòu)建了一張包含45個SSR標(biāo)記和13個連鎖群的遺傳連鎖圖譜。在引物篩選中，采用了Zhang等[14]構(gòu)建西瓜核酸指紋圖譜使用的23對核心引物，同時該引物來源于Zhang等[14]構(gòu)建的高密度西瓜遺傳連鎖圖譜上的11個連鎖群，在本試驗的兩親本間共篩選出多態(tài)性引物16對，通過卡方檢驗和連鎖分析，最終將其中的12對引物標(biāo)記在本研究所構(gòu)建的10個連鎖群上。

通過對引物名稱及序列核對，表明12對引物分屬于Zhang等[14]構(gòu)建高密度西瓜遺傳連鎖圖譜中的9個連鎖群，其中標(biāo)記BVWS00839和BVWS00228在高密度西瓜遺傳連鎖圖譜中分布在同一個連鎖群上，而在本研究構(gòu)建的圖譜中分屬于兩個連鎖群，產(chǎn)生其原因可能是由于分子標(biāo)記在染色體上分布不均一，在連鎖群上產(chǎn)生了標(biāo)記空缺區(qū)域，使同一個連鎖群分成幾個[24]。其余10對引物在連鎖群上的分布與所報道的西瓜高密度遺傳連鎖圖譜上的分布相一致。

本研究采用‘花園母本和‘LSW-177雜交，構(gòu)建F2代群體，找到與總糖含量相關(guān)的2個QTL位點，且均為加性效應(yīng)。其中與中心糖含量相關(guān)位點1個，為正向加性效應(yīng)；邊緣糖含量相關(guān)位點1個，為負(fù)向加性效應(yīng)，與王賢磊等[25]在甜瓜中的研究結(jié)果相似，這可能與中心糖積累高于邊緣糖積累有關(guān)，田間數(shù)據(jù)也表明中心糖含量要高于邊緣糖含量。由于F2代群體為臨時作圖群體不能重復(fù)種植，也無法計算基因與環(huán)境互作，找到的2個QTL位點有待于進(jìn)一步利用重組自交系等永久作圖群體進(jìn)行多年多點的分析和驗證。

本試驗找到了2個與總糖含量相關(guān)QTL位點，貢獻(xiàn)率分別為6.56%和7.90%，前人[26]研究表明QTL貢獻(xiàn)率小于5%為微效QTL，效應(yīng)較小，貢獻(xiàn)率大于15%為主效QTL。結(jié)合本試驗研究結(jié)果，在總糖含量方面可能存在效應(yīng)更大的主效QTL和多個微效QTL，共同控制糖分積累與代謝。

西瓜果實糖含量的增加或減少在育種上均有重要意義，培育含糖量高的西瓜可以滿足大多數(shù)人對西瓜品質(zhì)需求，而培育低糖且不失口感的西瓜則可以滿足糖尿病人的特殊需要。田間數(shù)據(jù)分析表明，本試驗所采用的F2代群體，中心和邊緣糖含量存在較大差異，既有正向超親也有負(fù)向超親現(xiàn)象。在今后的育種工作中既可以利用正向的超親優(yōu)勢篩選高糖含量品種，同時也可以利用負(fù)向超親優(yōu)勢篩選低糖含量品種來滿足大眾不同需求。

4 結(jié) 論

以高糖西瓜品系‘花園母本和低糖西瓜品系‘LSW-177雜交獲得的F2代群體，構(gòu)建了一張包括45個SSR標(biāo)記、13個連鎖群的遺傳連鎖圖譜，覆蓋基因組長度為547.3 cM，平均遺傳距離為12.44 cM，獲得與中心糖含量相關(guān)的QTL位點1個，位于第3連鎖群上，命名為Tmsc3.1，距離MU8184-3、MCPI-12兩標(biāo)記遺傳距離分別為0.1 cM和4.4 cM；獲得與邊緣糖含量相關(guān)的QTL位點1個，位于第12連鎖群上，命名為Tesc12.1。距離TJ116、MU8558-3兩標(biāo)記遺傳距離分別為0.2 cM和1.6 cM。

參考文獻(xiàn) References：

[1] GUO Shang， TIAN Ru-xia， WANG Yu-nan. The reviews of sugar accumulation in watermelon fruits[J]. Chinese Agricultural Science Bulletion， 2010， 26（20）： 271-274.

郭尚，田如霞，王宇楠. 西瓜果實糖分積累研究綜述[J]. 中國農(nóng)學(xué)通報，2010，26（20）： 271-274.

[2] ZHANG Fan，GONG Guo-yi，WANG Qian，HE Hong-ju，XU Yong. Analysis of watermelon quality structure[J]. Journal of Fruit Science， 2006， 23（2）： 266-269.

