雞弓形蟲病研究進(jìn)展

龍 祥，舒 蘭，陳雪嬌，江 濤 （長江大學(xué)動物科學(xué)學(xué)院，湖北荊州434025）

弓形蟲病是由剛地弓形蟲 （Toxoplasmagondii）寄生于人、畜、野生動物、鳥類及一些冷血動物體內(nèi)所引起的人畜共患病。該病不但威脅人類健康，亦嚴(yán)重影響畜牧業(yè)發(fā)展。弓形蟲病在人類和動物之間廣泛流行，人類通過攝取未充分加熱熟透的食物，飲用被卵囊污染的水，或者偶然接觸到自然界中的卵囊而被感染［1］。然而，只有一小部分弓形蟲感染的人和動物會表現(xiàn)出臨床癥狀。目前，人類還不確定弓形蟲病的嚴(yán)重程度是否取決于宿主本身的免疫能力還是寄生蟲的感染劑量，或者是其他的因素［2］。過去人們認(rèn)為，弓形蟲病主要為隱性感染，危害不嚴(yán)重。近年來，隨著研究的深入，人們發(fā)現(xiàn)弓形蟲病的流行表現(xiàn)出許多新的特點(diǎn)，其危害遠(yuǎn)遠(yuǎn)高出人們的估計(jì)。因此，弓形蟲病應(yīng)當(dāng)引起高度重視。

1 弓形蟲的危害

弓形蟲被認(rèn)為是孕婦宮內(nèi)感染導(dǎo)致胚胎畸形的五大病原體之一，蟲體在胎盤組織內(nèi)呈散點(diǎn)狀分布，可裂解被侵襲細(xì)胞，留下細(xì)胞殘跡或呈絮狀物，導(dǎo)致局灶性組織缺損、周圍炎癥細(xì)胞增殖等現(xiàn)象。先天性弓形蟲病人80%的有精神發(fā)育障礙，50%有視力障礙。也可伴有全身表現(xiàn)，如在新生兒期有發(fā)熱、腹瀉、黃疽、肝脾腫大、皮疹、心肌炎等。獲得性弓形蟲病患者在免疫力低下時呈顯性感染，如AIDS患者、器官移植和腫瘤病人等，嚴(yán)重時可致患者死亡［3］。

在全世界范圍內(nèi)，弓形蟲在人類和動物之間廣泛流行，據(jù)估計(jì)有25%的世界人口攜帶這種寄生蟲［4］。在最近的全球報(bào)告中，通過觀察自然感染弓形蟲病的雞的臨床實(shí)驗(yàn)得出一個結(jié)論，臨床弓形蟲病在雞中非常罕見。然而，在弓形蟲的流行病學(xué)中，自由放養(yǎng)的雞群被認(rèn)為是最重要的宿主，對貓和人類來說是一種重要的傳染源，貓是弓形蟲的終末宿主，隨貓糞便排出的卵囊被雞啄食后，在雞體內(nèi)繼續(xù)完成發(fā)育，人類通過接觸病雞或食用未煮熟的產(chǎn)品而感染弓形蟲。另外，對于那些自由覓食的禽類 （如散養(yǎng)的雞），其弓形蟲的感染率可以較好地反映人們居住環(huán)境 （土壤，水等）中弓形蟲卵囊的含量。因此，研究雞弓形蟲病具有重要的公共衛(wèi)生學(xué)意義［5］。

2 雞弓形蟲病的發(fā)現(xiàn)

1939年，德國獸醫(yī)Hepding最早報(bào)道了雞弓形蟲病臨床變化［6］。2005年國外學(xué)者報(bào)道了以色列商品化散養(yǎng)雞中的弓形蟲感染情況，血清學(xué)陽性率為53．4%，其中96只雞中有46．6%分離到了弓形蟲，尼加拉瓜、巴西、智利等國也報(bào)道了雞弓形蟲?。?］。國內(nèi)也有多起雞群感染弓形蟲的報(bào)道。1980年，閻長清等［8］在雞的肝、脾、肺和淋巴結(jié)中檢出弓形蟲原蟲，并通過小白鼠分離到呈新月形的蟲株。與哺乳動物相比，雞群與其他鳥類弓形蟲感染較為普遍，存在多種基因型，是重要的弓形蟲感染源。

