注射用銀杏葉提取物對小鼠神經(jīng)系統(tǒng)的影響

張紅萍 徐麗丹 浙江省東陽市人民醫(yī)院中藥房 東陽 322100

俞忠明 董 宇 浙江省中醫(yī)藥研究院中藥研究中心

注射用銀杏葉提取物對小鼠神經(jīng)系統(tǒng)的影響

張紅萍 徐麗丹 浙江省東陽市人民醫(yī)院中藥房 東陽 322100

俞忠明 董 宇 浙江省中醫(yī)藥研究院中藥研究中心

目的：觀察注射用銀杏葉提取物靜脈注射對動物神經(jīng)系統(tǒng)的影響。方法：以注射用銀杏葉提取物高劑量（18mg/kg）、中劑量（9mg/kg）、低劑量（4.5mg/kg）靜脈注射給藥，經(jīng)小鼠自主活動試驗(yàn)、小鼠轉(zhuǎn)棒試驗(yàn)及與戊巴比妥鈉閾下劑量催眠協(xié)同作用試驗(yàn)，觀察銀杏葉提取物對小鼠神經(jīng)系統(tǒng)的影響。結(jié)果：銀杏葉提取物高、中、低三個劑量組與溶劑對照組比較，小鼠自主活動數(shù)、落棒率及翻正反射發(fā)生率均無顯著影響（P＞0.05）。結(jié)論：注射用銀杏葉提取物在劑量范圍內(nèi)對神經(jīng)系統(tǒng)無明顯影響。

小鼠 注射用銀杏葉提取物 神經(jīng)系統(tǒng)

銀杏作為一味中藥，味微苦，性平，歸心、肺經(jīng)，具有活血化瘀、通經(jīng)止痛、斂肺平喘、化濁降脂等功效。銀杏葉提取物（extract of ginkgo biloba，EGb）是從銀杏葉中提取的具有獨(dú)特藥理活性的混合物，國內(nèi)外許多學(xué)者采用現(xiàn)代分離技術(shù)和測試手段對銀杏葉提取物的化學(xué)成分進(jìn)行研究，從銀杏葉提取物中發(fā)現(xiàn)了黃酮類、萜類內(nèi)酯、聚異戊烯醇類、有機(jī)酸、烷基酚和烷基酚酸、甾體化合物、氨基酸和微量元素在內(nèi)的100多種化學(xué)成分，其中黃酮具有保護(hù)毛細(xì)血管通透性、擴(kuò)張冠狀動脈、恢復(fù)動脈血管循環(huán)、解除心臟平滑肌痙攣等功效。近年對銀杏葉提取物藥理和神經(jīng)系統(tǒng)作用進(jìn)行大量的研究，取得一定進(jìn)展[1-3]，為銀杏葉提取物的臨床應(yīng)用提供了依據(jù)。本研究觀察銀杏葉提取物靜脈注射對小鼠神經(jīng)系統(tǒng)的影響。

1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1 動 物 ICR小鼠，體質(zhì)量（20±2）g，雌雄各半，120只，由浙江省中醫(yī)藥研究院動物中心提供。實(shí)驗(yàn)動物合格證號：SYXK（浙）2009-0122。

1.2 儀器與試劑 YSD-4Q藥理生理多用儀（安徽蚌埠無線二廠）；YLS-4C轉(zhuǎn)棒式疲勞儀（山東省醫(yī)學(xué)科學(xué)院設(shè)備站）；注射用銀杏葉提取物（杭州合核生物化工技術(shù)升發(fā)有限公司提供）；0.9%氯化鈉注射液。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 對小鼠自主活動的影響[4-6]取小鼠40只，隨機(jī)分成4組，即注射用銀杏葉提取物高劑量組（18mg/ kg）、中劑量組（9mg/kg）、低劑量組（4.5mg/kg）及空白溶劑對照組（0.9%氯化鈉注射液），每組10只，雌雄各半。將小鼠置藥理生理多用儀中適應(yīng)10min后測3min內(nèi)自主活動數(shù)，然后取每組相同編號的小鼠間隔一定時間，按組別分別尾靜脈注射給藥，各鼠分別在給藥后15、30、60、120min置藥理生理多用儀光電盒中測其活動次數(shù)，以給藥前后各組活動次數(shù)的差值進(jìn)行統(tǒng)計分析。

2.2 對小鼠肌肉協(xié)調(diào)能力的影響 小鼠轉(zhuǎn)棒試驗(yàn)（Rotarod Test）[7-9]主要是用于檢測小鼠的運(yùn)動協(xié)調(diào)能力、藥物對小鼠肌肉松弛作用的強(qiáng)度及檢測神經(jīng)毒性物質(zhì)對小鼠神經(jīng)系統(tǒng)的影響等。本實(shí)驗(yàn)采用轉(zhuǎn)棒試驗(yàn)觀察注射用銀杏葉提取物對小鼠肌肉協(xié)調(diào)能力的影響。實(shí)驗(yàn)前將小鼠放置轉(zhuǎn)棒上，轉(zhuǎn)速為16次/ min，選取在棒上停留3min以上小鼠40只進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，分組方法同2.1。每次取各組相同編號的小鼠，共40只尾靜脈注射給藥，注射容積0.2mL/10g，小鼠于給藥后15、30、60、120min分別放置轉(zhuǎn)棒儀1～4室中的轉(zhuǎn)棒上，記錄3min內(nèi)落棒動物數(shù)，計算落棒率。

