實(shí)驗(yàn)動(dòng)物麻醉的應(yīng)用研究(附1000例報(bào)告)*

周立才，張秀蘭，石 晶，王利娜，金大慶，李衛(wèi)民

(首都醫(yī)科大學(xué)平谷教學(xué)醫(yī)院，北京，101200)

2009年4月至今我中心開展了40 多期外科腹腔鏡培訓(xùn)班，30 多期消化內(nèi)鏡及心臟介入培訓(xùn)班，協(xié)助外院完成醫(yī)學(xué)課題研究40 多項(xiàng)。各種實(shí)驗(yàn)動(dòng)物麻醉近2 000 例，其中實(shí)驗(yàn)用豬的麻醉已超過(guò)1 000例，我們從中總結(jié)了對(duì)實(shí)驗(yàn)豬麻醉的原則、方法及注意事項(xiàng)，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 2009年4月至2013年4月本中心麻醉實(shí)驗(yàn)用豬共計(jì)1 000 頭，3～24 個(gè)月，均為雌性，體重平均(40 ±20)kg，臨床檢查健康，由北京市房山區(qū)琉璃河實(shí)驗(yàn)用豬場(chǎng)購(gòu)入。在同一環(huán)境下飼養(yǎng)3～7 d 再進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

1.2 實(shí)驗(yàn)器械與藥品 實(shí)驗(yàn)器械包括麻醉機(jī)、監(jiān)護(hù)儀、麻醉床、喉鏡、聽診器及其他常用物品。實(shí)驗(yàn)藥品包括阿托品、地塞米松、咪達(dá)唑侖、速眠新、琥珀酰膽堿、地西泮注射液、利多卡因等。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及實(shí)驗(yàn)人員麻醉前均做好充分的準(zhǔn)備，麻醉過(guò)程中注意實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的生理反應(yīng)及生命體征的變化。

1.3.1 麻醉前的準(zhǔn)備

1.3.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的術(shù)前準(zhǔn)備 根據(jù)不同的實(shí)驗(yàn)選擇合適的動(dòng)物。一般行腹腔鏡手術(shù)的豬需15～20 kg，其體內(nèi)各器官已基本發(fā)育完全，體型偏小，利于腹腔鏡器械的操作;行心臟介入的豬最好為50 kg 以上，以便術(shù)者更好地尋找目標(biāo)血管及在血管內(nèi)操作。術(shù)前禁飲食至關(guān)重要。通常實(shí)驗(yàn)前禁食6～8 h、禁水2 h，以保證其胃部空虛，防止充滿食物的胃壓迫膈肌從而影響豬的呼吸［1］;同時(shí)防止嘔吐及誤吸;不僅利于氣管插管的操作，同時(shí)也提高了操作的安全性。如需行胃腸鏡手術(shù)，則至少禁食72 h，禁水12 h，以達(dá)到充分胃排空的目的，利于術(shù)中視野的清晰暴露。同時(shí)，術(shù)前盡量將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物單籠飼養(yǎng)(圖1)，每天定期清理籠舍;不僅可避免豬產(chǎn)生的大量污染物影響手術(shù)室的環(huán)境衛(wèi)生，同時(shí)在一定程度上提高了術(shù)中的無(wú)菌程度。

1.3.1.2 麻醉人員的術(shù)前準(zhǔn)備 術(shù)前必須掌握實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的一般情況，根據(jù)豬的身體狀況調(diào)節(jié)麻醉藥劑量，對(duì)于體弱者，適量減少麻醉用藥。麻醉前應(yīng)穿戴合適的手術(shù)衣、帽子、口罩、無(wú)菌手套，做好自身防護(hù)。根據(jù)所施行的手術(shù)制定合理的麻醉方案，準(zhǔn)備麻醉儀器、設(shè)備、藥品等。

