化妝品中鄰苯二甲酸酯類物質(zhì)含量及其分析技術(shù)進(jìn)展

李華平 王玉健 紀(jì)少凡

（1. 海南利蒙特生物農(nóng)藥有限公司 海南?？?570125；2. 海南出入境檢驗檢疫局）

1 前言

PAEs具有種類多、難以降解、生物富集性強(qiáng)的特點[2]，可通過飲水、進(jìn)食、皮膚接觸和呼吸等途徑進(jìn)入動物及人體[3]，造成多種多樣的危害，如致癌性、致畸性以及免疫抑制性。尤其是PAEs含較弱的雌性荷爾蒙活性成分，進(jìn)入動物及人體后，與相應(yīng)的激素受體結(jié)合，干擾內(nèi)分泌，造成生殖功能異常和生殖毒性[4,5]，因此，現(xiàn)已將PAEs歸為環(huán)境雌激素類物[1]。

PAEs引起的環(huán)境污染已受到全球性關(guān)注，它被稱為“第二個全球性PCB污染物”。1977年美國國家環(huán)保局（EPA）將6種PAEs列為優(yōu)先控制的有毒污染物；1997年世界野生動物基金會（WWF）列出的68種環(huán)境激素類物質(zhì)中包括8種PAEs[6]；由于增塑劑引起的食品、保健品安全風(fēng)波，2011年6月1日，我國衛(wèi)生部發(fā)布緊急公告，將鄰苯二甲酸酯類增塑劑物質(zhì)列入食品中可能違法添加的非食用物質(zhì)和易濫用的食品添加劑名單。

2 PAEs的來源及用途

PAEs是羧酸衍生物中酯的一類，由苯二甲酸（酐）與相應(yīng)的醇經(jīng)酯化反應(yīng)合成。其化學(xué)結(jié)構(gòu)是由一個剛性平面基環(huán)和兩個可塑的線性脂肪鏈組成，具有沸點高、不易揮發(fā)、蒸氣壓低、空氣中濃度不高等特性，不容易引起工業(yè)中毒。而正是因為這些特性，人們一直忽視了PAEs的污染特性而大量地使用[7]。

環(huán)境中PAEs的來源包括自然來源和人工合成。PAEs的自然來源很廣泛[8]，如在木頭中常常含有正鄰苯二甲酸，在木質(zhì)素的氧化產(chǎn)物中也有該類化合物，而且它容易作為萘和其衍生物的化學(xué)氧化和生物氧化產(chǎn)物而出現(xiàn)在環(huán)境中；煙葉、葡萄、芒果、芙蓉紅、氧化玉米油等許多植物組織中都或多或少地含有這類物質(zhì)；微生物也有合成PAEs的能力，在真菌Stachy botryschartarum產(chǎn)生的腐殖酸中PAEs的含量為16%[9]。PAEs的人工合成首先是通過萘或二甲苯氯代為鄰苯二甲酸酐，再通過費歇爾（Fischer）酯化反應(yīng)由鄰苯二甲酸酐和相應(yīng)的醇結(jié)合而產(chǎn)生。PAEs產(chǎn)品間的差異在于其烷基鏈的長度不同，烷基鏈的碳原子數(shù)通常為1-13[2]。

PAEs的用途極其廣泛[10-11]，烷基鏈碳原子數(shù)1-4的PAEs主要用作密封用品、粘合劑、墨水原料；烷基碳原子數(shù)大于6的PAEs主要用作塑料改性劑和增強(qiáng)劑等。含有PAEs的產(chǎn)品涉及塑料薄膜、塑料袋、保鮮盒、快餐盒、塑料玩具、學(xué)習(xí)用品、人工心臟瓣膜、血管移植材料、子宮避孕器、注射器、藥瓶、農(nóng)藥、驅(qū)蟲劑、化妝品、香味品、潤滑劑和去泡劑等。在這些產(chǎn)品中，PAEs的含量變化較大，一般為20% -50%，有的高達(dá)90%以上[12]。從PAEs的流向看，80%以上的PAEs用作增塑劑，以增大產(chǎn)品的可塑性和提高產(chǎn)品的強(qiáng)度，因此它在塑料中的含量很高，如在聚氯乙烯(PVC)中的添加量就高達(dá)20%-30%[13]?，F(xiàn)在世界上PAEs的年產(chǎn)量高達(dá)2. 27×107t[14]，其中最常用的DEHP僅美國1980年的產(chǎn)量就在13. 62萬t以上；1998年中國PAEs的產(chǎn)量達(dá)到70萬t，其中DEHP產(chǎn)量為30萬t。

3 化妝品中的PAEs

化妝品中PAEs應(yīng)用較多的產(chǎn)品有香水、指甲油、頭發(fā)噴霧劑、香波、洗滌用品等。PAEs用在指甲油中能降低其脆性而避免碎裂，用在發(fā)膠中會在頭發(fā)表面形成柔韌的膜而避免頭發(fā)僵硬，用在皮膚上能增加皮膚的柔順感，還可增加洗滌用品對皮膚的滲透性，另外還可作為一些產(chǎn)品的溶劑和芳香的固定液。

