質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)在藥品分析中的應(yīng)用*

王洪家

(天津市北辰區(qū)藥品檢驗(yàn)所，天津 300400)

質(zhì)譜法是使待測(cè)化合物產(chǎn)生氣態(tài)離子，再按質(zhì)荷比將離子分離和檢測(cè)的分析方法，檢測(cè)限可達(dá)10－15～10－12mol數(shù)量級(jí)。質(zhì)譜儀主要由進(jìn)樣系統(tǒng)、離子源、質(zhì)量分析器、檢測(cè)器以及計(jì)算機(jī)控制系統(tǒng)組成。根據(jù)進(jìn)樣系統(tǒng)的不同，可分為直接進(jìn)樣、氣相色譜－質(zhì)譜聯(lián)用、液相色譜－質(zhì)譜聯(lián)用、超臨界流體色譜－質(zhì)譜聯(lián)用及毛細(xì)管電泳－質(zhì)譜聯(lián)用［1］。質(zhì)譜法廣泛應(yīng)用在環(huán)境保護(hù)、食品安全、藥物分析及生命科學(xué)等眾多領(lǐng)域。在眾多的分析測(cè)試方法中，質(zhì)譜法的靈敏度高、分析速度快、分析范圍廣泛等優(yōu)點(diǎn)，得到了普遍的認(rèn)同，同時(shí)也是儀器分析領(lǐng)域未來(lái)的發(fā)展方向?，F(xiàn)就質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)在藥品分析領(lǐng)域的應(yīng)用情況進(jìn)行簡(jiǎn)要概述。

1 氣相色譜－質(zhì)譜聯(lián)用(GC－MS)的應(yīng)用

1.1 中藥成分分析 GC－MS技術(shù)將氣相色譜法高效的分離效率與質(zhì)譜法分析的高專屬性相結(jié)合，使其廣泛地應(yīng)用于中藥有效成分的研究。

王桂紅等［2］采用水蒸汽蒸餾法提取橘葉揮發(fā)油，用氣相色譜－質(zhì)譜聯(lián)用法分析鑒定其化學(xué)成分，并應(yīng)用面積歸一法測(cè)定各成分的相對(duì)百分含量。從橘葉揮發(fā)油中分離出50種化學(xué)組分，鑒定了其中34種，占總油量的83%。楊再波等［3］采用固相微萃取裝置提取并用GC－MS法分析了透骨草的揮發(fā)性化學(xué)成分，分離出83個(gè)組分，鑒定了69個(gè)。分析結(jié)果表明，在透骨草揮發(fā)性成分中，主要是萜烯類及其含氧衍生物、醇類和酯類，也含有烷烴、醛酮等化合物。婁方明等［4］采用水蒸氣蒸餾法提取厚樸揮發(fā)油，運(yùn)用氣相色譜－質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)對(duì)揮發(fā)油成分進(jìn)行分離鑒定，并采用面積歸一化法確定各成分的相對(duì)百分含量，分析比較了不同產(chǎn)地厚樸的揮發(fā)油成分。結(jié)果顯示5種不同產(chǎn)地厚樸所含揮發(fā)油的量有較大差別，以浙江產(chǎn)最多，云南和四川產(chǎn)最少，但是5個(gè)地區(qū)的厚樸所含主要成分基本相同，只是含量有差異，其共有成分達(dá)到18種。另外，有20種成分分別為各產(chǎn)地所獨(dú)有，但含量均甚微，其他成分則在2種以上產(chǎn)地上存在。

1.2 中藥中農(nóng)藥殘留量的控制 中草藥由于市場(chǎng)需求量大，藥農(nóng)為了保障藥材的產(chǎn)量，不得不頻繁地使用農(nóng)藥。農(nóng)藥殘留量超標(biāo)已成為影響藥品質(zhì)量的重要因素。

郭嵐等［5］利用凝膠滲透色譜－氣相色譜－質(zhì)譜聯(lián)用法建立了一種可同步測(cè)定食用植物油中有機(jī)氯、有機(jī)磷等4種類型共29種農(nóng)藥殘留的分析方法，結(jié)果表明，該方法可以滿足食用植物油中農(nóng)藥殘留限量的檢測(cè)要求，也為建立中藥材中農(nóng)藥殘留的檢測(cè)方法提供了參考依據(jù)。戴榮華等［6］采用分散固相萃?。瓪庀嗌V－質(zhì)譜聯(lián)用法建立了對(duì)穿山龍中有機(jī)氯、有機(jī)磷及擬除蟲菊酯類等23種農(nóng)藥殘留的檢測(cè)方法，結(jié)果顯示，在5、20和50 μg/kg 3個(gè)添加水平下所有農(nóng)藥的平均回收率在80.2% ～118.5%，RSD 為1.6% ～8.5%，可以滿足農(nóng)藥殘留分析的要求。