1.3.1.3 麻醉物品的術(shù)前準(zhǔn)備 (1)實(shí)驗(yàn)儀器的準(zhǔn)備:麻醉機(jī)、監(jiān)護(hù)儀、吸引器各一臺(tái)，連接正確，檢查性能是否良好、有無(wú)漏氣，氧氣是否充足、鈉石灰有無(wú)變色，變色時(shí)應(yīng)及時(shí)更換，以免造成CO2蓄積中毒。(2)插管準(zhǔn)備:喉鏡、管芯、氣管導(dǎo)管、吸痰管、注射器、牙墊、舌鉗、聽診器、簡(jiǎn)易呼吸器等。豬的氣管導(dǎo)管較細(xì)，一般體重＜25 kg 的豬，選擇直徑＜6 mm的氣管導(dǎo)管;50 kg 的豬選擇內(nèi)徑為9 mm 氣管導(dǎo)管;體型較大的豬，導(dǎo)管直徑應(yīng)為14～16 mm［1］。由于豬的口腔與咽喉間的夾角較小，趨于平行(圖2)，與人的口咽近乎垂直的夾角具有明顯區(qū)別，因此本中心特制了直鏡，更方便挑起豬的會(huì)厭。成年豬的口腔至?xí)捀康木嚯x明顯長(zhǎng)于人，本中心對(duì)喉鏡的葉片長(zhǎng)度也進(jìn)行了適當(dāng)?shù)募娱L(zhǎng)(圖3、圖4)，更符合豬咽喉部的生理解剖。

1.3.1.4 麻醉誘導(dǎo)藥、麻醉維持藥及輸液用品的準(zhǔn)備 術(shù)前準(zhǔn)備相應(yīng)的麻醉藥品及常用的搶救藥物，如阿托品、多巴胺等。待豬保定麻醉后開放外周靜脈通路，通常選擇雙下肢作為穿刺點(diǎn)。

1.3.2 麻醉誘導(dǎo)階段

1.3.2.1 誘導(dǎo)前的給藥 麻醉誘導(dǎo)前常規(guī)肌注阿托品0.5 mg、地塞米松10 mg，以減少唾液腺及氣管腺體的分泌，防止過(guò)敏反應(yīng)。麻醉誘導(dǎo)藥物選用咪達(dá)唑侖0. 1～0.2 mg/kg及速眠新0.25～0.3 ml/kg 復(fù)合用藥，觀察豬的反應(yīng)，一般給藥5～10 min 后，豬會(huì)變得安靜、閉眼、嗜睡，對(duì)外界刺激反應(yīng)差，其后自行臥地，此時(shí)稱為保定麻醉。將誘導(dǎo)麻醉后的豬放置到特制的操作床(圖5)。放置為仰臥位，固定四肢于操作床的四角，防止插管過(guò)程中豬過(guò)分躁動(dòng)。

1.3.2.2 誘導(dǎo)后氣管插管 盡量伸展其頭部、頸部，助手將舌拉出，用兩塊大紗布分別上下固定上頜骨及鼻腔，防止劇烈的吞咽動(dòng)作影響插管(圖6)。麻醉師左手持喉鏡柄，將喉鏡片經(jīng)口腔一角置入，移至口腔中央，再進(jìn)喉鏡前端達(dá)舌根，挑起會(huì)厭顯露聲門，右手持氣管導(dǎo)管對(duì)準(zhǔn)聲門裂，于豬呼吸過(guò)程中聲門打開的一瞬間，直接將氣管導(dǎo)管通過(guò)聲帶、喉中部的背側(cè)間插入氣管內(nèi)，判斷插管進(jìn)入氣管后予以套囊注氣10～15 ml。連接麻醉機(jī)，調(diào)整參數(shù)(呼吸頻率15 次左右，潮氣量12 ml/kg)，牙墊與氣管導(dǎo)管用醫(yī)用膠布固定，以防止氣管導(dǎo)管滑落脫出。插管時(shí)遇阻力可能系聲門下狹窄或?qū)Ч苓^(guò)粗所致，此時(shí)應(yīng)旋轉(zhuǎn)導(dǎo)管或換細(xì)導(dǎo)管。豬躁動(dòng)不安、不易插管可能因保定麻醉淺，可靜推琥珀酰膽堿，加大肌肉松弛，減少實(shí)驗(yàn)動(dòng)物躁動(dòng)，待肌顫停止后快速插管。氣管插管過(guò)程中應(yīng)注意避免過(guò)分粗暴，以免損傷喉粘膜從而導(dǎo)致喉頭水腫或拔除導(dǎo)管后發(fā)生呼吸梗塞。判斷氣管插管成功的方法:(1)氣管導(dǎo)管有濕熱氣流呼出;(2)聽兩肺呼吸音，左右上下均勻一致;(3)兩側(cè)胸廓同時(shí)均勻起伏，無(wú)上腹部隆起。