張帆，宮國義，王倩，何洪巨，許勇. 西瓜品質(zhì)構(gòu)成分析[J]. 果樹學(xué)報，2006，23（2）： 266-269.

[3] ZHANG Li-tian. The sweetness of sugars[J]. Journal of South China University of Technology， 2002，30 （1）： 89-91.

[4] HAREL-BEJA R， TZURI G， PORTONOY V， LOTAN-POMPAN M， LEV S， COHEN S， DAI N， YESELSON L， MEIR A， LIBHABER S E， AVISAR E， MELAME T， VAN KOERT P， VERBAKEL H， HOFSTEDE R， VOLPIN H， OLIVER M， FOUGEDOIRE A， STALH C， FAUVE J， COPES B， FEI Z， GIOVANNONI J， ORI N， LEWINSOHN E， SHERMAN A， BURGER J， TADMOR Y， SCHAVER A， KATZIR N. A genetic map of melon highly enriched with fruit quality QTLs and EST markers， including sugar and carotenoid metabolism genes[J]. Theor Appl Genet，2010，121： 511-533.

[5] XU Jin-hua， YANG Xing-ping， JIANG Jiao， GAO Chang-zhou， WAN Yun-long， YAO Huai-lian. Analysis of combining ability main characters of muskmelon fruit[J]. China Vegetable，2007，12（1）： 15-11.

徐錦華，楊杏平，江蛟，高長洲，萬云龍，姚懷蓮. 網(wǎng)紋甜瓜果實主要性狀的配合力分析[J]. 中國蔬菜，2007，12（1）： 15-11.

[6] BURGER Y， SAAR U， KATZIR N， PAIRS H S. A single recessive gene for sucrose accumulation in cucumis melon fruit[J]. HortScience， 2002， 127（6）： 938-943.

[7] GUO Shao-gui， XU Yong， ZHANG Hai-ying， GONG Guo-yi. QTL Analysis of soluble solids content in watermelon under different environments[J]. Molecular Plant Breeding， 2006， 2（3）： 393-398.

郭少貴，許勇，張海英，宮國義. 不同環(huán)境條件下西瓜可溶性固形物含量的QTL分析[J]. 分子植物育種，2006，2（3）： 393-398.

[8] DAVIS A R，PERKINS-VEAZIE P. LSW-177 and LSW-194： Red-feshed watermelon lines with low-total soluble solids[J]. HortScience， 2008， 43（2）： 538-539.

[9] WAN Xue-shan， LIU Wen-ge， YAN Zhi-hong， ZHAO Sheng-jie， HE Nan， LIU Peng. Sugar contents in different parts of seedless watermelon fruit[J]. China Vegetables， 2009， （5）： 10-14.

萬學(xué)閃，劉文革，閻志紅，趙勝杰，何楠，劉鵬. 無籽西瓜果實不同部位糖含量測定[J]. 中國瓜菜，2009，（5）： 10-14.

[10] ZHANG Hong， WANG Huai-song， HE Chao-xing， ZHANG Zhi-bin， ZHANG Xian， YI Hong-ping， WU Ming-zhu. Genetic study on sugar and sour traits of melon（Cucumis melo L.）[J]. Acta Horticulturae Sinica， 2009， 36（7）： 989-996.

張紅，王懷松，賀超興，張志斌，張顯，伊鴻平，吳明珠. 甜瓜糖酸性狀的遺傳研究[J]. 園藝學(xué)報，2009，36（7）： 989-996.

[11] LUAN Fei-shi， DELANNAY I， STAUB J E. Melon（Cucumis melo L.）diversity analyses provide strategies for genetic improvement and evidentiary support of domestication patterns[J]. Euphytica， 2008， 164： 445-461.

[12] YI Ke， XU Xiang-li， LU Xiang-yang， XU Yong， XIAO Lang-tao， WANG Yong-jian， KANG Guo-bin. Construction of molecular genetic map of watermelon by SSR and ISSR technology[J]. Journal of Hunan Agricultural University： Nature Sciences， 2003， 29（4）： 333 -347.

易克，徐向利，盧向陽，許勇，肖浪濤，王永健，康國斌. 利用SSR和ISSR標(biāo)記技術(shù)構(gòu)建西瓜分子遺傳圖譜[J]. 湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報： 自然科學(xué)版，2003，29（4）： 333-347.

[13] JOOBEUR T， GUSMINI G， ZhANG X， LEVI A， XU Y， WEHNER T C， OLIVER M， DEAN A. Construction of a watermelon BAC library and identification of SSRs anchored to melon or Arabidopsis genomes[J]. Theor Appl Genet， 2006， 2（12）： 1553-1562.

