古鉤藤研究發(fā)展現(xiàn)狀

歐 瑩 莫善列 肖智會(huì) 甄漢深 蔣蘭蘭

1.廣西中醫(yī)藥大學(xué)，廣西 南寧 530001;2.中國科學(xué)院海洋生物資源可持續(xù)利用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，廣東 廣州 510301

古鉤藤又名大葉白葉藤、牛角藤、斷腸草(《廣西藥用植物名錄》)、半架牛、大暗消(《云南中草藥》)等，為蘿藦科白葉藤屬植物古鉤藤Cryptolepis buchananii Roem.et Schult.的根，葉也供藥用［1］。多生于陽坡，攀援于其他樹上，分布于廣東、廣西、云南、貴州等地［2］。具有舒筋活絡(luò)，消腫止痛，解毒等功效，用于治療腰痛、腹痛、跌打損傷、骨折、癰瘡、癬等疾?。?］。因此本文擬對近年來有關(guān)古鉤藤的生藥鑒定、植物分子生物學(xué)、化學(xué)成份及藥理作用進(jìn)行系統(tǒng)綜述，以期對今后的研究能夠有所啟示和幫助。

1 生藥學(xué)鑒定

1809 年，Robert Brown根據(jù)花粉粒結(jié)構(gòu)和合蕊冠結(jié)構(gòu)特點(diǎn)創(chuàng)建了蘿藦科Asclepiadaceae，蘿藦科共有48屬2800種植物，產(chǎn)熱帶及溫暖地區(qū)［3］，中國有44屬245種，主要分布于西南及東南部［4］。由于該科種類較多，其中許多植物具有重要的藥用價(jià)值，在臨床上和民間應(yīng)用于治療腫瘤、哮喘、咳嗽、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等［5］。因此在人類疾病的預(yù)防和根治、新藥開發(fā)等方面具有廣泛的應(yīng)用價(jià)值，有較強(qiáng)的市場開發(fā)潛力，目前大多數(shù)研究集中于鵝絨藤屬 (Cynanchum)、牛奶菜屬 (Marsdenia)、杠柳屬 (Periploca)等，如:莫羅堅(jiān)等［6］采用光學(xué)和掃描電子顯微鏡觀察其中牛奶菜族11屬28種植物葉表皮的外表皮和內(nèi)表皮形態(tài)特征，提出牛奶菜族的氣孔器可能從平列型向環(huán)列型進(jìn)化。李玉玲等［7］觀察了蘿藦科鵝絨藤屬12種植物花粉器形態(tài)，發(fā)現(xiàn)花粉塊有球形、長球形和超長球形3種類型;著粉腺的形態(tài)則有6種類型:長圓形、方形、近方形、三角形、正三角形和近三角形。白重炎等［8］運(yùn)用解剖學(xué)的方法觀察和研究了蘿藦科中鵝絨藤和杠柳的莖、葉中乳汁管的類型、分布和大小。

對白葉藤屬的研究較少，蘿藦科白葉藤屬Cryptolepis植物全球有12種，分布于亞洲和非洲熱帶地區(qū)。我國有白葉藤C.sinensis(Lour.)Merr和古鉤藤 C.buchananii Roem.et Schult 2種，產(chǎn)于我國南部和西南部［9］。K.Lakshminarayana和 M.Suresh Babu［10］曾報(bào)導(dǎo)了古鉤藤大孢子囊顯微特征的植物形態(tài)學(xué)的發(fā)展，詳細(xì)介紹了花藥和子房的組成形態(tài)特征以及如何產(chǎn)生孢子和受精過程。

