CMYC和PD-L1表達(dá)與DLBCL臨床病理特征及預(yù)后的關(guān)系分析

黃 金 楊如玉 華銀玲

彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤(DLBCL)是血液系統(tǒng)較為常見的惡性腫瘤之一，此病主要臨床表現(xiàn)為無痛性、進(jìn)行性的淋巴結(jié)腫大，同時合并發(fā)熱、盜汗及乏力等癥狀[1]。研究發(fā)現(xiàn)，DLBCL在免疫表型、生物學(xué)行為、形態(tài)學(xué)特點及臨床表現(xiàn)上均具有多樣化，且預(yù)后可能與多方面因素密切相關(guān)[2-3]。近年來有學(xué)者發(fā)現(xiàn)，細(xì)胞性骨髓細(xì)胞瘤病病毒癌基因(CMYC)及細(xì)胞程式死亡-配體 1(PD-L1)在DLBCL患者中表達(dá)異常，可能與DLBCL的預(yù)后相關(guān)，因此了解上述指標(biāo)與DLBCL患者臨床特征及預(yù)后的關(guān)系，對此類患者發(fā)病機(jī)制及預(yù)后相關(guān)危險因素的明確有著非常重要的臨床價值，現(xiàn)結(jié)果報告如下[4-5]。

1 材料與方法

1.1 一般資料

選取自2018年1月至2020年1月我院收治的92例DLBCL患者作為研究對象，其中男性58例、女性34例；年齡為56～72歲，平均年齡為(65.8±8.2)歲；體重指數(shù)范圍為20.5～24.4 kg/m2,平均體重指數(shù)為(22.6±4.4)kg/m2；臨床分期：Ⅰ期35例、Ⅱ期20例、Ⅲ期21例、Ⅳ期16例；腫瘤部位：結(jié)內(nèi)60例、結(jié)外32例；骨髓侵犯：有40例，無52例。

1.2 納入及排除標(biāo)準(zhǔn)

所有患者均經(jīng)相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)[6]診斷為DLBCL且預(yù)計生存期大于3個月；所有患者均行CHOP方案治療后行手術(shù)治療；所有患者排除伴有其他惡性腫瘤者；所有患者均排除既往有放療等其他治療史者；所有患者均排除繼發(fā)性DLBCL或合并自身免疫性疾病者；所有患者均簽署治療知情同意書。

1.3 免疫組化方法

CMYC及PD-L1的表達(dá)對組織行切片、脫蠟、脫水、抗原修復(fù)、血清封閉處理，然后室溫下加一抗孵育切片3 h，滴加二抗 37 ℃孵育切片30 min，而后采用EnVision二步法顯色，判斷陽性的標(biāo)準(zhǔn)為：無色為0分，淡黃色為1分，棕黃色為2分，棕褐色為3分。觀察陽性細(xì)胞細(xì)胞數(shù)，計算陽性細(xì)胞百分比，百分比<5%為0分，5%～ 25%為1分，26%～50%為2分，51%～75%為3分， 76%～100%為4分，陽性細(xì)胞積分與著色強(qiáng)度的乘積大于4分者為陽性，否則為陰性。

1.4 觀察指標(biāo)

①分析DLBCL患者中CMYC及PD-L1的表達(dá)情況；②分析DLBCL患者中CMYC及PD-L1的表達(dá)與臨床病理特征之間的關(guān)系；③根據(jù)療效診斷標(biāo)準(zhǔn)將DLBCL患者分為預(yù)后良好組及預(yù)后不良組兩組(治療后完全及部分緩解為預(yù)后良好，而死亡或病情復(fù)發(fā)、疾病進(jìn)展為預(yù)后不良)，分析兩組間臨床相關(guān)指標(biāo)的差異情況；④DLBCL預(yù)后不良危險因素的 Logistic 回歸分析。

1.5 統(tǒng)計學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 DLBCL患者中CMYC及PD-L1的表達(dá)情況分析

92例 DLBCL 組織中72例 CMYC 蛋白為陽性，陽性率78.3%， 76例PD-L1蛋白為陽性，陽性率82.6%。

2.2 CMYC及PD-L1表達(dá)與DLBCL臨床病理特征的關(guān)系分析

Ann Arbor分期Ⅲ～Ⅳ期、有骨髓侵犯的DLBCL患者CMYC及PD-L1的蛋白表達(dá)陽性率顯著高于 Ann Arbor 分期Ⅰ～Ⅱ期及無骨髓侵犯者(P均<0.05)，見表1。