人類與化妝品接觸的密切程度僅次于食品，經(jīng)常使用富含PAEs的化妝品，會使其在體內(nèi)不斷蓄積，從而增加對人體的危害性。對此美國商品標(biāo)簽法案明確要求：若化妝品中添加了PAEs，必須在標(biāo)簽中明確標(biāo)出[15]。在歐盟的化妝品規(guī)程76/768/EEC和我國的2007版《化妝品衛(wèi)生規(guī)范》中將DBP、鄰苯二甲酸二戊酯（DPP）等7種PAEs列為化妝品中的禁用組分，我國臺灣地區(qū)禁止化妝品使用DOP，德國的日用品和化妝品法令于2006年6月9日公布對每種或幾種PAEs總和的限量為0.1%[16]。

李潔等[17]對市場送檢或抽檢的115件化妝品樣品（其中包括13件香水，68件護(hù)膚保濕類產(chǎn)品，20件香波洗滌護(hù)發(fā)類產(chǎn)品，其他類14件）進(jìn)行了PAEs情況調(diào)查，結(jié)果發(fā)現(xiàn)在化妝品中添加PAEs的情況相當(dāng)嚴(yán)重，主要有3種：DEP、DBP、DEHP。在這些化妝品中，香水類化妝品添加情況最常見，絕大部分香水都添加了PAEs，在所檢樣品中的檢出率達(dá)92.3%，其次是護(hù)膚類化妝品47.1%，洗滌護(hù)發(fā)類化妝品30.0%，其它類化妝品28.6%。美國調(diào)查機(jī)構(gòu)公布的一份報告顯示：美國市場3/4的化妝品中含有PAEs。美國疾病防治中心統(tǒng)計顯示：5%的育齡婦女每日DBP的攝入量比正常人平均值高20倍。2002年底，瑞典科學(xué)家發(fā)現(xiàn)34種世界頂尖的香水和化妝品中含有致癌和導(dǎo)致不育的DEHP物質(zhì)[18]。

4 化妝品中PAEs的檢測方法

目前關(guān)于化妝品中PAEs增塑劑含量檢測的文獻(xiàn)不多，儀器方法主要為氣相色譜法、氣相色譜法-質(zhì)譜法、液相色譜法等，提取方法多采用甲醇或乙酸乙酯超聲提取。

“新秩序”時期印尼的政治經(jīng)濟(jì)等方面相對穩(wěn)定，語言規(guī)劃得以重視，政府提倡“優(yōu)先印尼語，維護(hù)地方語，掌握外國語”，再次鞏固了印尼語的地位。蘇哈托政府試圖同化華人，華人作為一個民族沒有得到國家的認(rèn)可，華語不論是作為華人的民族共同語還是印尼的地方語也均未獲得官方認(rèn)可。

4.1 氣相色譜法

陳會明等[18]采用氣相色譜法（FID）檢測器測定了化妝品中6種PAEs ：DMP、DEP、DBP、BBP、DEHP和DOP。樣品用甲醇超聲提取，經(jīng)高速冷凍離心，清液經(jīng)干燥脫水過0.5μm濾膜過濾，直接注入氣相色譜儀進(jìn)行分析。陽性結(jié)果經(jīng)過氣相色譜-電子電離-質(zhì)譜檢測確證。

王東新[19]采用毛細(xì)管氣相色譜法檢測指甲油中5種PAEs：DMP、DEP、DBP、DEHP、DOP。前處理方法為：將干指甲油采用超聲振蕩溶解，色譜分析使用高穩(wěn)定性、高分離能力的溶膠-凝膠毛細(xì)管柱，采用內(nèi)標(biāo)法定量。在檢測的6個不同品牌的指甲油中有5個品牌含有PAEs，測定結(jié)果表明檢測限為0.16-0.50 ng，回收率為95.4%-100.4%，樣品質(zhì)量百分含量測定的變異系數(shù)為1.17%-2.91%。

陳琨等[20]建立了氣相色譜測定指甲油中PAEs的方法。前處理方法為：準(zhǔn)確稱取指甲油樣品0.5g于10mL透明樣品瓶中，然后用移液管加入乙酸乙酯10mL，混勻，靜置后用注射器取上清液至小樣品瓶中，氣相色譜儀測定。

4.2 氣相色譜-質(zhì)譜法

沈昊宇等[15]采用超聲協(xié)助甲醇提取、固相萃取凈化、氣相色譜/選擇離子質(zhì)譜聯(lián)用法，同時測定了化妝品中8種PAEs。用該方法對15種實際樣品進(jìn)行定量檢測，結(jié)果表明除了一種樣品中不含待測物外，其余樣品均檢測到3-7種待測物。其中以鄰苯二甲酸二正丙酯（DPP）、鄰苯二甲酸二環(huán)己酯（DCHP）和鄰苯二甲酸二(2-乙基己)酯（DEHP）為主。同時比較了以甲醇、丙酮、乙酸乙酯、正己烷的提取效果和提取時間，結(jié)果發(fā)現(xiàn)以甲醇超聲提取30min效果最佳。此外討論了固相萃取小柱淋洗液和洗脫劑中甲醇-水的比例，結(jié)果表明選用40%的甲醇水溶液作為淋洗劑，既可有效去除干擾物質(zhì)，又不會造成待測物的損失。洗脫劑則采用純甲醇溶液。