蘿藦科的分類一直備受爭議，Rendle［11］根據(jù)植物形態(tài)學(xué)的特征如:雄蕊 (莖或柄)、花藥的藥室數(shù)、授粉和繁殖等將蘿藦科分為兩個(gè)亞科:Periplocoideae(杠柳)亞科和Cynanchoideae亞科。Hutchinson提高了杠柳亞科的分類等級，將其變?yōu)橐粋€(gè)科。但是，在分類學(xué)中包括目前的研究顯示，盡管這兩個(gè)亞科有一些不同的地方，可是它們非常相似，因此將它們劃分為兩個(gè)單獨(dú)的科是不合理的。相似的結(jié)論可以從 Tiagi［12］和 Dixit［13］的植物維管結(jié)構(gòu)研究的基礎(chǔ)上得出。

最近，朱華等［14］報(bào)導(dǎo)了古鉤藤的藥材性狀是:藤莖呈類圓形，通常切段或斜片，長約2～4cm，直徑0.5～3.5 cm。老莖表皮粗糙，棕褐色，具縱皺紋，未脫落栓皮黃褐色，有橫向突起的圓點(diǎn) (皮孔)。栓皮松脆，可剝離，棕紅色。斷面黃色，具菊花心，質(zhì)堅(jiān)，難折斷，無毛。葉對生，葉片矩圓形或橢圓形，長0.8～1.6 cm。寬3.5～6.5 cm，頂端圓形尖頭，基部寬楔形，上表面黑褐色，下表面黃白色。側(cè)脈近水平橫出，每邊約30條。味澀，微苦。發(fā)現(xiàn)古鉤藤的顯微特征較明顯:栓皮棕紅色，皮層與髓部有乳汁管細(xì)胞散在，葉的下表皮有許多非腺毛為乳突狀，把氣孔遮住。韌皮纖維有2種，一種韌皮纖維細(xì)長，壁薄，另一種韌皮纖維較短，壁微波狀。這些特征可作為鑒別古鉤藤真?zhèn)蔚膮⒖家罁?jù)。此外，還確定了古鉤藤的吸收光譜在400～800nm波長測定光譜圖，結(jié)果乙醇浸泡液在410.6nm和665.0nm有2處最高吸收峰，而氯彷浸泡液在414.0nm和772.5nm也有2處最高吸收峰。

2 植物分子生物學(xué)

Mahmood［15］等從蘿藦科中娃兒藤、古鉤藤、南山藤的樹葉中分離出基因組DNA，經(jīng)過聚合酶鏈反應(yīng)和數(shù)據(jù)處理分析，聚類分析發(fā)現(xiàn)這三種基因相似度范圍在數(shù)值區(qū)間0.42～0.85之間，其平均值為0.63。對所有引物的聚類分析表明基因多樣性存在于同種和不同種的物種之間。物種是生態(tài)多樣性的單位，等位基因是基因多樣性的單位，不同種的樣品比同種的樣品含有更多的不同等位基因。結(jié)果表明這些物種之間存在著非常密切的親緣關(guān)系。

蘿藦科是通過昆蟲傳花授粉的，這種方式影響了其進(jìn)化過程從而在構(gòu)成分類內(nèi)產(chǎn)生變化。不同研究已經(jīng)表明牛奶菜族和馬利筋族主要通過雙翅目昆蟲傳花授粉［16］。娃兒藤和南山藤屬于馬利筋亞科，古鉤藤則屬于杠柳亞科?；虮葘?shí)驗(yàn)研究的結(jié)論也已經(jīng)證明了娃兒藤和南山藤目前在相同的類群，并且顯示出密切的親緣關(guān)係，屬于同一個(gè)亞科，甚至相同的族［15］。例如:牛奶菜族。這個(gè)類群的種已經(jīng)顯示了相互間的密切關(guān)係，而古鉤藤屬于另一個(gè)不同的亞科，例如:杠柳亞科，并且在實(shí)驗(yàn)的分析中，它也是在不同的類群中產(chǎn)生的。

