辛伐他汀對apoE－/－小鼠HDL抗炎抗氧化功能的影響

田迪，秦亞飛，應(yīng)如，譚迎，馮力，袁勇，賴文巖，郭志剛

動脈粥樣硬化性疾病是目前全球死亡的主要原因之一。目前認(rèn)為氧化應(yīng)激和炎癥在動脈粥樣硬化(atherosclerosis，AS)的發(fā)生發(fā)展過程中具有重要作用[1]，抗炎抗氧化在抗動脈粥樣硬化過程中具有重要意義。研究已證實(shí)高密度脂蛋白(high density lipoprotein，HDL)除具有促膽固醇逆轉(zhuǎn)運(yùn)作用外，還有抗炎抗氧化的功能[2]，改善HDL抗炎抗氧化功能可延緩動脈粥樣硬化進(jìn)展。血清屏氧酶1(paraoxonase 1，PON1)活性、髓過氧化物酶(myeloperoxidase，MPO)活性和HDL炎癥指數(shù)(highdensity lipoprotein inflammatory index，HII)這3個指標(biāo)可準(zhǔn)確反映HDL的抗炎抗氧化功能[2]，國外研究曾報道冠心病患者血清PON1活性明顯下降[3]，HII明顯升高[4]，而關(guān)于反映載脂蛋白A-I(apoA-I)損傷程度的血清MPO活性及聯(lián)合檢測上述3個指標(biāo)的研究目前國內(nèi)外尚未見報道。

辛伐他汀作為目前臨床常用的他汀類調(diào)脂藥物之一，具有減輕動脈粥樣硬化[5]、穩(wěn)定斑塊、減少心血管事件[6]、抑制心肌梗死后心室重構(gòu)[7]的作用。研究已證實(shí)其抗動脈粥樣硬化的主要機(jī)制在于降低低密度脂蛋白膽固醇(low density lipoproteincholesterol，LDL-C)水平，而且具有輕度升高高密度脂蛋白膽固醇(high density lipoprotein-cholesterol，HDL-C)的作用[8]，但其是否對HDL的抗炎抗氧化功能具有影響目前國內(nèi)鮮見報道。本實(shí)驗(yàn)采用apoE－/－小鼠動脈粥樣硬化小鼠模型，檢測其血清PON1活性、MPO活性、HII以及其他相關(guān)指標(biāo)，研究辛伐他汀對HDL抗炎抗氧化功能的影響，以進(jìn)一步探討辛伐他汀抗動脈粥樣硬化的作用機(jī)制。

圖1 動物干預(yù)流程圖Fig. 1 Flow chart of experimental protocol of interventions

1 材料與方法

1.1 材料 8周齡健康雄性apoE－/－小鼠購自北京大學(xué)醫(yī)學(xué)部實(shí)驗(yàn)動物科學(xué)部，同齡健康雄性C57BL/6J小鼠購自南方醫(yī)科大學(xué)動物實(shí)驗(yàn)中心，普通飼料和高脂飼料(含21%豬油、0.15%膽固醇)[9]均購自廣東省醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動物中心。辛伐他汀購自杭州默沙東制藥有限公司，乙酸苯酯購自美國Sigma公司，血清MPO活性測定試劑盒購自南京建成生物工程研究所，小鼠高敏C反應(yīng)蛋白(high sensitive C reactive protein，hs-CRP)酶聯(lián)免疫分析(ELISA)試劑盒購自武漢華美生物工程有限公司(Cusabio)。AU-5421型生化自動分析儀、BX51型電子顯微鏡及圖像采集系統(tǒng)購自日本Olympus公司，Universal 16R型低溫冷凍高速離心機(jī)購自美國Hettich公司，ND-1000 Spectrophotometer型分光光度儀購自美國NanoDrop公司。

