豬藍(lán)耳病二免后抗體檢測及疫苗免疫效果試驗(yàn)

樊 麗 （山東省泰安市畜牧獸醫(yī)局 271000）

高致病性豬藍(lán)耳病是由豬繁殖與呼吸綜合征病毒引起的一種豬的高度傳染性的病毒傳染病，主要引起妊娠母豬繁殖障礙以及仔豬的呼吸道癥狀，給養(yǎng)豬業(yè)造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失，我國已經(jīng)將其列入對(duì)生豬的強(qiáng)制免疫病種。為了解泰安地區(qū)高致病性豬藍(lán)耳病的免疫狀況，檢測了豬群免疫后抗體消長規(guī)律，為更好的做好該病的有效防控提供科學(xué)的理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 試驗(yàn)材料 藍(lán)耳病滅活苗(由中牧實(shí)業(yè)股份有限公司生產(chǎn))，抗體檢測采用LSI豬繁殖與呼吸綜合征抗體檢測ELISA試劑盒(北京天之泰生物科技有限公司生產(chǎn))。

1.1.2 試驗(yàn)樣品 選自某豬場新出生健康且未經(jīng)任何疫苗免疫的仔豬30頭。

1.2 方法

1.2.1 分組及免疫 免疫前對(duì)試驗(yàn)豬進(jìn)行基礎(chǔ)抗體滴度檢測，所選試驗(yàn)豬的豬繁殖與呼吸綜合征病毒抗體陰性。隨機(jī)分成2組，試驗(yàn)組15頭，對(duì)照組15頭。30日齡時(shí)用藍(lán)耳病滅活苗(由中牧實(shí)業(yè)股份有限公司生產(chǎn))對(duì)實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組免疫1次，首免后30d對(duì)實(shí)驗(yàn)組加強(qiáng)免疫1次。

1.2.2 抗體檢測 實(shí)驗(yàn)組在首免后21d和加強(qiáng)免疫后14、28、42、56、70、84、96d分別采集血液，同時(shí)采集對(duì)照組相應(yīng)時(shí)期的血樣，分離血清，液相阻斷ELISA試驗(yàn)檢測高致病性豬藍(lán)耳病抗體水平，研究實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組在不同免疫時(shí)期的抗體水平和抗體消長規(guī)律。

1.2.3 免疫效果調(diào)查 結(jié)合泰安市春秋兩季重大動(dòng)物疫病強(qiáng)制免疫檢查工作，每個(gè)縣市區(qū)隨機(jī)抽取2個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)的5個(gè)養(yǎng)豬戶的20份豬血清樣品，每個(gè)縣市區(qū)抽取1個(gè)規(guī)模養(yǎng)豬場的20份豬血清樣品進(jìn)行檢測，對(duì)全市的高致病性豬藍(lán)耳病強(qiáng)制免疫效果進(jìn)行調(diào)查。同時(shí)詳細(xì)填寫采樣表，包括豬的品種、日齡、飼養(yǎng)規(guī)模、免疫情況、臨床表現(xiàn)、既往病史等以便數(shù)據(jù)分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 檢測結(jié)果

2.1.1 試驗(yàn)組與對(duì)照組不同日齡抗體水平值(RI%)

表1 首免后對(duì)照組抗體水平 （RI%）

表2 加免后試驗(yàn)組抗體水平 （RI%）

13 60.0 159.0 157.0 145.0146.0 142.0 101.0 69.0 58.0 14 39.0 141.0 148.0 132.0133.0 129.0 88.0 57.0 38.0 15 23.0 140.0 142.0 131.0133.0 130.0 94.0 59.0 25.0平均值 30.9 143.8 146.9 133.3134.6 130.4 99.0 66.1 31.5標(biāo)準(zhǔn)差 16.39 9.02 8.79 8.45 8.42 8.00 11.5811.2015.29

根據(jù)統(tǒng)計(jì)結(jié)果分析，試驗(yàn)組與對(duì)照組在對(duì)應(yīng)時(shí)間的抗體水平差異顯著(P<0.001)。

2.1.2 試驗(yàn)組與對(duì)照組抗體消長曲線

圖1 臨床實(shí)驗(yàn)抗體檢測結(jié)果

2.1.3 分析 從表1與圖1中可以看出：對(duì)照組在首免后21d抗體轉(zhuǎn)陽(RI%為35.0)；首免后21～44d，為抗體上升期；首免后44d RI%達(dá)到較高值(124.3)；首免后44～86d RI%值較平穩(wěn)，即抗體水平平穩(wěn)期，其中，首免后72d出現(xiàn)下降趨勢，分析原因是由于飼養(yǎng)管理或氣候因素造成的；首免后86～126d RI%值急劇下降，即抗體水平下降期；首免后140d RI%值均為1.0，即檢測不到抗體。由此可見，對(duì)照組(僅免疫一次)的抗體持續(xù)時(shí)間，即免疫效果可持續(xù)114d(約16個(gè)周)左右。