[14] ZHANG Hai-ying， WANG Hui， GUO Shao-gui， REN Yi， GONG Guo-yi， WENG Yi-qun， XU Yong. Identification and validation of a core set of microsatellite markers for genetic diversity analysis in watermelon， Cirtullus lanatus Thunb. Matsum. & Nakia [EB/OL]. Euphytica， [2011-11-06]. http：//www.springerlink.com/.

[15] DANIN-POLEG Y， REIS N， TZURI G. Development and characterization of microsatellite in Cucumis[J]. Theor Appl Genet，2001， 102： 61-72.

[16] FAZIO G， STAUB J E， CHUNG S M. Development and characterization of PCR markers in cucumber[J]. HortScience， 2002， 127： 545 -557.

[17] SILBERSTEIN L， KOVALSKI I， BROTMAN Y， PERIN C， DOGIMONT C， PITRAT M， KLINGLER J， THOMPSON G， PORTNOY V， KATZIR N， PERL-TREVES R. Linkage map of Cucumis melo including phenotypic traits and sequence-characterized genes[J]. Genome， 2003， 46： 761-773.

[18] GONZALO M J， OLIVER M， GARCIA-MAS J， MONFORT A， DOLCET-SANJUAN R， KATZIR N， ARUS P， MONFORTE A J. Simple-sequence repeat markers used in merging linkage maps of melon（Cucumis melo L.）[J]. Theor Appl Genet， 2005， 110（5）： 802 -811.

[19] ZALAPA J E， STAUB J E， MCREIGHT J D， CHUNG S M， CUEVAS H. Detection of QTL for yield-related traits using recombinant inbred lines derived from exotic and elite US Western Shipping melon germplasm[J]. Theor Appl Genet，2007，114 （7）： 1185-1201.

[20] FEMANDEZ-SILVA I， EDUARDO I， BLANCA J， ESTERAS C， PICO B， NUEZ F， ARUS P， GARCIA-MAS J， ANTONIO JOS MONFORTE. Bin mapping of genomic and EST-derived SSRs in melon（Cucumis melo L.）[J]. Theor Appl Genet，2008，118： 139-150.

[21] ZHANG Fa-xing， LUAN Fei-shi， SHENG Yun-yan. Analysis of genetic diversity on different ecological watermelon germplasm using SSR markers[J]. China Vegetable， 2010 （14）： 36-43.

張法惺，欒非時，盛云燕. 不同生態(tài)類型西瓜種質(zhì)資源遺傳多樣性的SSR分析[J]. 中國蔬菜，2010， （14）： 36-43.

[22] SHENG Yun-yan， LUAN Fei-shi， CHEN Ke-nong. Genetic diversity of Chinese melon cultivars based on simple sequence repeat markers[J]. Journal of Northeast Agricultural University，2006，37（2）： 165-170

盛云燕，欒非時，陳克農(nóng). 甜瓜SSR標(biāo)記遺傳多樣的性研究[J]. 東北農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報，2006，37（2）： 165-170.

[23] ZHU Zi-cheng， GAO Mei-ling， GAO Peng， LUAN Fei-shi. QTL ansalysis of the first fertile flower node of Cucumis melo L.[J]. Acta Horticulturae Sinica， 2011， 38（9）： 1573-1760.

朱子成，高美玲，高鵬，欒非時. 甜瓜結(jié)實花初花結(jié)位QTL分析[J]. 園藝學(xué)報，2011，38（9）：1573-1760.

[24] GAO Mei-ling， ZHU Zi-cheng， GAO Peng， LUAN Fei-shi. A microsatellite-based genetic map of melon and localization of gene for gynoecious sex expression using recombinant inbred lines[J]. Acta Horticulturae Sinica， 2011， 38（9）： 1308-1316.

高美玲，朱子成，高鵬，欒非時. 甜瓜重組自交系群體SSR遺傳圖譜構(gòu)建及純雌性基因定位[J]. 園藝學(xué)報，2011，38（9）： 1308-1316.

[25] WANG Xian-lei， GAO Xing-wang， LI Guan， WANG Hui-lin， GENG Shou-dong， KANG Feng， NIE Xiang-xiang. Construction of a melon genetic map with fruit and seed QTLs[J]. Hereditas， 2011.

王賢磊，高興旺，李冠，王惠林，耿守東，康鋒，聶祥祥. 甜瓜遺傳圖譜構(gòu)建及果實與種子QTL分析[EB/OL].遺傳，2011. http：//www.cnki.net/.

[26] MAO Chuan-zao， CHENG Shi-hua. Analysis of accuracy and influence factor in QTL mapping about agronomic traits in rice （Oryza sativa L.）[J]. Journal of Agricultural Biotechnology，1999，7（4）： 368 -394.

毛傳澡，程式華. 水稻農(nóng)藝性狀QTL定位精確性及其影響因素分析[J]. 農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學(xué)報，1999，7（4）： 368-394.