表1 CMYC及PD-L1的表達(dá)與臨床病理特征的關(guān)系分析(例，%)

2.3 預(yù)后良好及不良兩組間臨床相關(guān)指標(biāo)的差異情況分析

預(yù)后不良組中CMYC及PD-L1蛋白表達(dá)陽性率顯著高于預(yù)后良好組，且Ann Arbor分期為Ⅲ～Ⅳ的患者占比顯著高于預(yù)后良好組(P<0.05)，見表2。

表2 預(yù)后良好及不良兩組間臨床相關(guān)指標(biāo)的差異情況分析(例，%)

2.4 DLBCL預(yù)后不良危險因素的Logistic回歸分析

Logistic回歸分析發(fā)現(xiàn)，CMYC陽性、PD-L1陽性及Ann Arbor分期均是DLBCL預(yù)后不良的獨立危險因素(P<0.05),見表3。

表3 DLBCL預(yù)后不良危險因素的 Logistic 回歸分析

3 討論

DLBCL是一種較為常見的非霍奇淋巴瘤，此類患者常表現(xiàn)為發(fā)熱、盜汗及淋巴結(jié)腫大等，且部分患者可出現(xiàn)骨髓侵犯，據(jù)報道DLBCL具有高度異質(zhì)性，且亞型較多，雖然單克隆抗體聯(lián)合化療科治愈絕大部分患者，但仍有約30%左右的患者出現(xiàn)復(fù)發(fā)，進(jìn)而導(dǎo)致預(yù)后較差[7-8]。因此，對于DLBCL相關(guān)的標(biāo)志物的篩選及鑒定對于此類患者的治療及預(yù)后有著非常重要的臨床價值[9]。而隨著醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)的不斷發(fā)展，新的潛在DLBCL預(yù)后評估指標(biāo)在不斷被挖掘，有研究發(fā)現(xiàn)部分指標(biāo)可較好的評估DLBCL的預(yù)后，其中CMYC作為一種可易位基因，是可促進(jìn)細(xì)胞分裂的轉(zhuǎn)錄因子，其位于染色體 8q24，同時其可在缺氧情況下促進(jìn)腫瘤細(xì)胞進(jìn)行新陳代謝，并參與多種腫瘤的發(fā)展，而PD-L1則作為B7家族的一員，是在巨噬細(xì)胞、T細(xì)胞等表面表達(dá)的抑制性配體，其可抑制T 細(xì)胞的誘導(dǎo)作用，從而促進(jìn)腫瘤的進(jìn)一步發(fā)展[10-11]。本研究通過分析上述兩個指標(biāo)與DLBCL患者臨床特征及預(yù)后的關(guān)系，旨在為此類患者的治療及預(yù)后的精確評估進(jìn)一步提供臨床支持。

本研究結(jié)果顯示，92例 DLBCL 組織中72例 CMYC 蛋白為陽性，陽性率78.3%， 76例PD-L1蛋白為陽性，陽性率82.6%，同時發(fā)現(xiàn)Ann Arbor分期Ⅲ～Ⅳ期、有骨髓侵犯的DLBCL患者CMYC及PD-L1的表達(dá)蛋白陽性率顯著高于 Ann Arbor 分期Ⅰ～Ⅱ期及無骨髓侵犯者(P均<0.05)，上述結(jié)果表明CMYC及PD-L1蛋白的表達(dá)與DLBCL的分期及骨髓侵犯密切相關(guān)[12]。同時研究顯示，預(yù)后不良組中CMYC及PD-L1的表達(dá)蛋白陽性率顯著高于預(yù)后良好組，且Ann Arbor分期為Ⅲ～Ⅳ的患者占比顯著高于預(yù)后良好組(P<0.05)，且Logistic 回歸分析發(fā)現(xiàn)，CMYC陽性、PD-L1陽性及Ann Arbor分期均是DLBCL預(yù)后不良的獨立危險因素(P<0.05)[13]。

綜上所述，CMYC及PD-L1蛋白在 DLBCL患者中特異性高表達(dá)，且是DLBCL患者預(yù)后判斷的潛在指標(biāo)， 值得臨床推廣應(yīng)用。