60%唑醚?代森聯(lián)水分散粒劑中吡唑醚菌酯在辣椒和土壤中的殘留測(cè)定

摘 要： 采用高效液相色譜法定量分析吡唑醚菌酯在辣椒和土壤中的消解動(dòng)態(tài)和最終殘留。吡唑醚菌酯在辣椒和土壤中的添加回收率分別為799%～937%和809%～991%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為22%～40%和18%～28%，吡唑醚菌酯的最低檢出量為2×10-10g，在辣椒和土壤中的最低檢測(cè)濃度為001 mg/kg。吡唑醚菌酯在辣椒和土壤中的消解動(dòng)態(tài)顯示，吡唑醚菌酯在辣椒中的半衰期為36～44 d，在土壤中的半衰期為88～107 d。最終殘留量試驗(yàn)結(jié)果表明：60%唑醚·代森聯(lián)水分散粒劑按施藥劑量為540～810 g ai/hm2，對(duì)水噴霧，連噴3～4次，施藥間隔期為7 d，最后一次噴藥后3、5、7、14、21 d，辣椒中吡唑醚菌酯殘留量為00102～02234 mg/kg，均未超過(guò)05 mg/kg（MRL）。按照推薦使用劑量在辣椒上使用，按采收間隔期3 d收獲是安全的。

關(guān)鍵詞：吡唑醚菌酯；辣椒；土壤；殘留；安全評(píng)價(jià)

中圖分類(lèi)號(hào)：S4823+4；X592 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)號(hào)：A 文章編號(hào)：1001-4942（2012）12-0081-04

Residue Determination of Pyraclostrobin from 60% Pyraclostrobin

Metiram in Pepper and Soil

Li LiangLiang1，2， Wang MingLin1*，Yu JianLei2*， Song GuoChun2， Li RuiJuan2

（1.College of Food Science and Engineering， Shandong Agricultural University， Taian 271018， China；

2.Institute of Plant Protection， Shandong Academy of Agricultural Sciences， Jinan 250100， China）

Abstract The degradation dynamics of pyraclostrobin residued in pepper and soil were determined by HPLC. The average recovery rates were 79.9%～93.7% and 80.9%～99.1% respectively in pepper and soil with the relative standard deviations as 2.2%～4.0% and 1.8%～2.8% respectively. The minimum detectable amount of pyraclostrobin was 2×10-10 g， while its minimum detectable concentration in pepper and soil was 0.01 mg/kg. The half-life of pyraclostrobin were 3.6～4.4 days and 8.8～10.7 days respectively in pepper and soil. When 60% pyraclostrobin metiram was sprayed for 3～4 times successively at 540～810 g a.i./hm2 with the interval period as 7 days， the final residue of pyraclostrobin in pepper was 0.0102～0.2234 mg/kg on the 3rd， 5th， 7th， 14th and 21st day after the final application， which was lower than 0.5 mg/kg （MRL）. In conclusion， the preharvest interval should be suggested as 3 days if 60% pyraclostrobin metiram was applied at recommended dosage for pepper.

