滇楊組培苗的移栽技術(shù)研究

辛培堯 ，劉 巖 ，李根前 ，周 軍 ，唐軍榮 ，陳 杰 ，何承忠

(1.西南林業(yè)大學(xué) 西南山地森林資源保育與利用省部共建教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，云南 昆明 650224，2. 西南林業(yè)大學(xué) 國(guó)家林業(yè)局西南地區(qū)生物多樣性保育重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，云南 昆明 650224)

滇楊組培苗的移栽技術(shù)研究

辛培堯1,2，劉 巖2，李根前1，周 軍1,2，唐軍榮2，陳 杰2，何承忠1,2

(1.西南林業(yè)大學(xué) 西南山地森林資源保育與利用省部共建教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，云南 昆明 650224，2. 西南林業(yè)大學(xué) 國(guó)家林業(yè)局西南地區(qū)生物多樣性保育重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，云南 昆明 650224)

對(duì)滇楊組培苗移栽過(guò)程中的幾個(gè)技術(shù)環(huán)節(jié)進(jìn)行探討。結(jié)果表明：組培苗進(jìn)行移栽前預(yù)處理后再移入煉苗基質(zhì)，可明顯提高其成活率；煉苗基質(zhì)采用化學(xué)滅茵或高溫滅茵均可顯著提高移栽成活率；7種煉苗基質(zhì)中，以河沙∶腐質(zhì)土∶蛭石=1∶1∶1組成的基質(zhì)為最佳。

滇楊；組培苗；移栽；煉苗基質(zhì)

滇楊Populus yunnanensis Dode 屬楊柳科楊屬青楊派樹(shù)種，喬木，高20 m，產(chǎn)于云南、貴州和四川，生于海拔1 300 ～ 3 200 m的山地。較耐濕熱，適應(yīng)性較強(qiáng)，生長(zhǎng)較快，成材較早，而且易于繁殖等優(yōu)點(diǎn)，也是我國(guó)西南地區(qū)特有的一種鄉(xiāng)土樹(shù)種，是全國(guó)乃至世界少有的分布于低緯度高海拔地區(qū)的寶貴楊樹(shù)資源[1-2]。由于滇楊主要分布區(qū)植物種類(lèi)繁多，加上研究者對(duì)其認(rèn)識(shí)程度的不同，導(dǎo)致對(duì)滇楊的系統(tǒng)研究工作未能得到足夠的重視[3]。近年來(lái)，隨著滇楊離體培養(yǎng)技術(shù)的不斷完善，使得利用組織培養(yǎng)技術(shù)對(duì)滇楊進(jìn)行種質(zhì)資源保存及遺傳改良成為現(xiàn)實(shí)[4-,5]。植物組織培養(yǎng)中的煉苗階段是該技術(shù)中較為關(guān)鍵的一環(huán)，它直接關(guān)系到組培苗能否盡快地應(yīng)用到生產(chǎn)中去，即組培苗能否有高的移栽成活率。組培苗的移栽過(guò)程較為復(fù)雜，在未掌握其有關(guān)理論和技術(shù)時(shí)，盲目移栽或稍有不慎，就會(huì)造成大批組培苗死亡，而導(dǎo)致前功盡棄。因此，對(duì)滇楊組培苗的移栽煉苗技術(shù)進(jìn)行研究，從而建立高效而穩(wěn)定的移栽煉苗體系，不論是對(duì)滇楊基礎(chǔ)理論研究，還是應(yīng)用生產(chǎn)研究均具有十分重要的指導(dǎo)意義。

1 材料與方法

1.1 材料

以滇楊離體培養(yǎng)中生根培養(yǎng)階段所得的生根試管苗為試驗(yàn)材料。

1.2 方法

1.2.1 煉苗前預(yù)處理

移栽前進(jìn)行一定天數(shù)的煉苗處理往往會(huì)影響移栽成活率，為此，設(shè)計(jì)了如下4種不同的煉苗前預(yù)處理(見(jiàn)表1)。

表1 煉苗前預(yù)處理方法Table 1 Pre-treatment methods before transplanting

每組處理40株，重復(fù)3次，處理期間應(yīng)注意保持瓶?jī)?nèi)濕度，防止組培苗萎蔫死亡。處理結(jié)束后，移栽入經(jīng)高壓蒸氣滅菌后的河沙中，一個(gè)月后統(tǒng)計(jì)其成活率。

1.2.2 基質(zhì)的滅菌方法

為了探討基質(zhì)滅菌方法對(duì)組培苗移栽成活率的影響，本實(shí)驗(yàn)以河沙為基質(zhì)，設(shè)計(jì)了兩種基質(zhì)滅菌方法(見(jiàn)表2)。

表2 基質(zhì)滅菌方法Table 2 Sterilization methods for transplanting medium

每組處理移栽30株，重復(fù)3次，移栽一個(gè)月后統(tǒng)計(jì)其成活率。

1.2.3 基質(zhì)的篩選試驗(yàn)