1.2 方法

1.2.1 動物分組及干預(yù) 18只8周齡C57BL/6J小鼠給予普通飼料喂養(yǎng)，作為對照組，30只8周齡apoE－/－小鼠給予高脂飼料喂養(yǎng)，喂養(yǎng)4周后隨機(jī)乙醚麻醉處死兩組小鼠各6只，檢測相應(yīng)指標(biāo)作為研究基線(第4周)。其余24只apoE－/－小鼠隨機(jī)分為動脈粥樣硬化組(AS組，n=12)和辛伐他汀組(n=12)，剩下的12只C57BL/6J小鼠仍作為對照組。對照組和AS組小鼠繼續(xù)原飼料喂養(yǎng)，辛伐他汀組在高脂飼料喂養(yǎng)基礎(chǔ)上給予辛伐他汀5mg/(kg·d)灌服，對照組和AS組小鼠給予等體積生理鹽水灌服，第8、16周后，分別處死3組小鼠(每組每個時間點(diǎn)6只)并測定相應(yīng)指標(biāo)。動物干預(yù)流程如圖1所示。

1.2.2 血脂測定 實(shí)驗(yàn)第4、8、16周末，在空腹12h狀態(tài)下麻醉小鼠后心臟采血，3000r/min離心10min，留取血清，－80℃冰箱保存?zhèn)溆?。采用酶法在日本日?6002020全自動生化儀上測定血清總膽固醇(total cholesterol，TC)、LDL-C、HDL-C、甘油三酯(triglyceride，TG)含量。

1.2.3 血清PON1活性測定 采用Rozenberg等[10]的分光光度法測定血清PON1活性：取反應(yīng)緩沖液(CaCl22mmol/L，Tris-HCl 0.1mol/L，pH8.0)1.3ml，加入5mmol/L乙酸苯酯150μl，于25℃預(yù)溫20min后，加入1:10倍稀釋的樣本血清50μl(稀釋液為反應(yīng)緩沖液)，反應(yīng)90s，用0.5mol/L EDTA 100μl終止反應(yīng)。然后用分光光度計于270nm波長處測定吸光度(A)值。同時設(shè)立血清對照和底物對照。酶活性計算公式：PON1活性=A×f×FV×103/(t×SV×L×ε)。A為凈吸光度值(即標(biāo)本A值－血清對照和底物對照的A值)，f為標(biāo)本稀釋倍數(shù)，F(xiàn)V為反應(yīng)終體積，t為反應(yīng)時間，SV為樣品體積，L為光徑，ε為摩爾消光系數(shù)，270nm波長處乙酸苯酯的ε=1310L/(mol·cm)。酶的活性單位(U)定義為每分鐘催化1μmol乙酸苯酯水解所需的酶量。

1.2.4 血清MPO活性測定 血清MPO活性根據(jù)南京建成生物工程研究所提供的試劑盒說明書進(jìn)行測定。酶活力單位定義：每升血清在37℃反應(yīng)體系中分解1μmol H2O2為1個酶活力單位。計算公式：MPO(U/L)=(測定管A值－對照管A值)/[11.3×取樣量(L)]。

1.2.5 血清hs-CRP含量測定 小鼠血清hs-CRP含量采用酶聯(lián)免疫分析法(ELISA)檢測，具體操作嚴(yán)格根據(jù)武漢華美生物工程有限公司(Cusabio)提供的小鼠試劑盒說明書進(jìn)行。

