加味天麻膠囊定性定量方法研究

伍 蓉

(溆浦縣食品藥品監(jiān)督管理局，湖南 溆浦 419300)

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加味天麻膠囊定性定量方法研究

伍 蓉

(溆浦縣食品藥品監(jiān)督管理局，湖南 溆浦 419300)

目的：建立加味天麻膠囊的定性定量標(biāo)準(zhǔn)。方法：用薄層色譜(TLC)法對(duì)羌活、當(dāng)歸和獨(dú)活進(jìn)行定性鑒別；用高效液相色譜(HPLC)法測(cè)定加味天麻膠囊中天麻素的含量，采用Dikma Diamonsil C18柱(250mm×4.6mm，5μm)；流動(dòng)相：乙腈-0.05%磷酸溶液(3∶97)；流速：1.0mL·min-1；柱溫：40℃；檢測(cè)波長(zhǎng)：220nm；進(jìn)樣量：10μL。結(jié)果：TLC法能明顯檢出羌活、當(dāng)歸和獨(dú)活的特征斑點(diǎn)，無陰性藥材干擾。天麻素進(jìn)樣量在5.03～100.6μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，r=0.999 7，平均回收率為98.78%，RSD=0.74%,n=6。結(jié)論：該定性、定量方法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、重現(xiàn)性好，能有效控制加味天麻膠囊的質(zhì)量。

加味天麻膠囊；質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)；TLC；HPLC；天麻素

加味天麻膠囊是由天麻、當(dāng)歸、羌活、獨(dú)活、玄參、木瓜、千年健等十五味中藥制成的復(fù)方制劑，具有強(qiáng)筋骨、祛風(fēng)濕、舒筋通絡(luò)、活血止痛功效。用于中風(fēng)經(jīng)絡(luò)引起的風(fēng)濕痹痛、肢體拘攣、手足麻木、腰腿酸痛等癥。天麻為方中君藥，其有效成分為天麻素。建立可靠、準(zhǔn)確、專屬性強(qiáng)的質(zhì)量控制方法，對(duì)提升該制劑質(zhì)量與效價(jià)具有重要意義。

1 儀器與試藥

日本島津LC-20ATVP高效液相色譜儀。天麻素對(duì)照品(批號(hào)：110807-200705)、當(dāng)歸對(duì)照藥材(批號(hào)：120927-200613)、獨(dú)活對(duì)照藥材(批號(hào)：1209407-200708)、羌活對(duì)照藥材(批號(hào)：121405-200401)(均購自中國食品藥品檢定研究院)，加味天麻膠囊(由某醫(yī)院提供，批號(hào)分別為201300509、201300912、201301004、201400305；每粒重0.25g)；乙腈為色譜純，甲醇為分析純，水為超純水。

2 薄層定性鑒別

2.1 羌活、當(dāng)歸、獨(dú)活

取本品5粒，研磨制樣備用；取缺羌活、當(dāng)歸、獨(dú)活做陰性樣品。再取羌活、當(dāng)歸、獨(dú)活對(duì)照藥材各2g，分別加乙醇10mL，在水浴上加熱回流提取2h，放冷，濾過，濾液濃縮至1mL，作為對(duì)照藥材溶液。照薄層色譜法(中國藥典2010年版一部附錄 VI B)試驗(yàn)進(jìn)行。陰性對(duì)照無干擾(圖1)，再噴以8%磷鉬酸乙醇溶液，于105℃烘約10min。供試品色譜中，在與獨(dú)活、當(dāng)歸對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。陰性對(duì)照無干擾，見圖2。

3 天麻素含量測(cè)定

3.1 供試品溶液制備

取裝量差異項(xiàng)下的本品內(nèi)容物約1g，精密加入稀乙醇50mL，定量，加熱回流，冷卻，定量，補(bǔ)重，搖勻，濾過，精密量取濾液10mL，濃縮至近干，殘?jiān)右译?水(3∶97)混合溶液溶解，轉(zhuǎn)移至25mL量瓶中，用乙腈-水(3∶97)混合溶液稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。同理制備陰性參照樣品。對(duì)照品溶液取干燥至恒重的天麻素對(duì)照品10.06mg用甲醇溶解制備成濃度為50.3μg·mL-1的樣本備用。

圖1 羌活、當(dāng)歸、獨(dú)活薄層鑒別

3.2 色譜條件

Dikma Diamonsil C18柱(250mm×4.6mm，5μm)；流動(dòng)相：乙腈-0.05%磷酸溶液(3∶97)；流速：1.0mL·min-1；柱溫：40℃；檢測(cè)波長(zhǎng)：220nm；進(jìn)樣量：10μL。 理論塔板數(shù)按天麻素峰計(jì)算應(yīng)不低于5 000。