Key words Pyraclostrobin； Pepper； Soil； Residue； Safety assessment

吡唑醚菌酯（pyraclostrobin），化學(xué)名稱(chēng)N-f 2-〔1-（4-氯苯）-1H-吡唑-3-基氧甲基〕苯卜N-甲氧氨基甲酸甲酯，是德國(guó)巴斯夫公司研發(fā)的兼具吡唑結(jié)構(gòu)的甲氧基丙烯酸酯類(lèi)新型殺菌劑，可有效防治子囊菌綱、擔(dān)子菌綱、半知菌綱和卵菌綱真菌引起的作物病害，具有殺菌譜廣、活性高、與環(huán)境生物相融性好的特點(diǎn) ，具有很好的市場(chǎng)潛力和廣泛的應(yīng)用前景[1～7]，但長(zhǎng)期、大量使用該農(nóng)藥對(duì)環(huán)境和食品不可避免地帶來(lái)潛在的危險(xiǎn)。目前對(duì)其在作物上的殘留研究已有報(bào)道[8，9]，de Melo Abreu等同時(shí)分析測(cè)定了葡萄和葡萄酒中吡唑醚菌酯等幾種農(nóng)藥的殘留[10]，Zhang等測(cè)定花生中的吡唑醚菌酯[11]，而有關(guān)其在辣椒中的殘留動(dòng)態(tài)未見(jiàn)報(bào)道。本試驗(yàn)利用高效液相色譜法對(duì)60%唑醚·代森聯(lián)水分散粒劑中吡唑醚菌酯在辣椒上的殘留動(dòng)態(tài)及最終殘留開(kāi)展研究，以探明吡唑醚菌酯在辣椒上的殘留規(guī)律，提出合理使用方法，為其進(jìn)一步推廣應(yīng)用提供一定的數(shù)據(jù)基礎(chǔ)，并對(duì)評(píng)價(jià)吡唑醚菌酯的環(huán)境安全性提供重要的參考。1 材料與方法

11 儀器與試劑

LC-20AT液相色譜儀，紫外檢測(cè)器（島津公司），旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（上海亞榮生化儀器廠），超聲波清洗儀（天津奧特賽恩斯儀器有限公司），電子天平（METTLER），組織搗碎機(jī)；玻璃層析柱25 cm×25 cm。

60%唑醚·代森聯(lián)水分散粒劑，德國(guó)巴斯夫公司提供；吡唑醚菌酯標(biāo)準(zhǔn)品，純度999%，德國(guó)巴斯夫公司提供；甲醇、正庚烷、四氫呋喃均為色譜純；丙酮、二氯甲烷、石油醚、乙酸乙酯、無(wú)水硫酸鈉、氯化鈉均為分析純；硅膠（分析純）。

12 田間試驗(yàn)

參照農(nóng)業(yè)部農(nóng)藥檢定所制定的《農(nóng)藥殘留試驗(yàn)準(zhǔn)則》[12]和《農(nóng)藥登記殘留田間試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)范》[13]于2010、2011年分別在山東、浙江兩地進(jìn)行了消解動(dòng)態(tài)試驗(yàn)及最終殘留試驗(yàn)。

121 吡唑醚菌酯在辣椒中殘留消解動(dòng)態(tài)試驗(yàn) 選擇未施用過(guò)吡唑醚菌酯的地方劃區(qū)，重復(fù)3次，并設(shè)置空白對(duì)照區(qū)，小區(qū)面積15 m2，順序排列，小區(qū)間設(shè)保護(hù)行。60%唑醚·代森聯(lián)水分散粒劑按1 080 g ai/hm2劑量施用，辣椒長(zhǎng)到成熟個(gè)體一半時(shí)開(kāi)始噴藥，每公頃用藥液600 kg，使用背負(fù)式噴霧器，對(duì)植株均勻噴霧。施藥后1 h和1、3、5、7、14、21、28 d取辣椒樣品。

取樣方法：辣椒每株分上、下、內(nèi)、外取果實(shí)，共取25 kg，用四分法處理樣品，切碎，取250 g樣品放于-20℃冰箱中保存待測(cè)。

122 吡唑醚菌酯在土壤中模擬殘留消解動(dòng)態(tài)試驗(yàn) 選擇未施用吡唑醚菌酯的地塊，劃區(qū)施藥，并設(shè)置空白對(duì)照區(qū)，小區(qū)面積10 m2，順序排列，重復(fù)3次，小區(qū)間設(shè)保護(hù)行。60%唑醚·代森聯(lián)水分散粒劑按1 080 g ai/ hm2劑量地面均勻噴霧，每公頃用藥液900 kg。噴藥后1 h及1、3、5、7、14、21、28、42 d十點(diǎn)取樣法取土壤樣品，鉆取0～10 cm土壤1 kg，用四分法處理樣品，最后取250 g放于低溫冰柜中待測(cè)。