1.3.3 麻醉維持階段 琥珀酰膽堿6 支、地西泮注射液6支、利多卡因7 支加入到500 ml 平衡液中，配制成麻醉混合液緩慢靜滴，先快速滴注5～10 ml，待實(shí)驗(yàn)動(dòng)物麻醉完全后，減慢滴速為40～60 滴/min。術(shù)中予以心電監(jiān)護(hù)，隨時(shí)監(jiān)測(cè)動(dòng)物的血壓、脈搏、血氧濃度及生命體征。為預(yù)防動(dòng)物麻醉過(guò)深，麻醉機(jī)旁應(yīng)常規(guī)準(zhǔn)備搶救藥物，如尼可剎米、東莨菪堿、腎上腺素等。對(duì)于手術(shù)時(shí)間短、麻醉深度要求不高的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，也可選用丙泊酚50 ml 溶于5% 的葡萄糖溶液250 ml中緩慢滴注，其麻醉誘導(dǎo)較快，維持時(shí)間短，恢復(fù)快。但丙泊酚可使外周血管阻力下降、心肌抑制、心輸出量減少，對(duì)呼吸具有明顯的抑制作用，如需靜脈注射需在1 min 內(nèi)緩慢靜推，以免出現(xiàn)血壓下降過(guò)快、呼吸暫?，F(xiàn)象［2］，同時(shí)觀察心電監(jiān)護(hù)，注意生命體征的變化。

1.3.4 麻醉恢復(fù)階段 如術(shù)后實(shí)驗(yàn)動(dòng)物需留觀，可于手術(shù)結(jié)束前30～40 min 開始停藥，繼續(xù)輸液、通氣，手術(shù)結(jié)束后予以麻醉拮抗劑陸醒寧，劑量為速眠新的1/2。待自主呼吸恢復(fù)，通氣量足夠;咳嗽、吞咽反射恢復(fù);四肢活動(dòng)頻繁;血壓、脈搏平穩(wěn)后，吸凈口、鼻、咽、氣管內(nèi)分泌物，拔除氣管插管，送回動(dòng)物病房。將其放置在溫暖的環(huán)境中，避免發(fā)展為體溫過(guò)低。密切觀察實(shí)驗(yàn)豬的生命體征，緊急搶救可能發(fā)生的呼吸阻塞。緩解動(dòng)物術(shù)后疼痛，必要時(shí)采用麻醉性止痛藥;在此類藥物中，最常用的為嗎啡(0.1～20 mg/kg)、哌替啶(2 mg/kg)［1］。

2 結(jié) 果

2.1 麻醉誘導(dǎo)階段 共死亡6 例，其中2 例死于將麻醉維持液誤當(dāng)平衡液靜脈滴入，導(dǎo)致動(dòng)物肌松后未及時(shí)予以吸氧，窒息死亡。4 例因氣管插管插入食道，機(jī)械通氣后胃脹明顯不能及時(shí)排除。

2.2 麻醉維持階段 共死亡10 例，其中1 例死于機(jī)械通氣后氧氣消耗完畢，未及時(shí)發(fā)現(xiàn)與處理，導(dǎo)致低氧血癥。9 例死于術(shù)者操作不當(dāng)，損傷大血管造成大出血，未能充分補(bǔ)液。

2.3 麻醉恢復(fù)階段 術(shù)后動(dòng)物死亡比例較高，大部分因術(shù)中造成內(nèi)臟及組織損傷嚴(yán)重，術(shù)后不能耐受而直接處死。部分死于氣管插管拔除過(guò)早，導(dǎo)致動(dòng)物缺氧而死。部分因手術(shù)切口感染嚴(yán)重，術(shù)后抗炎不充分。

圖1 本中心特制的豬籠

圖2 豬的口腔與咽喉部的夾角趨于平行

圖3 特制喉鏡，葉片長(zhǎng)22 cm，適于體重＜50 kg 的豬

圖4 特制喉鏡，葉片長(zhǎng)30 cm，適于體重＞50 kg 的豬

圖5 特制的操作臺(tái)(前后位、側(cè)位)，有四輪驅(qū)動(dòng)，方便移動(dòng)

圖6 麻醉師在助手的協(xié)助下進(jìn)行氣管插管

3 討 論

動(dòng)物麻醉是新興的、發(fā)展迅速的學(xué)科。由于動(dòng)物不能自主反映自身的不適，術(shù)后缺乏必要的化驗(yàn)檢查及監(jiān)護(hù)手段，因此麻醉的成功是決定動(dòng)物術(shù)后轉(zhuǎn)歸的關(guān)鍵因素。臨床實(shí)踐中，動(dòng)物的麻醉有許多相似之處，又各有不同，在麻醉藥物、麻醉方法的選擇方面存在差異。