1.2.6 血清HII測定 血清HII采用非細(xì)胞學(xué)法[4]測定：10μl葡聚糖硫酸酯與100μl血清混合后8000×g離心10min，上清僅含HDL-C(無LDL-C和VLDLC)，用膽固醇試劑盒測定上清膽固醇量，調(diào)整膽固醇終濃度為10μg/ml；將2,7-二氫二氯熒光黃雙乙酸鈉(DCFH-DA)溶于新鮮甲醇(終濃度2mg/ml)，室溫下避光孵育30min，制成2,7-二氫二氯熒光黃(DCFH)溶液；將1-棕櫚酰-2-(5,6-環(huán)氧異前列腺素E2)錫甘油-3-磷酸膽堿溶液(PEIPC，終濃度為50μg/ml)10μl和含HDL的上清液90μl在黑聚苯乙烯微盤中混合，并放入37℃烤箱中孵育1h；再在微盤的每個孔中加入10μl DCFH溶液(0.2mg/ml)混合，放入37℃烤箱中孵育2h；用熒光分析儀分析熒光強(qiáng)度(激發(fā)波長為485nm，發(fā)射波長為530nm，終止波長為515nm)，如數(shù)值小于1，則判斷HDL顆粒有抗炎作用，如數(shù)值大于1，則判斷為有促炎作用(HDL缺乏時，將PEIPC氧化DCFH所形成的熒光強(qiáng)度標(biāo)準(zhǔn)化為數(shù)值1)。

1.2.7 主動脈斑塊面積測量 心臟采血后，在大體顯微鏡下從升主動脈起始部至髂動脈分叉處分離小鼠主動脈，然后縱行剖開主動脈，采用油紅O染色主動脈內(nèi)膜斑塊，拍照后應(yīng)用Image-plus 6.0圖像分析軟件分析主動脈斑塊/血管內(nèi)膜表面積比例。

1.3 統(tǒng)計學(xué)處理 所有計量資料均以x±s表示，并采用SPSS 13.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行兩樣本均數(shù)比較的獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，多組間總體均數(shù)比較在方差齊時采用單因素方差分析，方差不齊時采用Welch校正檢驗(yàn)，多個樣本均數(shù)間的多重比較方差齊時采用LSD-t檢驗(yàn)，方差不齊時采用Dunnett's T3檢驗(yàn)，相關(guān)性分析采用Spearman相關(guān)分析。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 3組小鼠血脂水平的變化 對照組第4、8、16周TC、TG、LDL-C、HDL-C水平比較無明顯變化；與4周比較，AS組小鼠給予高脂飼料8、16周后TC、TG、LDL-C水平均明顯升高(P＜0.05或P＜0.01)。AS組各時間點(diǎn)TC、TG、LDL-C水平與同時間點(diǎn)對照組比較均明顯升高(P＜0.05或P＜0.01)。第8周時，辛伐他汀組TC、TG水平與AS組比較明顯下降(P＜0.05或P＜0.01)，而LDL-C、HDL-C無明顯變化。第16周時，辛伐他汀組TC、TG、LDL-C水平與AS組比較均明顯降低(P＜0.05或P＜0.01)，但仍高于對照組(P＜0.01)，而HDL-C水平與AS組比較明顯升高(P＜0.05，表1)。

2.2 辛伐他汀對apoE－/－小鼠血清PON1活性、MPO活性、HII及hs-CRP含量的影響 與第4、8周時比較，第16周時對照組小鼠血清PON1活性明顯降低(P＜0.01)，MPO活性無明顯變化，HII、hs-CRP含量明顯升高(P＜0.05或P＜0.01)。隨時間進(jìn)展，AS組小鼠PON1活性逐漸降低，MPO活性、hs-CRP含量和HII均逐漸升高。AS組小鼠血清PON1活性在4周時與對照組比較無明顯差異，8、16周時則明顯低于對照組(P＜0.01)；MPO活性、hs-CRP、HII水平在4周時與對照組比較無明顯差異，8、16周時均明顯高于對照組(P＜0.01)。第8、16周時辛伐他汀組小鼠血清PON1活性均高于AS組(P＜0.01)，但低于對照組(P＜0.01)；hs-CRP含量均低于AS組，8周時與對照組比較無明顯差異，而16周時高于對照組(P＜0.01)；MPO活性和HII均低于AS組，但高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05或P＜0.01，表2)。