從表2與圖1中可以看出：試驗(yàn)組在首免后21d也檢測到抗體轉(zhuǎn)陽，且RI%值與對(duì)照組基本一致(30.9)；之后檢測到的RI%值實(shí)驗(yàn)組均高于對(duì)照組；首免后21d到加強(qiáng)免疫后14d(首免后21～44d)為抗體上升期；加強(qiáng)免疫后14d到70d(首免后44～100d）RI%值較平穩(wěn)，即抗體水平平穩(wěn)期，加強(qiáng)免疫后42d(首免后72d)與對(duì)照組一樣出現(xiàn)下降趨勢，分析原因是由于飼養(yǎng)管理或氣候因素造成的；加強(qiáng)免疫后84～110d(首免后114～140d)RI%值急劇下降，即抗體水平下降期，但在加強(qiáng)免疫后110d(首免后140d)仍能檢測到抗體，這說明試驗(yàn)組的抗體持續(xù)時(shí)間比對(duì)照組長，免疫效果可持續(xù)到首免后140d左右。

表3 臨床調(diào)查數(shù)據(jù)

圖2 臨床調(diào)查抗體檢測結(jié)果

從圖2中可以看出：免疫后3周可檢測到抗體；免疫后3周到6周，為抗體上升期，其中，免疫后6周RI%值達(dá)到最高；免疫后6周到14周，為抗體水平較平穩(wěn)期，RI%值整體呈平緩下降。免疫后14周到16周，RI%值急劇下降，為抗體水平下降期。可見，免疫抗體持續(xù)16個(gè)星期左右。

圖3 臨床實(shí)驗(yàn)與臨床調(diào)查的抗體消長規(guī)律比較

2.2 臨床調(diào)查結(jié)果

2.2.1 抗體轉(zhuǎn)陽率 2010年秋季與2011年春秋兩季共采樣1560份，其中，陽性樣品有1146份，抗體轉(zhuǎn)陽率為73% (見表3)。

2.2.2 抗體消長規(guī)律 根據(jù)免疫后的時(shí)間將檢測結(jié)果分類，得出強(qiáng)制免疫后的抗體消長規(guī)律(見圖2)。

3 討論

用藍(lán)耳病滅活苗對(duì)試驗(yàn)組豬加強(qiáng)免疫后，RI%值整體高于對(duì)照組，且離散度(CV%)低?？贵w離散度是衡量豬群免疫效果的一個(gè)重要指標(biāo)，離散度低的豬群，抗體水平整齊，免疫保護(hù)效果好。

臨床調(diào)查組的抗體持續(xù)時(shí)間略低于對(duì)照組，主要原因是由于免疫操作引起的，如疫苗的保存和運(yùn)輸是否符合規(guī)定的溫度條件，使用疫苗時(shí)是否按照規(guī)定的劑量進(jìn)行接種，接種時(shí)消毒滅菌措施是否得當(dāng)，疫苗是否接觸到相應(yīng)的理化因素導(dǎo)致其滅活或破壞等。因?yàn)?，通過分析采樣表發(fā)現(xiàn)，同一廠家同一批次的疫苗，在不同的養(yǎng)殖場(戶)的免疫效果不盡相同，即使在不同養(yǎng)殖場(戶)豬的品種相同，日齡相近的情況下，也存在免疫效果相差 較大的現(xiàn)象。

通過分析采樣表還發(fā)現(xiàn)，青年豬的免疫效果最好，分析原因是由于青年豬的體質(zhì)和免疫應(yīng)答較好的緣故。

4 結(jié)論

加強(qiáng)免疫后高致病性豬藍(lán)耳病的抗體消長規(guī)律與僅免疫一次的對(duì)照組基本一致，這說明加強(qiáng)免疫是基于基礎(chǔ)免疫之上的。但加強(qiáng)免疫后同期免疫抗體水平明顯高于對(duì)照組，且持續(xù)時(shí)間長，保護(hù)效果好。通過比較臨床實(shí)驗(yàn)與臨床調(diào)查的抗體消長規(guī)律發(fā)現(xiàn)：從抗體的RI%值看，加強(qiáng)免疫組最高，且持續(xù)時(shí)間長，免疫抗體持續(xù)時(shí)間達(dá)到20個(gè)周，對(duì)照組與臨床調(diào)查組基本相同，免疫抗體持續(xù)時(shí)間達(dá)到16個(gè)周。

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