3.1 根據(jù)不同的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)時(shí)間選擇麻醉藥物 如果實(shí)驗(yàn)需動(dòng)物保持較長(zhǎng)時(shí)間的麻醉狀態(tài)、麻醉程度較深，可選擇具有較強(qiáng)鎮(zhèn)靜催眠作用的藥物，如戊巴比妥鈉、咪達(dá)唑侖、地西泮注射液［3］;如果所需時(shí)間較短、麻醉程度較淺，可使用中樞性抑制但短效的藥物，如乙醚，以及對(duì)中樞抑制弱、蘇醒快的鹽酸氯胺酮、速眠新［4］。戊巴比妥鈉有降低心率、抑制心肌收縮力的作用，心臟介入手術(shù)時(shí)盡量避免使用［5］。氯胺酮具有較強(qiáng)的藥物濫用潛力，屬于管制藥品，不適于在動(dòng)物麻醉中廣泛使用。

3.2 根據(jù)不同的麻醉途徑選擇麻醉藥物 速眠新、咪達(dá)唑侖可通過(guò)肌肉注射，戊巴比妥鈉、鹽酸氯胺酮、地西泮注射液需通過(guò)靜脈注射，而乙醚作為吸入性麻醉劑，通常經(jīng)過(guò)吸入的方式用藥，但考慮乙醚有在空氣中擴(kuò)散污染的風(fēng)險(xiǎn)，應(yīng)盡量減少使用，以降低麻醉藥品對(duì)自身的危害。

3.3 復(fù)合麻醉藥物的選擇 復(fù)合麻醉可避免單純使用一種麻醉藥物時(shí)麻醉時(shí)間過(guò)長(zhǎng)、麻醉強(qiáng)度過(guò)深造成的藥物大量蓄積，減少由于藥物劑量產(chǎn)生的副作用對(duì)機(jī)體帶來(lái)的不利因素，有效降低了麻醉風(fēng)險(xiǎn)［6］。

我中心四年來(lái)致力于動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的研究，積累了許多動(dòng)物麻醉的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，總結(jié)了大量的動(dòng)物麻醉經(jīng)驗(yàn)，尤其對(duì)豬的麻醉熟練程度、用藥規(guī)律、操作技巧具有很深的認(rèn)識(shí)。麻醉誘導(dǎo)階段常規(guī)應(yīng)用速眠新作為麻醉誘導(dǎo)劑，與其他藥物如戊巴比妥鈉等相比，具有麻醉誘導(dǎo)快、用量節(jié)省、用法簡(jiǎn)單、安全系數(shù)高、麻醉效果強(qiáng)、經(jīng)濟(jì)效益好的優(yōu)勢(shì)［7］，建議在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中推廣使用。麻醉維持階段，使用丙泊酚維持麻醉應(yīng)注意藥物的副作用，我們自行研制的麻醉混合液由琥珀酰膽堿、地西泮注射液、利多卡因配制而成，具有麻醉誘導(dǎo)快、安全系數(shù)高、節(jié)約麻醉成本的優(yōu)勢(shì)，建議在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中借鑒使用。麻醉恢復(fù)階段，應(yīng)注意觀察動(dòng)物術(shù)后的各項(xiàng)生理反應(yīng)，判斷恢復(fù)情況;避免過(guò)早地拔除氣管插管，以免造成動(dòng)物缺氧導(dǎo)致窒息、死亡，以及增加麻醉風(fēng)險(xiǎn)、影響實(shí)驗(yàn)效果。

在醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的麻醉是保證實(shí)驗(yàn)順利進(jìn)行、得到預(yù)期結(jié)果的重要環(huán)節(jié)之一。麻醉者是動(dòng)物實(shí)驗(yàn)順利進(jìn)行的保障，應(yīng)在認(rèn)真掌握麻醉理論與技術(shù)的基礎(chǔ)上，不斷總結(jié)經(jīng)驗(yàn)、教訓(xùn)，并借鑒臨床麻醉技術(shù)，結(jié)合新進(jìn)展，探索出對(duì)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)更安全、更有效、更科學(xué)的麻醉方法，高質(zhì)量地保障動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的順利進(jìn)行。

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