王峰等[16]以甲醇為溶劑，采用超聲法提取，氣相色譜/質(zhì)譜法同時測定化妝品中的15種PAEs，實際樣品檢測結(jié)果表明PAEs在化妝品中普遍存在。

周相娟等[21]建立了超聲提取、氣相色譜-質(zhì)譜技術(shù)同時測定化妝品中16種PAEs的方法。根據(jù)實驗建立的檢測方法對16種不同類型(美容修飾類、護(hù)理類、清潔類等)的實際樣品進(jìn)行檢測，其中77%的化妝品中檢出有PAEs，較為普遍的是DEP、DBP和DEHP。檢出的化妝品中DEP的質(zhì)量分?jǐn)?shù)在8.82-953.35 mg/kg，DBP的質(zhì)量分?jǐn)?shù)在14.69-110.53 mg/kg，DEHP的質(zhì)量分?jǐn)?shù)在4.30-5.33 mg/kg。檢測結(jié)果在一定程度上說明化妝品中使用PAEs現(xiàn)象非常普遍，應(yīng)予高度重視。

劉祥萍等、李元星等[22-23]建立了以氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)測定化妝品中PAEs含量的方法?；瘖y品樣品用甲醇或乙酸乙酯提取，采用氣相色譜法進(jìn)行分離，質(zhì)譜法進(jìn)行定性、定量。

梁婧等[24]建立了同時測定化妝品中19種PAEs的氣相色譜-質(zhì)譜方法。樣品經(jīng)二氯甲烷超聲提取后，用硅膠-中性氧化鋁(2:3，m/m)混合填料固相小柱保留、乙酸乙酯-正己烷(8:2，v/v)洗脫等步驟凈化后，再用氣相色譜-質(zhì)譜法對19種目標(biāo)物進(jìn)行定性、定量分析。采用保留時間與特征離子豐度比共同進(jìn)行定性分析，減少了復(fù)雜樣品基質(zhì)中的干擾。在優(yōu)化的實驗條件及0.1、0.5、2.0μg/g的添加水平下，平均加標(biāo)回收率為72.2%-110.9%，方法檢出限(以3倍標(biāo)準(zhǔn)偏差計)為0.0065μg/g(鄰苯二甲酸二異戊酯DIPP)-0.062μg/g(鄰苯二甲酸二異丁酯DIBP)之間。

4.3 液相色譜法

楊艷偉等[25]建立了同時測定化妝品中10種PAEs的高效液相色譜法。樣品經(jīng)甲醇溶解、超聲提取、離心、過濾，采用C18色譜柱以甲醇-水為流動相梯度洗脫，檢測波長為280nm，柱溫為25℃，高效液相色譜法進(jìn)行測定，并探討了最佳實驗條件。

鄭和輝等[26]將化妝品樣品經(jīng)乙腈提取后，用UPLC-PDA進(jìn)行分析檢測，結(jié)合保留時間和光譜進(jìn)行定性分析，定量檢測波長224nm。用該分析方法對115件化妝品樣品進(jìn)行了分析檢測，29件化妝品檢出DEP，14件DBP，25件DEHP。總檢出陽性樣品54件，總陽性檢出率47.0%。

陳會明等[27]、朱杰民等[28]、陳黎明等[29]、張會軍等[30]、孫文閃等[31]、佟曉波等[32]、徐振東等[33]均采用液相色譜法建立了化妝品中PAEs的檢測方法。涉及的目標(biāo)化合物數(shù)量不等，提取方法多為甲醇超聲提取，所用儀器檢測器均為二極管陣列檢測器。

5 展望

PAEs是環(huán)境中普遍存在的污染物，因此在實際分析中應(yīng)注意減少本底干擾。此外，降低復(fù)雜基質(zhì)的干擾也很必要。串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)是選擇某一碎片離子作為母離子，再在適合的激發(fā)電壓下將母離子二次電離，產(chǎn)生子離子。由于特征母離子和子離子的一一對應(yīng)性極大地降低了化學(xué)噪聲，使之排除干擾能力更強(qiáng)，定量時本底值更低，因而檢測靈敏度高，特別適用于分析背景干擾嚴(yán)重、定性困難、被測化合物含量很低的復(fù)雜基質(zhì)樣品[34]。分析基質(zhì)較復(fù)雜的化妝品樣品，如指甲油、口紅、香精等時，潛在的干擾易影響定性、定量分析的準(zhǔn)確性，造成誤判或錯判，而采用串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)的多反應(yīng)監(jiān)測模式（MRM）則可有效排除基質(zhì)干擾。采用這一技術(shù)（如GC-MS/MS、LC-MS/MS）方法進(jìn)行復(fù)雜樣品中PAEs的檢測是發(fā)展趨勢。

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