1.3 對(duì)藥品質(zhì)量的控制 化學(xué)藥品近些年來(lái)不斷有各種嚴(yán)重的不良反應(yīng)見諸報(bào)端。一些不法商家利用患者對(duì)中藥的信任，在中藥制劑及保健食品中非法添加化學(xué)藥物，以期達(dá)到其宣傳效果，其危害是不言而喻的。這種非法添加化學(xué)藥物的現(xiàn)象屢見不鮮，既損害消費(fèi)者身體健康，又影響中成藥和保健食品產(chǎn)業(yè)的良性發(fā)展。李濤等［7］采用溶劑超聲或液－液萃取方式對(duì)20批樣品進(jìn)行提取富集，建立了氣相色譜－質(zhì)譜聯(lián)用法檢測(cè)降壓類中成藥及保健食品中非法添加化學(xué)藥物的方法，該方法能夠在30～60min內(nèi)快速檢測(cè)降壓類中成藥及保健食品中是否非法添加尼群地平等7種化學(xué)藥物，并在2批樣品中分別檢出了尼群地平和可樂定。

2 液相色譜－質(zhì)譜聯(lián)用(LC－MS)的應(yīng)用

2.1 中藥成分分析 隨著人們對(duì)中藥化學(xué)成分研究的不斷深入，液相色譜－質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)也在該領(lǐng)域發(fā)揮出越來(lái)越大的作用。蔣海強(qiáng)等［8］采用液相色譜－質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)，對(duì)大黃的化學(xué)成分進(jìn)行質(zhì)譜分析，結(jié)合文獻(xiàn)，推斷了25種化學(xué)成分，主要是鞣質(zhì)類、蒽醌及其苷類化合物。趙琴琴等［9］對(duì)苦參采用高效液相色譜－多級(jí)質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)，根據(jù)正、負(fù)離子模式下的準(zhǔn)分子離子峰及其多級(jí)碎片信息，與文獻(xiàn)數(shù)據(jù)或部分對(duì)照品對(duì)照鑒定了42個(gè)化合物，并對(duì)苦參中金雀花堿型和無(wú)葉豆堿型生物堿的質(zhì)譜裂解規(guī)律進(jìn)行了總結(jié)和歸納。Petsalo等［10］對(duì)紅景天提取物采用液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)進(jìn)行分析，根據(jù)類黃酮化合物在負(fù)離子模式下所表現(xiàn)出的規(guī)律，快速鑒定了其中的15種化學(xué)成分，其中10個(gè)含量較少的化學(xué)成分為首次從該植物中報(bào)道。

2.2 對(duì)藥品質(zhì)量的控制 張妤琳等［11］利用液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)對(duì)沉香藥材中是否添加松香酸類物質(zhì)進(jìn)行了檢測(cè)，結(jié)果證實(shí)4批不同產(chǎn)地的沉香樣品中均摻入了含松香酸類的物質(zhì)。陳安珍等［12］利用超高效液相色譜－串聯(lián)四極桿質(zhì)譜，多反應(yīng)監(jiān)測(cè)模式，對(duì)可能非法添加艾司唑侖、地西泮、鹽酸氯丙嗪、阿普唑侖和鹽酸氯硝西泮等5種化學(xué)藥品的鎮(zhèn)靜安神類中藥制劑及保健品進(jìn)行檢測(cè)，該方法可以在5分鐘內(nèi)完成樣品的定性和定量檢測(cè)。通過對(duì)40批樣品的篩查，發(fā)現(xiàn)有1批樣品添加了地西泮，有1批樣品添加了艾司唑侖和鹽酸氯丙嗪，該方法具有樣品處理方法簡(jiǎn)單、選擇性強(qiáng)、靈敏度高、假陽(yáng)性率低、測(cè)定快速等特點(diǎn)。

馬欣等［13］采用高效液相色譜 －二極管陣列檢測(cè)－質(zhì)譜－質(zhì)譜法技術(shù)，建立了銀杏葉提取物的多維指紋圖譜，同時(shí)檢測(cè)了其中的黃酮和內(nèi)酯類化合物，考查了指紋圖譜的精密度、重現(xiàn)性和穩(wěn)定性，進(jìn)行指紋圖譜相似度的計(jì)算，并利用MS碎片信息解析化合物的信息。利用多維指紋圖譜唯一性的特點(diǎn)為銀杏葉提取物的質(zhì)量控制提供了一定的依據(jù)，為中藥指紋圖譜研究提供了新思路和新方法。