3 化學(xué)成份

迄今為止從古鉤藤中分離鑒定得到的天然化合物主要含強(qiáng)心甙、白葉藤甙 (Cryptolepisin)、白葉藤甙 A、C(Cryptanoside A、C)、吉曼尼醇二十二碳酸酯 (Ger－manicol docosanoate)，還含有抗綠膿桿菌、大腸桿菌、白假絲酵母菌的活性物質(zhì)古鉤藤喹多堿 (Quindo－line)、白葉藤勒堿 (Cryptolepine);附莖含古鉤藤堿 (Buchananine);葉含白葉藤甙 A，B，C(Cryptanoside A，B，C)［9］。

4 藥理作用

4.1 鎮(zhèn)痛抗炎作用 采用小鼠熱板法和扭體法鎮(zhèn)痛實(shí)驗(yàn)，分別觀察古鉤藤水煎液和醇提液對小鼠毛細(xì)血管通透性和二甲苯對小鼠耳廓腫脹的影響。結(jié)果表明，古鉤藤水煎液能顯著提高小鼠痛閾值，降低毛細(xì)血管通透性，抑制由二甲苯所致的炎癥反應(yīng)，可顯著減輕小鼠耳廓腫脹，有明顯的鎮(zhèn)痛和抗炎作用［17］;而醇提液具明顯的鎮(zhèn)痛作用，大劑量能降低毛細(xì)血管通透性，抑制由二甲苯所致的炎癥反應(yīng)，可減輕小鼠耳廓腫脹的作用，因此，有明顯的鎮(zhèn)痛和一定的抗炎作用［18］。

4.2 降糖作用 當(dāng)前，糖尿病患者人數(shù)估計(jì)在1.5億左右，預(yù)測到2025年患者人數(shù)還將增加1倍，中國將成為僅次于印度的第二大糖尿病患病最多國家。糖尿病已被列為全球繼心血管病、腫瘤之后第3位威脅人類健康的慢性非傳染性疾病［19］。目前臨床上降血糖藥的主力軍仍然是西藥［20］，但西藥在治療中存在著諸多不良反應(yīng)，例如低血糖癥、胃腸道不良反應(yīng)、肝腎毒性、心臟毒性等。因此從天然藥物中尋找降血糖有效成分的研究日益受到重視。中藥治療糖尿病有獨(dú)到之處，降糖作用溫和持久，毒性和不良反應(yīng)小，具有綜合治療作用，可有效地延緩并發(fā)癥的發(fā)生與發(fā)展［20］。采用古鉤藤水提液高、低劑量組給小鼠灌胃連給10 d，并和陽性對照藥格列本脲、二甲雙胍比較。古鉤藤水提液對正常小鼠血糖無明顯降低作用而對小鼠實(shí)驗(yàn)性高血糖有一定的降血糖作用［21］。

4.3 強(qiáng)心作用 20世紀(jì)60年代，心衰的治療措施以強(qiáng)心、利尿?yàn)橹鳎?0年代則在強(qiáng)心、利尿的基礎(chǔ)上加用血管擴(kuò)張藥 (如硝酸甘油、硝普鈉等)和改善心肌能量代謝的藥物(如三磷酸腺苷、米力農(nóng)等)，80年代以后，隨著血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑製劑 (ACEI)的問世，ACEI成為心衰治療的“基石”，心衰的治療有了根本性變革［22］，洋地黃強(qiáng)心苷類藥也由原來的主導(dǎo)地位變?yōu)檩o助地位［23］。近年來隨著治療心衰藥物的增多，人們對地高辛治療心衰作用也發(fā)生爭議。因此，尋找更安全、有效的替代藥物成為關(guān)鍵。我國的蘿藦科植物約有42屬204種［24］，其中許多屬植物具有強(qiáng)心作用。呂富華［25，26］和鄧士賢［27］曾報(bào)導(dǎo)國產(chǎn)杠柳屬 (Periploca L.)、馬利筋屬 (Asclepias L.)和牛角瓜屬 (Calotropis R.Br.)植物的強(qiáng)心作用。而古鉤藤根與全草均含強(qiáng)心苷［2］。藥理研究表明從古鉤藤提取的白葉藤苷可使蛙心停止于收縮或半縮狀態(tài)，使在體兔心及離體豚鼠心臟收縮力加強(qiáng)，心率減慢，繼而出現(xiàn)心率不整，最后停止于收縮期，豚鼠心電圖觀察表現(xiàn)典型的洋地黃樣強(qiáng)心作用，并且較洋地黃毒苷蓄積性低［28］。所以，古鉤藤有進(jìn)一步開發(fā)及臨床應(yīng)用的必要。