試驗(yàn)利用紅土、河沙、珍珠巖、腐質(zhì)土、蛭石，配置了7種不同的基質(zhì)，基質(zhì)配比如下:(1)河沙；(2)河沙∶腐質(zhì)土=1∶1；(3)河沙∶腐質(zhì)土∶蛭石=1∶1∶1；(4)珍珠巖；(5)珍珠巖∶腐質(zhì)土=1∶1；(6)紅土；(7)紅土∶腐質(zhì)土=1∶1。

分別將組培生根試管苗移栽到上述基質(zhì)中。每組移栽30株，重復(fù)3次，移栽一個(gè)月后統(tǒng)計(jì)其成活率。移栽完畢后進(jìn)行日常管理，每隔15天統(tǒng)計(jì)一次死亡率，兩個(gè)月后測(cè)量滇楊幼苗的成活率、苗高、地徑，觀察苗長(zhǎng)勢(shì)，并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

1.3 數(shù)據(jù)處理

所有數(shù)據(jù)均在SPSS15.0軟件下進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同煉苗前預(yù)處理對(duì)移栽成活率的影響

圖1為不同煉苗前預(yù)處理對(duì)移栽成活率的影響比較。圖1顯示，組培苗移栽成活率的高低順序?yàn)椋禾幚?＞處理2 ＞處理1＞處理4。將組培苗放在普通實(shí)驗(yàn)室閉瓶煉苗3天再打開(kāi)瓶蓋進(jìn)行煉苗2天，這種處理效果最佳，組培苗成活率為93.3%，這種處理使組培苗在無(wú)菌條件下基本適應(yīng)了自然光照，繼而在有菌的開(kāi)放條件下適應(yīng)自然條件，是一個(gè)逐步適應(yīng)的過(guò)程，因而移栽成活率較高。其他處理因?yàn)樽兓容^大，因此移栽成活率相對(duì)較低。

圖1 不同煉苗前預(yù)處理對(duì)生根苗移栽成活率的影響Fig. 1 Effects of different pretreatment methods on transplanting survival rate of rooting seedlings

2.2 不同基質(zhì)滅菌方法對(duì)移栽成活率的影響

圖2表明：兩種滅菌后基質(zhì)上移栽的組培苗成活率差別不明顯(分別為91.5%和93.2%)，且均高于對(duì)照(70%)，說(shuō)明：基質(zhì)滅菌是提高組培苗煉苗成活率的有效方法。使用任何一種滅菌方法都是行之有效的，可視具體試驗(yàn)條件靈活應(yīng)用。

圖2 不同基質(zhì)滅菌方法對(duì)生根苗移栽成活率的影響Fig. 2 The effect on transplanting survival rate of rootings eedlings with different sterilization methods

2.3 不同基質(zhì)對(duì)組培苗移栽成活率的影響

方差分析結(jié)果(見(jiàn)表3)表明，不同基質(zhì)對(duì)滇楊組培苗成活率存在一定差異，有的基質(zhì)間差異達(dá)極顯著水平。據(jù)此，可以把基質(zhì)分為3類(lèi)：組培苗成活率最好的是2號(hào)和3號(hào)基質(zhì)，1號(hào)、5號(hào)和7號(hào)基質(zhì)生長(zhǎng)情況較次，生長(zhǎng)較差的有4號(hào)和6號(hào)基質(zhì)。而2號(hào)與3號(hào)基質(zhì)在1%和5%水平上均無(wú)顯著差異，由此可見(jiàn)，就滇楊組培苗的成活率來(lái)看，可篩選出2號(hào)和3號(hào)基質(zhì)為較佳移栽基質(zhì)。表3還顯示，不同基質(zhì)處理在組培苗的平均高生長(zhǎng)方面差異顯著，個(gè)別組間差異達(dá)極顯著水平。其中，2號(hào)、3號(hào)和7號(hào)基質(zhì)上幼苗生長(zhǎng)較高，且在1%和5%水平上均無(wú)顯著差異。而高生長(zhǎng)較差的是1號(hào)、4號(hào)和6號(hào)基質(zhì)、5號(hào)基質(zhì)表現(xiàn)一般。因此，以滇楊組培苗的在不同基質(zhì)上移栽高生長(zhǎng)而言， 2號(hào)、3號(hào)7號(hào)基質(zhì)為滇楊生根組培苗的較佳基質(zhì)。不同基質(zhì)在組培苗的平均地徑生長(zhǎng)方面也存在顯著差異，個(gè)別組間差異達(dá)極顯著水平。3號(hào)及7號(hào)基質(zhì)中，幼苗地徑生長(zhǎng)較好。表現(xiàn)較差的是1號(hào)、4號(hào)及6號(hào)。由此可見(jiàn)，以滇楊組培苗的在不同基質(zhì)上移栽地徑生長(zhǎng)情況為標(biāo)準(zhǔn) ，可篩選出3號(hào)和7號(hào)基質(zhì)為較佳煉苗基質(zhì)。另外，發(fā)析幼苗在不同基質(zhì)上的生長(zhǎng)狀況，3號(hào)葉片顏色深綠色，2號(hào)、5號(hào)和7號(hào)葉片為綠色，1號(hào)、4號(hào)及6號(hào)為黃綠色。綜合上述分析，我們可以看出滇楊組培生根苗在3號(hào)基質(zhì)上生長(zhǎng)最佳，所以，3號(hào)練苗基質(zhì)在7種練苗基質(zhì)是最佳的，其次是2號(hào)和7號(hào)基質(zhì)，6號(hào)基質(zhì)較差。即以河沙∶腐質(zhì)土∶蛭石=1∶1∶1組成的基質(zhì)為滇楊組培生根苗的最佳移栽煉苗基質(zhì)。