123 吡唑醚菌酯在辣椒和土壤中最終殘留量試驗(yàn) 選擇未施用過(guò)吡唑醚菌酯的辣椒田劃區(qū)，按60%唑醚·代森聯(lián)水分散粒劑540、810 g ai/hm2劑量，分3、4次噴藥，加空白對(duì)照，5個(gè)處理，3次重復(fù)，共15個(gè)小區(qū)，小區(qū)面積30 m2 ，隨機(jī)排列。于辣椒花期噴藥，每隔7 d施藥1次，共施藥3～4次。施藥器械為背負(fù)式噴霧器，每公頃用藥液900 kg，對(duì)植株均勻噴霧。距最后一次施藥3、5、7、14、21 d各取樣1次，辣椒及土壤取樣方法同動(dòng)態(tài)試驗(yàn)。

13 分析方法

131 樣品的提取、凈化 ①辣椒樣品：稱(chēng)取勻漿機(jī)磨碎的辣椒樣品2000 g于250 ml碘價(jià)瓶中，加入80 ml丙酮和水混合液（8∶ 2，V/V）超聲提取15 min，過(guò)濾至平底燒瓶中，再加入60 ml×2丙酮和水混合液（8∶ 2，V/V），超聲波提取15 min×2，合并濾液至平底燒瓶中。旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器（45℃）減壓濃縮除去丙酮，將濃縮液轉(zhuǎn)移至分液漏斗中，加100 ml飽和食鹽水，用50 ml×3二氯甲烷液-液萃取，經(jīng)無(wú)水硫酸鈉過(guò)濾，收集二氯甲烷相，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器（40℃）減壓濃縮至近干，吹干，待凈化。

在玻璃層析柱內(nèi)依次加入2 cm厚無(wú)水硫酸鈉、10 cm中性硅膠、2 cm厚無(wú)水硫酸鈉，用50 ml石油醚預(yù)淋，棄去淋洗液，用10 ml乙酸乙酯/石油醚（2∶ 1，V/V）將待凈化液轉(zhuǎn)移入柱中，再用100 ml乙酸乙酯/石油醚（2∶ 1，V/V）混合液淋洗，收集淋洗液，45℃濃縮至近干，吹干，用正庚烷/四氫呋喃（91∶ 9，V/V）定容至10 ml，待測(cè)。

②土壤樣品：稱(chēng)取土壤樣品2000 g于250 ml碘價(jià)瓶中，加80 ml乙酸乙酯和石油醚混合液（2∶ 1，V/V），超聲波提取15 min，經(jīng)無(wú)水硫酸鈉過(guò)濾，再分別用乙酸乙酯和石油醚混合液（2∶ 1，V/V）60 ml×2，超聲波提取15 min×2，合并濾液至平底燒瓶中。用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器（45℃）減壓濃縮至近干，吹干，用甲醇定容至10 ml，經(jīng)045 μm微孔濾膜過(guò)濾，待測(cè)。

132 儀器條件 LC-20AT液相色譜儀（日本島津公司）；檢測(cè)器：紫外吸收檢測(cè)器；波長(zhǎng)：278 nm；柱溫：室溫；進(jìn)樣量：20 μl；色譜柱：VP-ODS C18柱，250 mm×46 mm不銹鋼柱；流速：08 ml/min；流動(dòng)相：辣椒樣品為甲醇∶ 水=65∶ 35，土壤樣品為甲醇∶ 水=85∶ 15

133 結(jié)果與計(jì)算 采用外標(biāo)法峰面積定量。在一定范圍內(nèi)吡唑醚菌酯的峰面積響應(yīng)值（Y）和進(jìn)樣量（X）有良好的線性關(guān)系。用吡唑醚菌酯標(biāo)準(zhǔn)品配5個(gè)不同濃度（001、005、010、050、100 mg/kg）的樣品，在上述條件下做標(biāo)準(zhǔn)曲線。吡唑醚菌酯進(jìn)樣量在4×10-10～1×10-7 g之間有良好的線性關(guān)系，直線回歸式為：Y=49968X-36812，R2=09998。