2.3 主動脈斑塊/血管內(nèi)膜表面積比值 油紅O染色后拍照并分析主動脈弓至胸主動脈斑塊/血管內(nèi)膜表面積比值，結(jié)果顯示AS組主動脈斑塊/血管內(nèi)膜表面積比值隨時間進(jìn)展逐漸增加，且明顯高于同期對照組(4周：9.90%±1.90% vs 2.24%±0.47%，P＜0.01；8周：33.23%±7.12% vs 2.45%±0.36%，P＜0.01；16周：44.30%±11.85% vs 2.54%±0.25%，P＜0.01)；辛伐他汀組16周時主動脈斑塊/血管內(nèi)膜表面積比值(19.77%±1.95%)與8周時(13.79%±2.01%)比較明顯增加(P＜0.01)，但均低于同時間點(diǎn)AS組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05，圖2)。

表1 實(shí)驗(yàn)第4、8、16周各組小鼠血脂水平比較(mmol/L，±s，n=6)Tab.1 Comparison on serum lipid levels among the three groups at 4, 8, 16 weeks (mmol/L,±s, n=6)

表1 實(shí)驗(yàn)第4、8、16周各組小鼠血脂水平比較(mmol/L，±s，n=6)Tab.1 Comparison on serum lipid levels among the three groups at 4, 8, 16 weeks (mmol/L,±s, n=6)

(1)P＜0.01, (2)P＜0.05 compared with control group; (3)P＜0.01, (4)P＜0.05 compared with AS group; (5)P＜0.01, (6)P＜0.05 compared with 4 weeks; (7)P＜0.01, (8)P＜0.05 compared with 8 weeks

Time point TC TG LDL-C HDL-C 4 weeks Control 3.27±0.27 0.71±0.17 0.44±0.10 2.41±0.38 AS 14.64±1.16(1) 1.84±0.27(1) 8.10±0.95(1) 2.96±0.46(2)8 weeks Control 3.52±0.41 0.79±0.14 0.53±0.11 2.46±0.21 AS 16.40±2.04(1) 2.31±0.34(1)(6) 9.32±1.18(1) 2.62±0.32 Simvastatin 11.78±1.57(1)(3) 1.96±0.12(1)(4) 8.13±1.81(1) 2.90±0.37(2)16 weeks Control 3.17±0.53 0.91±0.32 0.55±0.10 2.27±0.32 AS 22.42±1.99(1)(5)(7) 2.68±0.28(1)(5)(8) 12.45±1.29(1)(5)(7) 1.60±0.22(1)(5)(7)Simvastatin 14.89±2.06(1)(3)(8) 2.34±0.17(1)(4)(7) 7.59±1.25(1)(3) 2.03±0.40(4)(7)

表2 各組小鼠血清PON1活性、MPO活性、HII、hs-CRP水平(s, n=6)Tab. 2 Serum PON1 and MPO activity, HII and hs-CRP levels of the three groups ±s, n=6)

表2 各組小鼠血清PON1活性、MPO活性、HII、hs-CRP水平(s, n=6)Tab. 2 Serum PON1 and MPO activity, HII and hs-CRP levels of the three groups ±s, n=6)

(1)P＜0.01, (2)P＜0.05 compared with control group; (3)P＜0.01, (4)P＜0.05 compared with AS group; (5)P＜0.01, (6)P＜0.05 compared with 4 weeks; (7)P＜0.01, (8)P＜0.05 compared with 8 weeks

Time point PON1 (U/ml) MPO (U/L) HII hs-CRP (ng/ml)4 weeks Control 126.32±7.52 27.52±3.00 0.58±0.12 96.30±20.32 AS 121.13±9.50 31.14±3.21 0.72±0.11 116.76±16.15 8 weeks Control 124.89±6.98 29.84±2.92 0.61±0.07 110.06±14.39 AS 100.11±7.72(1)(5) 50.47±3.12(1)(5) 0.99±0.11(1)(5) 141.39±10.25(1)(5)Simvastatin 116.18±6.74(3) 39.07±3.17(1)(3) 0.81±0.09(1)(3) 118.79±15.98(4)16 weeks Control 103.66±10.26(5)(7) 30.84±3.12 0.79±0.09(5)(7) 132.19±15.35(5)(8)AS 48.03±6.47(1)(5)(7) 56.30±3.77(1)(5)(7) 1.33±0.11(1)(5)(7) 236.09±18.87(1)(5)(7)Simvastatin 63.39±5.96(1)(3)(7) 43.20±6.66(2)(3) 0.96±0.09(1)(3)(8) 193.59±27.58(1)(3)(7)