盡管在禽類中，關(guān)于弓形蟲病自發(fā)感染的報(bào)道不如其他種類的常見，但雞攜帶弓形蟲的幾率很大，為弓形蟲的傳播提供了載體，弓形蟲病在養(yǎng)雞場中可以獲得流行的機(jī)會［9］。在近代研究弓形蟲種群的報(bào)告中顯示弓形蟲有多種基因型，在北美和歐洲主要發(fā)現(xiàn)弓形蟲的克隆譜系有3種基因型I、II、III，在南美發(fā)現(xiàn)了更大的遺傳多樣性，包括大量基因隔離群，目前還發(fā)現(xiàn)不同的非典型基因型中的特殊等位基因存在于不同的遺傳標(biāo)記區(qū)域上［10］。

3 雞弓形蟲病的調(diào)查

自由放養(yǎng)的雞和小型哺乳動物在弓形蟲的生活史中起著非常重要的作用，因?yàn)楸还蜗x感染的貓向自然界中散播的卵囊容易被它們采食。盡管雞很容易被弓形蟲感染，但臨床癥狀表現(xiàn)并不明顯。目前只有少數(shù)報(bào)告報(bào)道了臨床上雞的弓形蟲病，雞視神經(jīng)交叉的壞死被看作是雞弓形蟲病的典型癥狀。在最近40a中，具有這種特征的雞弓形蟲的臨床癥狀的病例報(bào)道沒有在文獻(xiàn)中出現(xiàn)過。由于前人沒有留下足夠的可供參考的材料，所以這些報(bào)道也許是關(guān)于雞弓形蟲研究的開始或者是沒有被承認(rèn)的推測［11］。在美國，曾有2篇文章報(bào)道過關(guān)于雞弓形蟲臨床癥狀，Ostendorf等［12］報(bào)道在一個印第安納州的農(nóng)場中的雞死于弓形蟲引起的腦炎和脈絡(luò)膜視網(wǎng)膜炎；Goodwin等［13］用免疫組織化學(xué)診斷出喬治亞州的3只雞死于末梢神經(jīng)炎，當(dāng)然，這其中不能完全排除是孢疹病毒的可能性。

自1939年首先報(bào)告雞弓形體病以來，隨后一些國家和地區(qū)也陸續(xù)有所報(bào)道。我國陳義民等［14］1981年在甘肅靖遠(yuǎn)縣某農(nóng)場用IHA檢查206只雞，檢出弓形蟲抗體陽性雞6只，陽性率為2．91%，同年劉雪筠等［15］在廣東省佛山某畜牧場檢出雞弓形體病，2500只雛雞中死亡287只，死亡率為11．48%。據(jù)任家琰［16］報(bào)道，山西省雞弓形蟲病陽性檢出率為1．14%，呂元聰［17］報(bào)道我國14省的部分地區(qū)雞弓形蟲抗體的平均陽性率為15．69%，趙玉強(qiáng)等［18］調(diào)查顯示山東省部分縣市的雞弓形蟲感染率較低為2．00%，苑文英等［19］報(bào)道河北省雞弓形蟲病的平均陽性率為39．23%，陳才英［20］報(bào)道青海省大通縣雞場弓形蟲抗體平均陽性率為10．6%，江濤等［21］報(bào)道荊州市市售雞弓形蟲的平均感染率為25．17%。由此看出，雞群感染弓形蟲比較普遍，可能是弓形蟲感染其他動物和人類的重要潛在傳染源，應(yīng)當(dāng)引起人們的高度重視。

4 弓形蟲的檢測

4．1 涂片法

采取肝和心血涂片，瑞氏染色，鏡檢，在血涂片上可發(fā)現(xiàn)視野中有多量的，呈一端較尖另一端鈍圓、胞漿紅色、中央有紫紅色核，如香焦形、橘瓣形或橢圓形的弓形蟲滋養(yǎng)體，大小不均。在血液涂片中極易查到，數(shù)量較多，一個視野少由1～3個，多則一簇簇，一般可見3～7個，而且基本都在血漿中，在個別紅細(xì)胞內(nèi)也有弓形蟲存在，白細(xì)胞中尚未發(fā)現(xiàn)［22］。