3.3 專屬性試驗(yàn)

分別精密吸取供試品溶液、對(duì)照品溶液、陰性樣品溶液各10μL，注入液相色譜儀中，在天麻素對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，供試品溶液具有相同保留時(shí)間的色譜峰，陰性液在此峰位無吸收，對(duì)本品中天麻素含量測(cè)定無干擾。見圖3。

圖2 羌活、當(dāng)歸、獨(dú)活薄層鑒別

圖3 加味天麻膠囊高效液相色譜

3.4 線性關(guān)系考察

精密吸取濃度為50.3μg·mL-1的對(duì)照品溶液1、5、8、10、15、20μL，分別注入液相色譜器儀中，按上述色譜條件測(cè)定峰面積值。計(jì)算回歸方程，天麻素回歸方程為：Y=113 508 264X-40 825，r=0.999 7，天麻素進(jìn)樣量在5.03～100.6μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

3.5 精密度試驗(yàn)

精密吸取供試品(批號(hào)201301004)溶液10μL，注入液相色譜儀中，連續(xù)進(jìn)樣6次，分別測(cè)定各次峰面積，天麻素峰面積的RSD為0.76%。

3.6 穩(wěn)定性試驗(yàn)

取供試品(批號(hào)201301004)溶液，分別在0，4，6，8，12，24h，進(jìn)樣10μL，測(cè)定色譜峰面積，結(jié)果天麻素峰面積的RSD為0.29%。表明樣品溶液在所考察時(shí)間內(nèi)穩(wěn)定性良好。

3.7 重現(xiàn)性試驗(yàn)

取同一批供試品(批號(hào)201301004)，精密稱取6份，按供試品測(cè)定項(xiàng)下方法操作，重復(fù)測(cè)定6次，測(cè)得天麻素平均含量為0.546 1mg·g-1，RSD為0.42 %。表明該方法重現(xiàn)性好。

3.8 加樣回收率試驗(yàn)

取已知天麻素含量(批號(hào)201301004，天麻素含量0.546 1mg·g-1)供試品9份，每份1g，分別精密加入濃度為50.3μg·mL-1的天麻素對(duì)照品溶液8.0、8.0、8.0、10.0、10.0、10.0、12.0、12.0、12.0mL，按供試品溶液制備方法操作，測(cè)定加標(biāo)樣品中天麻素含量，計(jì)算回收率，結(jié)果見表1。

表1 回收試驗(yàn)結(jié)果 (n=9)

3.9 樣品含量測(cè)定

取不同批號(hào)的樣品，按供試品測(cè)定項(xiàng)下方法操作，測(cè)定天麻素含量，結(jié)果見表2。

表2 樣品含量測(cè)定結(jié)果 (n=3)

4 結(jié)論

本試驗(yàn)建立的含量測(cè)定方法具有簡(jiǎn)便、靈敏、準(zhǔn)確且專屬性較強(qiáng)的優(yōu)點(diǎn)，可有效控制加味天麻膠囊的產(chǎn)品質(zhì)量，具有一定的實(shí)際意義。

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(責(zé)任編輯：宋勇剛)

Study on Quality Standard of Jiaweitianma Capsules

Wu Rong

(Institure for Food and Drug Control of XuPu，Hunan 419300,China)

Objective:To establish the quality control standards for Jiaweitianma Capsules. Methods:TLC of Notopterygium, Angelica sinensis，Angelica qualitative identifiction. Determination of gastrodin in Jiaweitianma Capsules. Epimed iun by HPLC. Column is Column C18(250mm×4.6mm，5μm) and amix ture of Acetonitrile of 0.05% phosphoric acid solution (3：97) as them obile phase.Flow: 1.0mL·min-1；Column : 40℃ ;The detection w ave leng th was a t 220 nm. Results:Accurately Astragalus Qualitative in were identified.A linear relationship of Icariin was good within 5.03 ～100.6μg (r=0.999 7). The averag e recove ry w as 98.78% with RSD 0.74% (n=6).Conclusion:The method is simple， accurate， reproducible and can be used for the quality contro l of Jiaweitianma Capsules.

Jiaweitianma Capsules.; Quality Standards; TLC; HPLC; Gastrodin

2014-04-18

伍蓉(1976-)，女，湖南省溆浦縣食品藥品監(jiān)督局主管藥師，研究方向?yàn)樗幬锓治觥?/p>

R284.2

A

1673-2197(2014)15-0012-03