圖2 實(shí)驗(yàn)16周后3組小鼠主動脈斑塊面積(油紅O染色)Fig. 2 The percentage plaque area of the three groups at 16 weeks (oil red O staining)A. Control group; B. AS group; C. Simvastatin group

2.4 相關(guān)性分析 將血清PON1活性、MPO活性、HII、hs-CRP含量與主動脈斑塊/血管內(nèi)膜表面積比值進(jìn)行相關(guān)性分析，結(jié)果顯示小鼠血清PON1活性與主動脈斑塊/血管內(nèi)膜表面積比值呈顯著負(fù)相關(guān)(r=－0.679，P＜0.01)，MPO活性、HII、hs-CRP與主動脈斑塊/血管內(nèi)膜表面積比值均呈顯著正相關(guān)(r值分別為0.893、0.813、0.701，P＜0.01)。

3 討 論

本研究中，高脂飼養(yǎng)組的apoE－/－小鼠血脂水平明顯升高，主動脈油紅O染色可見明顯斑塊形成，提示動脈粥樣硬化小鼠模型造模成功。

辛伐他汀是一種3-羥基-3-甲基戊二酰輔酶A(3-hydroxy-3-methyl glutaryl coenzyme A，HMG-CoA)還原酶抑制劑，目前已明確其具有降低LDL-C及輕度升高HDL-C的作用[8]。本研究中與動脈粥樣硬化組比較，經(jīng)辛伐他汀干預(yù)后小鼠血清TC、LDL-C水平均明顯降低，同時血清HDL-C水平升高，與相關(guān)研究結(jié)果一致[11]。

PON1活性、MPO活性、HII均為準(zhǔn)確反映HDL抗炎抗氧化功能的特異性指標(biāo)，雖然國外學(xué)者曾報道冠心病患者血清PON1活性明顯下降[3]，HII明顯升高[4]，但反映apoA-I損傷程度的血清MPO活性目前國內(nèi)外鮮有研究。本研究在動物實(shí)驗(yàn)中聯(lián)合檢測上述3個指標(biāo)，可準(zhǔn)確反映HDL的抗炎抗氧化功能以及辛伐他汀對HDL抗炎抗氧化功能的影響。

PON1是HDL重要的抗氧化酶之一，與HDL的抗氧化、抗動脈粥樣硬化作用密切相關(guān)。由于PON1必須與apoA-I結(jié)合才能發(fā)揮抗氧化功能，所以PON1的血清濃度不能完全反映HDL抗氧化功能的強(qiáng)弱，而其活性才能更好地反映HDL的抗氧化功能[12]。Graner等[13]研究發(fā)現(xiàn)冠心病組PON1活性及濃度明顯高于正常對照組，且其活性及濃度與冠脈病變嚴(yán)重程度相關(guān)。本研究也發(fā)現(xiàn)AS組血清PON1活性較對照組明顯下降，而辛伐他汀干預(yù)后apoE－/－小鼠血清PON1活性較AS組明顯升高，提示辛伐他汀可能有助于升高血清PON1活性，從而改善HDL的抗氧化功能。