5 問題與展望

本文對古鉤藤的生藥學(xué)鑒定、植物分子生物學(xué)、化學(xué)成分、藥理作用等方面進(jìn)行了總結(jié)，發(fā)現(xiàn)目前對古鉤藤的研究還遠(yuǎn)遠(yuǎn)不足，特別是化學(xué)成分和藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的研究幾乎是空白，同時(shí)藥理作用和相關(guān)的機(jī)理研究等方面還需要進(jìn)一步完善。

此外，對古鉤藤進(jìn)行藥用植物學(xué)及其關(guān)心的活性成分、藥理及藥效學(xué)等基礎(chǔ)研究還有很大的空間，如強(qiáng)心苷成分的發(fā)現(xiàn)，尚缺乏相關(guān)的藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)支撐數(shù)據(jù)，因此古鉤藤強(qiáng)心苷等的生物活性及其構(gòu)效關(guān)系將是一個(gè)值得研究的新方向。同時(shí)，還應(yīng)加強(qiáng)古鉤藤其他有效成分的研究，使其實(shí)現(xiàn)充分的開發(fā)利用。如加強(qiáng)古鉤藤的分子生物學(xué)以及進(jìn)一步的細(xì)胞生物學(xué)研究，為古鉤藤種質(zhì)資源保護(hù)和種源質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的建立及進(jìn)一步實(shí)施CAP規(guī)范種植打下基礎(chǔ);現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)的進(jìn)步，如細(xì)胞培養(yǎng)、組織培養(yǎng)和轉(zhuǎn)基因技術(shù)等，可以預(yù)期直接生產(chǎn)古鉤藤生理代謝產(chǎn)物。在活性成分研究的基礎(chǔ)上進(jìn)行上述研究，將對植物保護(hù)和資源利用的理想途徑和方向產(chǎn)生深刻的影響。

由于古鉤藤在國內(nèi)外民間廣泛應(yīng)用治療腰腹痛、骨折等疾病，為此對古鉤藤的全面、系統(tǒng)的研究是十分必要的，同時(shí)應(yīng)關(guān)注加強(qiáng)生態(tài)資源合理應(yīng)用的研究。古鉤藤藥用價(jià)值認(rèn)識的不斷深入研究必將進(jìn)一步推動(dòng)古鉤藤的產(chǎn)業(yè)化發(fā)展。

［1］全國中草藥匯編編寫組.全國中草藥匯編.下冊.北京:人民衛(wèi)生出版社，1976:170.

［2］江蘇新醫(yī)學(xué)院.中藥大辭典.上冊.上海:上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，1977:565.

［3］Mabberley D J.The Plant Book［M］.Cambridge:Cambridge Press，1997:59－60.

［4］蔣英，李秉滔.中國植物志:第63卷 ［M］.北京:科學(xué)出版社，1977:249－617.

［5］張國華，張如松.蘿藦科植物的藥理作用研究［J］.浙江中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2009，33(3):445－446.

［6］莫羅堅(jiān)，黃久香，莊雪影，李秉滔.國產(chǎn)蘿藦科牛奶菜族11屬植物葉表皮形態(tài)研究［J］.華南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2006，27(2):56－64.

［7］李玉玲，秦新生，馮乙晴.12種鵝絨藤屬 (蘿藦科)植物花粉器形態(tài)學(xué)研究［J］.植物研究，2012，32(2):137－142.

