甲磺隆對(duì)臨床分離病原菌的抑菌作用

李艷艷

解放軍第309醫(yī)院 檢驗(yàn)科，北京 100091

作為活性最強(qiáng)的磺酰脲類化合物，甲磺隆(sulfometuron methyl，SM)對(duì)結(jié)核分支桿菌的最小抑菌濃度(minimum inhibitory concentration，MIC)范圍為3~8 mg/L，高于部分二線抗結(jié)核藥的體外活性，但其對(duì)其他臨床致病菌抑菌活性的研究，目前尚且少見。本文通過測(cè)試甲磺隆抗菌活性，評(píng)價(jià)其作為研發(fā)抗生素先導(dǎo)化合物的可能性。

1 材料和方法

1.1 菌株的留取 本實(shí)驗(yàn)菌株為我科微生物室2011年6-12月鑒定并保存的臨床分離菌株，革蘭陰性菌和真菌菌株于甘油菌種保存管中，革蘭陽(yáng)性菌株于稀釋血液菌種保存管中，放置于-20℃冰箱中保存。

1.2 菌液的制備 實(shí)驗(yàn)前2 d將冰凍保存的實(shí)驗(yàn)菌株取出，室溫下靜置，待其溶解后接種于血平板培養(yǎng)基上培養(yǎng)2 d，觀察各菌株生長(zhǎng)良好，將各菌株用氯化鈉溶液配置成0.5麥?zhǔn)媳葷釂挝坏臉?biāo)準(zhǔn)菌懸液。

1.3 甲磺隆原液的制備 實(shí)驗(yàn)前將甲磺隆干粉、DMSO溶劑從冰箱中取出，放置至室溫后，用分析天平準(zhǔn)確稱取12.0 mg甲磺隆干粉于潔凈干燥的試管中，并用微量加樣槍準(zhǔn)確吸取1.2 ml DMSO溶劑加入試管中，混勻、充分溶解，配置成10 mg/ml的SM化合物原液。

1.4 含藥培養(yǎng)基的制備 實(shí)驗(yàn)前將水解酪蛋白胨(murller hinton，MH)培養(yǎng)基干粉及沙保羅瓊脂粉取出，平衡至室溫。準(zhǔn)確稱取MH干粉380.0 mg，35份，沙保羅瓊脂粉650.0 mg，5份，于錐形瓶中，分別用10 ml蒸餾水溶解； 化合物按照80 mg/L，40 mg/L，20 mg/L，10 mg/L的濃度倍比稀釋，無化合物的DMSO作為陰性對(duì)照，溶于培養(yǎng)基中。

1.5 接種 分別將已配制好的菌懸液用無菌棉簽接種于各種濃度的一個(gè)對(duì)應(yīng)培養(yǎng)基上： 鮑曼、銅綠、肺克、大腸、金葡、表葡、腸球菌接種于MH培養(yǎng)基，白假絲接種于沙保羅培養(yǎng)基。標(biāo)記好菌種、濃度。

1.6 培養(yǎng) 將接種有鮑曼、銅綠、肺克、大腸、金葡、表葡、腸球菌的培養(yǎng)基于25℃溫箱中培養(yǎng)，接種有白假絲酵母菌的培養(yǎng)基于15℃溫箱中培養(yǎng)。2 d后觀察結(jié)果并記錄。重復(fù)上述步驟10次，每次選用相同菌種的不同菌株，記錄并統(tǒng)計(jì)結(jié)果。

2 結(jié)果 80 mg/L的甲磺隆不能抑制銅綠、肺克、大腸、金葡、表葡、腸球菌的生長(zhǎng)，但能很好抑制鮑曼菌的生長(zhǎng)，而20 mg/L的甲磺隆能很好抑制白假絲酵母菌的生長(zhǎng)。

3 討論 本實(shí)驗(yàn)致力于對(duì)甲磺隆抗菌活性的進(jìn)一步研究，只選擇了幾種典型且耐藥嚴(yán)重的臨床常見菌株，結(jié)果顯示，甲磺隆能很好地抑制鮑曼、白念菌的生長(zhǎng)(對(duì)鮑曼菌的MIC值為80 mg/L，對(duì)白念菌的MIC值為20 mg/L)，其實(shí)驗(yàn)菌株均為院內(nèi)感染重要菌種，耐藥情況非常嚴(yán)重。本實(shí)驗(yàn)證明，SM對(duì)真菌、細(xì)菌均具抑菌活性，這對(duì)今后的研究具有很好的指導(dǎo)作用。本實(shí)驗(yàn)中，對(duì)于未表現(xiàn)出抑菌活性的菌株，其原因有可能是其他支鏈氨基酸合成途徑對(duì)乙酰羧酸合成酶(aceto hydroxy acid synthase，AHAS)酶的替代作用，也有可能此結(jié)構(gòu)的磺酰脲類化合物不能有效抑制其AHAS酶活性，亦或其他原因，有待進(jìn)一步研究。下一步可以對(duì)SM進(jìn)行化學(xué)修飾，期待能得到更具抑菌活性的衍生物。