MPO是一種由中性粒細(xì)胞、單核巨噬細(xì)胞等產(chǎn)生的強(qiáng)致氧化性酶，可氧化修飾血液循環(huán)和組織中的apoA-I，其色氨酸、酪氨酸、賴氨酸和甲硫氨酸殘基被氧化修飾后可發(fā)生結(jié)構(gòu)改變，從而影響其與ATP結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)子A1(ATP binding cassette transporter A1，ABCA1)的結(jié)合，進(jìn)而影響HDL經(jīng)ABCA1途徑的促膽固醇逆轉(zhuǎn)運(yùn)及抗炎抗氧化功能[14]。本研究中AS組血清MPO氧化活性較對照組顯著升高，提示其HDL的正常功能受到損害，而辛伐他汀組血清MPO活性較AS組明顯降低，表明辛伐他汀可降低血清MPO活性，改善HDL的抗炎抗氧化功能。

AS是以血管壁慢性炎癥為特征的病理過程。正常情況下HDL可促進(jìn)膽固醇逆轉(zhuǎn)運(yùn)，抑制LDL的氧化修飾，減少炎癥因子產(chǎn)生，從而發(fā)揮抗炎功能，而在AS狀態(tài)下，HDL并沒有抗AS作用，甚至還可促進(jìn)血管壁的炎癥反應(yīng)。有研究表明冠心病患者HDL炎癥指數(shù)明顯高于正常對照組，HDL功能處于致炎狀態(tài)[4]。Navab等[15]研究發(fā)現(xiàn)，冠心病患者接受辛伐他汀(40mg/d)治療6周后HII即明顯下降。本研究也得到了相似的結(jié)果，再次證明辛伐他汀可降低HII，促使HDL由致炎狀態(tài)向抗炎狀態(tài)轉(zhuǎn)變。

C反應(yīng)蛋白(CRP)是目前研究最多的AS相關(guān)炎性生物標(biāo)志物，盡管CRP是一種急性期反應(yīng)產(chǎn)物，由肝細(xì)胞在感染、損傷等應(yīng)激條件下受IL-6誘導(dǎo)合成，但參與了AS形成的全過程，其血漿水平升高高度提示存在AS風(fēng)險。流行病學(xué)資料表明血清或血漿中CRP水平升高與AS密切相關(guān)，是AS的獨(dú)立預(yù)測因素[16]。在本研究中，AS組血清hs-CRP水平較對照組明顯升高，而辛伐他汀治療后其血清水平顯著下降，與主動脈斑塊/血管內(nèi)膜表面積比值這一AS金標(biāo)準(zhǔn)的測定結(jié)果一致，進(jìn)一步表明辛伐他汀可抑制炎癥反應(yīng)，進(jìn)而發(fā)揮抗AS作用。

綜上所述，辛伐他汀除降低LDL-C、升高HDL-C水平外，還可通過升高PON1活性、降低MPO活性、降低HII、抑制炎癥反應(yīng)等途徑改善HDL的抗炎抗氧化功能，從而減少主動脈內(nèi)膜斑塊面積，發(fā)揮抗AS作用。本研究結(jié)果提示辛伐他汀不僅是一種降低LDL-C、升高HDL-C水平的調(diào)脂藥物，而且具有改善HDL功能的作用，后者也應(yīng)該受到我們的重視。

[1] Berliner JA, Navab M, Fogelman AM, et al. Atherosclerosis:basic mechanisms: oxidation, inflammation and genetics[J].Circulation, 1995, 91(9): 2488-2496.

[2] Ansell BJ, Watson KE, Fogelman AM, et al. High-density lipoprotein function recent advances[J]. J Am Coll Cardiol,2005, 46(10): 1792-1798.

[3] Tang WH, Hartiala J, Fan Y, et al. Clinical and genetic association of serum paraoxonase and arylesterase activities with cardiovascular risk[J]. Arterioscler Thromb Vasc Biol, 2012,32(11): 2803-2812.

[4] Ansell BJ, Navab M, Hama S, et al. Inflammatory/antiinflammatory properties of high-density lipoprotein distinguish patients from control subjects better than highdensity lipoprotein cholesterol levels and are favorably affected by simvastatin treatment[J]. Circulation, 2003, 108(22): 2751-2756.