2.3 對小鼠戊巴比妥鈉的閾下催眠劑量影響[10-11]取小鼠40只，分組方法同2.1。按組別進(jìn)行小鼠尾靜脈注射給藥，注射容積0.2mL/10g，給藥后15min，按27mg/kg的劑量腹腔注射戊巴比妥鈉，觀察30min內(nèi)翻正反射消失達(dá)1min以上的動物數(shù)，計算各組小鼠翻正反射發(fā)生率。

2.4 統(tǒng)計學(xué)方法 應(yīng)用SPSS16.0軟件，進(jìn)行方差分析，對于落棒率及入睡率采用χ2檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

3.1 四組小鼠自主活動次數(shù)比較 各組小鼠活動次數(shù)差值、均值經(jīng)單因素方差分析，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P=0.87），見表1。

表1 四組小鼠自主活動次數(shù)比較（±s） 次/3min

組別溶劑對照組銀杏葉提取物高劑量組銀杏葉提取物中劑量組銀杏葉提取物低劑量組n/只10 10 10 10劑量/（mg/kg）0 18 9 4.5藥前活動次數(shù)62.20±24.60 63.70±18.40 59.40±18.72 60.90±18.62 15min 22.80±13.57 20.30±8.00 15.70±4.11 21.10±8.60 30min 26.20±12.05 27.60±17.39 27.60±11.64 29.30±11.20 60min 31.10±13.40 30.60±20.22 26.80±11.35 30.20±10.64 120min 34.00±13.37 35.70±16.43 31.10±11.87 36.40±10.06藥后活動次數(shù)差值/次

3.2 四組小鼠肌肉協(xié)調(diào)能力比較 各組小鼠落棒率經(jīng)卡方檢驗(yàn)差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P=0.06），見表2。

3.3 四組小鼠戊巴比妥鈉閾下催眠劑量比較 各組小鼠入睡數(shù)經(jīng)卡方檢驗(yàn)差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P=0.73），見表3。

4 討論

銀杏屬于裸子植物門銀杏科銀杏屬，只有一個種，至今具有接近2億年的歷史。因此，被稱為“活化石”，銀杏葉中含有天然活性黃酮及苦內(nèi)酯等與人體健康有益的多種有效成份，具有溶解膽固醇，擴(kuò)張血管的作用，對改善腦功能障礙、動脈硬化、高血壓、眩暈、耳鳴、頭痛、老年癡呆、記憶力減退等方面具有明顯效果。其防病、治病、健身的價值和使用在明代李時珍的《本草綱目》中早有記載。銀杏葉提取物（EGb）是從銀杏葉中提取精制而成的純天然藥物，主要含有黃酮類、萜類和有機(jī)酸類等有效成分，具有清除自由基、抑制血小板活化因子、抑制一氧化氮合酶、抑制谷氨酸毒性、保護(hù)線粒體等多種生理作用[12-15]，目前已經(jīng)廣泛用于心腦血管疾病的臨床治療。本實(shí)驗(yàn)通過注射用銀杏葉提取物高、中、低劑量對小鼠自主活動、肌肉協(xié)調(diào)能力及戊巴比妥鈉閾下催眠劑量的影響的研究提示，注射用銀杏葉提取物高、中、低劑量對小鼠神經(jīng)系統(tǒng)的影響與空白對照組差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。表明注射用銀杏葉提取物對小鼠神經(jīng)系統(tǒng)，在劑量范圍內(nèi)使用安全，為注射用銀杏葉提取物臨床安全使用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)，同時為銀杏葉提取物的深度開發(fā)和利用提供可能。

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Influence of the Injection of Ginkgo Biloba Extract on the Nervous System of Mice

ZHANG Hongping，XU Lidan，YU Zhongming，et al.The People's Hospital of Dongyang，Dongyang（322100），China

Objective：To observe the effect of the injection of ginkgo biloba extract on the nervous system of mice. Methods：Forty mice were randomly divided into 4 groups and were intravenously given injection of ginkgo biloba extract at the dose of 18，9，and 4.5 mg/kg and 0.9%sodium chloride injection（served as solvent control），respectively.The spontaneous activity test，turn rod test and hypnotic synergy test under sodium pentobarbital threshold dose were carried out to observe the effect of ginkgo biloba extract on the nervous system.Results：No significant difference was noted in the number of spontaneous activity，rod drop rate，and the righting reflex of mice between the ginkgo biloba extract groups and the solvent control group（P＞0.05）.Conclusion：The injection of ginkgo biloba ex tract in the dose range had no obvious influence on the nervous system of mice.

mice injection of ginkgo biloba extract nervous system

2013-05-23

浙江省科技廳計劃項(xiàng)目（No.2012C33125）

董宇，Tel：0571-88849088；E-mail：107393636@qq.com