人促凋亡蛋白基因bax的克隆與原核表達
2012-12-31 00:00:00孫玉科張彥杰李娜董巖巖劉欽松
湖北農(nóng)業(yè)科學(xué) 2012年13期
摘要：以人促凋亡蛋白基因ｂａｘ全長轉(zhuǎn)錄本ｃＤＮＡ為模板，經(jīng)ＰＣＲ擴增得到ｂａｘ基因，將其克隆到ｐＭＤｌ８－Ｔ，并構(gòu)建原核表達質(zhì)粒載體ｐＧＥＸ－４Ｔ－１－Ｂａｘ，轉(zhuǎn)化大腸桿菌感受態(tài)細胞ＢＬ２１（ＤＥ３），ＩＰＴＧ誘導(dǎo)目的蛋白表達。ＰＣＲ擴增、雙酶切鑒定和測序結(jié)果均顯示ｂａｘ基因已被成功克隆到表達載體中，表達產(chǎn)物經(jīng)ＳＤＳ－ＰＡＧＥ檢測，證實為ＧＳＴ－Ｂａｘ融合蛋白。
關(guān)鍵詞：ｂａｘ；克隆；原核表達
中圖分類號：Ｒ３９４．８；Ｑ７８６ 文獻標識碼：Ａ 文章編號：0439－８114（２０12）13－2858-03