[5] Sun X, Tong H, Zhang M, et al. The comparative study of Rosuvastatin and Simvastatin on carotid intima-media thickness in patients with coronary heart disease[J]. Chin J Pract Intern Med, 2012, 32(6): 452-545. [孫曉, 佟浩, 張曼, 等. 瑞舒伐他汀和辛伐他汀對急性冠脈綜合征頸動脈內(nèi)中膜厚度影響對比研究[J]. 中國實(shí)用內(nèi)科雜志, 2012, 32(6): 452-545.]

[6] Li JY, Zhao YL, Dong J. Effect of simvastatin on expression of visfatin and leptin mRNA in ventral adipose tissue of rats with atherosclerosis[J]. J Zhengzhou Univ (Med Sci), 2012, 47(4):518-521. [李京曄, 趙玉蘭, 董靜. 辛伐他汀對動脈粥樣硬化大鼠內(nèi)臟脂肪組織中內(nèi)脂素及瘦素mRNA表達(dá)的影響[J].鄭州大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版), 2012, 47(4): 518-521.]

[7] Xiao XB, Qin S, Zhang DY, et al. Effects of simvastatin on ventricular remodeling after myocardial infarction induced by TGF-β1/TAK1 pathway in rat[J]. Med J Chin PLA, 2009,34(9): 1085-1088. [肖祥彬, 覃數(shù), 張冬穎, 等. 辛伐他汀對大鼠心肌梗死后心室重構(gòu)的影響及其與TGF-β1/TAK1信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的相關(guān)性[J]. 解放軍醫(yī)學(xué)雜志, 2009, 34(9): 1085-1088.]

[8] Liao JK. Effects of statins on 3-hydroxy-3-methylglutaryl coenzyme a reductase inhibition beyond low-density lipoprotein cholesterol[J]. Am J Cardiol, 2005, 96(5A): 24F-33F.

[9] Kuzuya M, Nakamura K, Sasaki T, et al. Effect of MMP-2 deficiency on atherosclerotic lesion formation in apoE-deficient activity and concentration with angiographic severity and extent of coronary artery disease[J]. J Am Coll Cardiol, 2006, 47(12):2429-2435.

[14] Zheng L, Nukuna B, Brennan ML, et al. Apolipoprotein AI is a selective target for myeloperoxidase-catalyzed oxidation and functional impairment in subjects with cardiovascular disease[J].J Clin Invest, 2004, 114(4): 529-541.

[15] Navab M, Anantharamaiah GM, Reddy ST, et al. The oxidation hypothesis of atherogenesis: the role of oxidized phospholipids and HDL[J]. J Lipid Res, 2004, 45(6): 993-1007.

[16] Pearson TA, Mensah GA, Alexander RW, et al. Markers of inflammation and cardiovascular disease: application to clinical and public health practice: A statement for healthcare professionals from the Centers for Disease Control and Prevention and the American Heart Association[J]. Circulation,2003, 107(3): 499-511.mice[J]. Arterioscler Thromb Vasc Biol, 2006, 26(5): 1120-1125.

[10] Rozenberg O, Shih DM, Aviram M. Human serum paraoxonase(PON1) decreases macrophage cholesterol biosynthesis:a possible role for its phospholipase A2 activity and lysophosphatidylcholine formation[J]. Arterioscler Thromb Vasc Biol, 2003, 23(3): 461-467.

[11] Barter PJ, Brandrup-Wognsen G, Palmer MK, et al. Effect of statins on HDL-C: a complex process unrelated to changes in LDL-C: analysis of the VOYAGER Database[J]. J Lipid Res,2010, 51(6): 1546-1553.

[12] Escola-Gil JC, Rotllan N, Julve J, et al. In vivo macrophagespecific RCT and antioxidant and antiinflammatory HDL activity measurements: New tools for predicting HDL atheroprotection[J]. Atherosclerosis, 2009, 206(2): 321-327.

[13] Graner M, James RW, Kahri J, et al. Association of paraoxonase-1