2.3 中藥藥物代謝動(dòng)力學(xué)分析 藥物分子通過不同的給藥途徑，其在生物系統(tǒng)中的吸收、分布、代謝及排泄也會(huì)出現(xiàn)不同的差異，這些因素決定了藥物能否以適當(dāng)濃度到達(dá)肌體目標(biāo)部位，并停留一定時(shí)間，從而使藥物的療效得以發(fā)揮。由于多數(shù)藥物的代謝物保留了原形藥物分子的骨架結(jié)構(gòu)，因此，HPLC－MS在藥物代謝研究中不但可確定分子量，還可以根據(jù)藥物分子特異性斷裂規(guī)律推導(dǎo)出重要部分結(jié)構(gòu)甚至是完整的結(jié)構(gòu)，從而可以迅速找到可能的代謝物，并鑒定出結(jié)構(gòu)。Cheng等［14］利用液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)，依照臨床劑量對(duì)甘草進(jìn)行了代謝組學(xué)研究，通過分析確定了大鼠口服臨床劑量的甘草代謝物中62種尿代謝物和42種血漿代謝物。目前，液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)已逐漸成為中藥藥代動(dòng)力學(xué)研究的熱點(diǎn)。

3 毛細(xì)管電泳－質(zhì)譜聯(lián)用(CE－MS)的應(yīng)用

毛細(xì)管電泳－質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)綜合了CE的高效分離能力、廣泛的樣品適應(yīng)性和MS的高靈敏度、可提供結(jié)構(gòu)信息等優(yōu)勢(shì)，已發(fā)展成為一種重要的分離分析手段，并在各個(gè)領(lǐng)域得到廣泛的應(yīng)用。

3.1 中藥成分分析 柳仁民等［15］采用非水毛細(xì)管電泳法對(duì)粉防己甲醇提取物中的生物堿進(jìn)行分離，并利用在線電噴霧離子阱質(zhì)譜技術(shù)對(duì)其進(jìn)行鑒定。結(jié)果顯示，毛細(xì)管電泳－質(zhì)譜及質(zhì)譜－質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)對(duì)粉防己甲醇提取物中生物堿的分離鑒定，比傳統(tǒng)的方法更加準(zhǔn)確，可用于研究中藥中的復(fù)雜成分。楊豐慶等［16］采用毛細(xì)管電泳－質(zhì)譜聯(lián)用法測(cè)定赤芝和紫芝中的核苷類成分。結(jié)果表明，胞嘧啶、鳥嘌呤、胞苷、腺苷、次黃嘌呤、鳥苷、肌苷和尿嘧啶在線性范圍內(nèi)具有較好的線性關(guān)系。加樣回收率在95.3% ～104.6%之間。各待測(cè)化合物的最低檢測(cè)限和最低定量限分別分布在0.13 ～9.85 μg/ml和 0.42 ～20.83μg/ml之間。測(cè)定結(jié)果顯示赤芝的核苷類成分的含量高于紫芝。該法適合用于中藥中核苷類成分的分析檢測(cè)。

3.2 藥品非法添加與農(nóng)藥殘留的控制 徐遠(yuǎn)金等［17］建立了毛細(xì)管電泳－電噴霧電離質(zhì)譜聯(lián)用法同時(shí)測(cè)定性保健品中脫水嗎啡和西地那非的分析方法，該方法在單次分析過程中，可同時(shí)得到相對(duì)分子質(zhì)量、遷移時(shí)間和碎片特征信息，通過以保留時(shí)間和質(zhì)荷比對(duì)分離出的組分予以定性確證，用峰面積進(jìn)行定量，為復(fù)雜樣品的定性及定量分析提供了檢測(cè)手段。該方法檢測(cè)快速、結(jié)果可靠，適用于中藥成分的性保健品中所添加的上述兩種藥物的同時(shí)分析。杜雪純等［28］采用毛細(xì)管電泳－質(zhì)譜聯(lián)用建立白芍藥材中19種有機(jī)氮類農(nóng)藥殘留檢測(cè)方法。結(jié)果顯示19種農(nóng)藥在一定濃度范圍內(nèi)呈線性關(guān)系，相關(guān)系數(shù)為0.9918～0.9986。19種農(nóng)藥的加樣回收率為80.1% ～108.4%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)＜20%(除螺環(huán)菌胺為22.3%，乙氧喹啉為29.2%外)，檢測(cè)限(LOD)為 0.503 ～10.1 μg/kg。該方法專屬性強(qiáng)、重現(xiàn)性好，適用于白芍藥材中有機(jī)氮類農(nóng)藥的檢測(cè)分析。

隨著藥品檢驗(yàn)技術(shù)的不斷發(fā)展與完善，質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)也在發(fā)揮著越來(lái)越重要的作用，與經(jīng)典的化學(xué)分析方法和傳統(tǒng)的儀器分析方法相比，質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)具有其他檢驗(yàn)技術(shù)與方法無(wú)可比擬的技術(shù)優(yōu)勢(shì)，同時(shí)，其也會(huì)更廣泛地應(yīng)用于社會(huì)各個(gè)領(lǐng)域，也將發(fā)揮更大的作用。

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