［8］白重炎，曹娟云，王寧勃.蘿藦科2種植物乳汁管的解剖結(jié)構(gòu)研究［J］.延安大學(xué)學(xué)報(bào) (自然科學(xué)版)，31(2):90－94.

［9］余傳隆，黃泰康，丁志遵.中藥辭海.第一卷.北京:中國醫(yī)藥科技出版社，1993:1393－1394.

［10］Lakshminarayna，K;Babu，MS.Developmental morphology of the micro and megasporangium in Cryptolepis－Buchananii R －and－S［J］.Current Science，1988，15(57).

［11］Rendle，A.B..The classification of flowering plants.Vol.Ⅱ，Cambridge University Press，Cambridge，1938.

［12］［13］Tiagi， B.and Dixit， G..Bull， Bot.Soc.Bengal，1965，19:111.

［14］朱華，周春山，廖月葵，白燕遠(yuǎn).古鉤藤的生藥學(xué)鑒定［J］.中國中藥雜志，2004，29(7)，:634－636.

［15］Mahmood，Tariq;Tariq，Adeeba;Nazar，Nazia;et al.Comparative assessment of genetic variability in Cryptolepis Buchananii，Tylophora Hirsuta and Wattakaka Volubilis ［J］Pakistan Journal of Botany，2011，43(5):2295－2300.

［16］Venter H.J.T.and R.L.Verhoeven.1997.A tribal classification of the Periplocoideae(Apocynaceae).Taxon，46:705－720.

［17］張興燊，周芳，廖月葵，李麗，熊靖云，藍(lán)國亮，陳武棠，韋江惠，覃莉萍，梁飛.古鉤藤鎮(zhèn)痛抗炎藥理作用的實(shí)驗(yàn)研究［J］.時(shí)珍國醫(yī)國藥，2007，18(7):1603－1604.

［18］張興燊，文麗艷，秦紅玲，陳紅嵐，雷宗煥，李麗，周芳.古鉤藤醇提液鎮(zhèn)痛抗炎藥理作用的實(shí)驗(yàn)研究［J］.時(shí)珍國醫(yī)國藥，2009，20(11):2735－2736.

［19］王波.番石榴葉提取物輔助降血糖作用及其機(jī)制研究［D］.四川:四川大學(xué)博士學(xué)位論文，2007:16.

［20］洪浩.中藥降血糖作用機(jī)制實(shí)驗(yàn)研究進(jìn)展［J］.安徽中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2001，20(2):59－61.

［21］張興燊，黃昕，潘能玉.古鉤藤水提液對正常小鼠血糖影響的實(shí)驗(yàn)研究［J］.時(shí)珍國醫(yī)國藥，2010，21(10):2699－2700.

［22］Packer M，Cohn JN.Consensus recommendations for the management of chronic heart failure［J］.Am J Cardiol，1999，83:1A －5A.

［23］白玉國，趙秀麗，張愛琴.洋地黃強(qiáng)心苷類藥治療充血性心力衰竭的研究進(jìn)展［J］.藥物不良反應(yīng)雜志，2006，8(3):165－168.

［24］侯寬昭.中國種子植物科屬辭典.北京:科學(xué)出版社，1958:41.

［25］呂富華，李章文，江明性.國產(chǎn)馬利筋的強(qiáng)心作用［J］.藥學(xué)學(xué)報(bào)，1960，8(6):245－249.

［26］李章文，吳瑞熙，呂富華.杠柳皮 (北五加皮)的藥理作用［J］.中華醫(yī)學(xué)雜志，1956，42(7):651－652.

［27］鄧士賢，王懋德，王德成.牛角瓜甙的強(qiáng)心作用及其生物效價(jià)［J］.藥學(xué)學(xué)報(bào)，1962，9(11):667－670.

［28］樂開禮，周云仙，楊德馨.白葉藤甙的強(qiáng)心作用［J］.藥學(xué)學(xué)報(bào)，1963，10(9):561－565.