表3 不同基質(zhì)對(duì)組培苗移栽成活率及生長(zhǎng)的影響?Table 3 Effects of different transplanting mediums on survival rate and growth status of plantlets

3 討論

3.1 組培苗出瓶前預(yù)處理

滇楊組培生根苗在出瓶前將其置于有自然光照的普通室內(nèi)，進(jìn)行過(guò)渡煉苗，在出瓶前2-3天，打開(kāi)瓶蓋，讓瓶苗逐步適應(yīng)外界的光照和濕度，以增強(qiáng)組培苗對(duì)環(huán)境的適應(yīng)能力，可以提高組培苗移栽成活率。這與刁桂萍[6]、梁德軍等[7]、吳立秋等[8]、烏麗雅斯[9]和馮謙等[10]在不同的楊樹(shù)離體快繁研究中所得的結(jié)論相一致，但不同楊樹(shù)其過(guò)渡煉苗所需的時(shí)間不盡相同。

3.2 組培苗移栽基質(zhì)篩選

在環(huán)境適宜的條件下，煉苗基質(zhì)的理化性質(zhì)對(duì)組培苗的移栽成活率有著很大的影響，其中基質(zhì)的透氣性、保濕性、酸堿度和養(yǎng)分等因子對(duì)誘發(fā)新根及成活起關(guān)鍵作用[11]。試驗(yàn)表明，把滇楊組培苗移栽入沙∶腐質(zhì)土∶蛭石=1∶1∶1中成活率最高，且苗長(zhǎng)勢(shì)最好。另外，試驗(yàn)中還發(fā)現(xiàn)，復(fù)合基質(zhì)比單一基質(zhì)中幼苗的成活率均高，何承忠等[12]在對(duì)馬纓杜鵑組培苗移栽基質(zhì)的篩選研究表明：疏松、透氣性好的基質(zhì)有利于組培苗成活和生長(zhǎng)，復(fù)合基質(zhì)比單一基質(zhì)要好，這與本研究一致；而矮化石楠組培苗移栽基質(zhì)的篩選試驗(yàn)表明，單一基(河沙、蛭石或及珍珠巖)比復(fù)合基質(zhì)(加入腐質(zhì)土)好[13]?？梢?jiàn)，不同植物對(duì)基質(zhì)的要求存在一定的差異，因此在篩選煉苗基質(zhì)時(shí)，應(yīng)參考具體植物對(duì)土壤的質(zhì)地的偏好，來(lái)設(shè)計(jì)煉苗基質(zhì)。

[1] 祁承經(jīng)，湯庚國(guó)．樹(shù)木學(xué)(南方本)［M］．北京：中國(guó)林業(yè)出版社，1994：208-209．

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Study on transplanting techniques of tissue culture seedlings of Populus yunnanensis

XIN Pei-yao1,2, LIU Yan2, LI Gen-qian1, ZHOU Jun1,2, TANG Jun-rong2, CHEN Jie2, HE Cheng-zhong1,2
(1.Key Lab. for Forest Resources Conservation and Use in Southwest Mountains of China, Ministry of Educatoin, Southwest Forestry University, Kunming 650224, Yunnan, China；2. Key Lab. of Biodiversity Conservation in Southwest China, State Forestry Administration, Southwest Forestry University, Kunming 650224 , Yunnan, China)

Technical links of tissue culture seedlings of Populus yunnanensis in transplanting process were investigated. The results show that the survival rate of transplanted tissue culture seedlings was evidently increased after the seedlings were pre-treatmented before transplanting; Both chemical sterilization and high temperature sterilization of seedling’s medium were effective methods for raising the survival rate of transplanted tissue culture seedlings. The medium miхed with humus, fine sand and vermiculite (the radio was 1∶1∶1)was the best suitable medium of 7 mediums of Populus yunnanensis seedling.

Populus yunnanensis Dode; tissue culture seedlings; transplant; seedling adaptation medium

S723.3

A

1673-923X(2012)02-0023-04

2011-10-24

國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(30960320)資助；云南省應(yīng)用基礎(chǔ)研究基金項(xiàng)目(2009CD071)資助；西南林業(yè)大學(xué)森林培育學(xué)云南省重點(diǎn)學(xué)科(XKZ200906)資助；西南林業(yè)大學(xué)重點(diǎn)學(xué)科(XKX200904)資助

辛培堯(1975 —)，男，博士，副教授,主要從事植物遺傳育種方面的教學(xué)與研究;E-mail：хpylt@yahoo.cn

何承忠(1970 —)，男，博士，教授，從事植物遺傳改良及分子生物學(xué)方面的教學(xué)與研究工作; E-mail：hcz70@163.com

[本文編校：羅 列]