4．2 改良凝集試驗(yàn) （MAT）

Dubey等［23］曾通過改良凝集試驗(yàn)用8倍的稀釋液檢測鳥血清中的弓形蟲抗體。將弓形蟲速殖子通過靜脈接種的方式感染35日齡的健康雛雞，發(fā)現(xiàn)除感染雜菌死亡的1只以外，其余所有接種雛雞通過改良凝集試驗(yàn) （MAT）檢測證實(shí)均感染了弓形蟲，且在感染后第7天即有弓形蟲特異抗體出現(xiàn)，一直持續(xù)到試驗(yàn)結(jié)束，其抗體最高峰出現(xiàn)在感染后21d（抗體滴度為1︰640）。

4．3 膠體金標(biāo)記

王艷華等［24］利用膠體金標(biāo)記弓形蟲代謝分泌抗原，利用雙抗原夾心法研制出了弓形蟲抗體金標(biāo)檢測試紙條，在對弓形蟲陰、陽性血清檢測中，與弓形蟲間接血凝試驗(yàn) （IHA）檢測結(jié)果符合率為82．4%，其中弓形蟲IHA檢測陽性的血清金標(biāo)試紙條檢測全部為陽性。該試紙條法的靈敏度明顯高于IHA法，同時具有良好的特異性、敏感性、重復(fù)性和穩(wěn)定性，適用于弓形蟲病早期檢測和診斷，操作簡單，特別適合在基層推廣應(yīng)用。

4．4 PCR檢測

顏超等［25］用PCR方法對接種雛雞體內(nèi)的弓形蟲DNA進(jìn)行檢測，發(fā)現(xiàn)最早在感染后14d于雛雞心臟內(nèi)檢測出，并一直持續(xù)到感染后28d，將PCR檢測結(jié)果為陽性的組織通過鹽酸-胃蛋白酶溶液消化處理，制作成組織懸液接種至小白鼠體內(nèi)，并分離得到了弓形蟲類似體。提取該生物的DNA，經(jīng)特異PCR檢測方法及測序證實(shí)分離到的弓形蟲類似體為剛地弓形蟲。對本次試驗(yàn)中雛雞PCR檢測陽性的組織進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，發(fā)現(xiàn)心臟是本次感染雛雞檢出率最高的組織，其次是肺、腦、脾，再次是眼，最后是肝臟。

除上述方法外，在實(shí)際操作過程中還有ELISA等方法［26］。

5 小結(jié)

人類感染弓形蟲后通常不會表現(xiàn)出臨床癥狀，但對于免疫功能不全的人，會繼發(fā)導(dǎo)致其他嚴(yán)重的疾病，甚至?xí)鹚劳?。在妊娠期間，弓形蟲會通過胎盤引起胎兒流產(chǎn)、小產(chǎn)或畸形。目前，認(rèn)為雞排放到自然界中的帶有弓形蟲卵囊的糞是重要的傳染源。近幾年，通過大量的實(shí)驗(yàn)研究，雞弓形蟲病診斷研究方面已取得較大進(jìn)展，一些研究成果已經(jīng)或正在對弓形蟲病的防治產(chǎn)生積極影響。目前尚無治療弓形蟲病的理想特效藥物，實(shí)踐中應(yīng)用較多是磺胺類藥物。而此類藥物在感染后期不能抑制蟲體進(jìn)入組織或細(xì)胞繁殖，該病多與其他細(xì)菌病或病毒病混合感染，故此在用藥后不能完全制止病雞死亡。無論弓形蟲是單純感染還是混合感染，早期診斷和治療尤為重要，否則難以收到滿意效果。加大對弓形蟲病的研究，開展雞群感染情況的調(diào)查以及此類感染在人弓形蟲病和其他動物弓形蟲病流行中的作用，對于提高我國弓形蟲病防控具有重要意義。

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