134 方法靈敏度、準(zhǔn)確度及精密度 在上述色譜條件下，吡唑醚菌酯的最小檢出量為2×10-10 g，吡唑醚菌酯在土壤、辣椒中的最低檢測(cè)濃度為001 mg/kg。用未施過(guò)吡唑醚菌酯的辣椒試驗(yàn)地的辣椒和土壤空白樣品進(jìn)行3個(gè)濃度的添加回收率實(shí)驗(yàn)，吡唑醚菌酯實(shí)際添加量均分別為001、050、100 mg/kg，每個(gè)添加濃度做5個(gè)平行樣。辣椒中吡唑醚菌酯的平均添加回收率分別為909%、857%、825%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為

2 結(jié)果與分析

21 吡唑醚菌酯在辣椒和土壤中的殘留消解動(dòng)態(tài)

2010～2011年在山東、浙江進(jìn)行的60%唑醚·代森聯(lián)水分散粒劑在辣椒、土壤中的殘留消解規(guī)律試驗(yàn)顯示，其消解規(guī)律均符合一級(jí)動(dòng)力學(xué)方程式Ct=C0e-KT。式中：Ct為施藥后間隔的殘留農(nóng)藥濃度，C0為施藥后的原始沉積量，K為消解速率常數(shù)，T為施藥后天數(shù)。

試驗(yàn)結(jié)果（表2、表3）看出，吡唑醚菌酯在辣椒中的半衰期為36～44 d，藥后14 d消解率達(dá)88%以上；吡唑醚菌酯在土壤中的半衰期為88～107 d，藥后28 d消解率達(dá)850%以上。總趨勢(shì)基本一致，吡唑醚菌酯在辣椒、土壤中消解速度較快。

22 60%唑醚·代森聯(lián)水分散粒劑在辣椒及土壤中的最終殘留量

辣椒樣品：60%唑醚·代森聯(lián)水分散粒劑540 g ai/hm2，3次藥后3 d殘留量為00106～00231 mg/kg，藥后5、7、14、21 d未檢出；4次藥后3、5 d殘留量為00105～00298 mg/kg，藥后7、14、21 d未檢出。60%唑醚·代森聯(lián)水分散粒劑810 g ai/hm2，3次藥后3、5、7、14 d殘留量為00102～01432 mg/kg，藥后21 d未檢出；4次藥后3、5、7、14 、21 d殘留量為00102～02234 mg/kg。對(duì)照區(qū)樣品均未檢出。檢出樣品的殘留量均低于最高殘留限量（MRL）05 mg/kg（表4）。

土壤樣品：60%唑醚·代森聯(lián)水分散粒劑540 g ai/hm2，3次、4次藥后3、5、7、14、21 d殘留量為00102～01934 mg/kg。60%唑醚·代森聯(lián)水分散粒劑810 g ai/hm2，3次、4次藥后3、5、7、14、21 d殘留量為01028～05735 mg/kg。對(duì)照區(qū)樣品均未檢出（表4）。

3 結(jié)論與討論

60%唑醚·代森聯(lián)水分散粒劑對(duì)辣椒猝倒病有明顯的防治效果，并有一定的促進(jìn)生長(zhǎng)作用，在辣椒中的半衰期為36～44 d，藥后14 d消解達(dá)88%以上?？偟膩?lái)說(shuō)，吡唑醚菌酯在辣椒中半衰期較短，消解速度較快。

我國(guó)尚未規(guī)定吡唑醚菌酯在辣椒中最高殘留限量（MRL），韓國(guó)規(guī)定吡唑醚菌酯在辣椒中最高殘留限量為05 mg/kg。暫以此為依據(jù)，2010～2011年山東、浙江兩地殘留試驗(yàn)結(jié)果，60%唑醚·代森聯(lián)水分散粒劑用于防治辣椒葉斑病，以540～810 g ai/hm2，對(duì)水噴霧，連噴3～4次，施藥間隔期7 d，噴藥后3、5、7、14、21 d，辣椒中吡唑醚菌酯殘留量00102～02234 mg/kg，均未超過(guò)05 mg/kg，建議安全間隔期為3 d。參 考 文 獻(xiàn)：

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