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    發(fā)酵型茶醋生產(chǎn)工藝研究

    2012-12-24 07:25:06李立祥
    茶業(yè)通報(bào) 2012年2期
    關(guān)鍵詞:酒精度酸度醋酸

    張 芳,李立祥,陶 濤,李 惠

    (安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)茶葉生物化學(xué)與生物技術(shù)教育部、農(nóng)業(yè)部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,合肥230036)

    早在《神農(nóng)本草經(jīng)》中就記載了久服茶葉能“安心、益氣、輕身耐老”。茶葉中富含茶多酚、生物堿、多糖、茶氨酸[1]等化合物,對(duì)人體保健起著相當(dāng)大的作用。茶葉不僅具有解渴、清熱、明目、去膩減肥、解毒醒酒、延年益壽等功能[2],還對(duì)現(xiàn)代疾病,如心腦血管病[3]、癌癥[4,5]、輻射病[6]等相關(guān)疾病,有一定的藥理作用。

    果醋,被譽(yù)為“第四代飲料”,既保留了醋的功能,又具有果汁的特點(diǎn),酸甜可口,極大改善了醋的口感。果醋作為一種新興飲料,以其天然、健康、營(yíng)養(yǎng)等優(yōu)勢(shì)已在市場(chǎng)上贏得一席之地。

    迄今為止,關(guān)于茶醋生產(chǎn)工藝方面的文獻(xiàn)報(bào)道不多。目前茶醋的研制主要是通過(guò)添加食用酒精和醋酸菌進(jìn)行發(fā)酵或者直接將茶葉和食醋混合配制而成。如廖湘萍[7]等通過(guò)添加茶葉和食用酒精,以醋酸菌為菌種進(jìn)行發(fā)酵得到保健型食醋;成劍峰[8]利用茶葉和大麥為原料,醋酸發(fā)酵生產(chǎn)茶醋飲品;王朝卿[9]將茶葉浸泡后與陳醋、蜂蜜等混合調(diào)配成茶醋飲料;張學(xué)良[10]等以桑椹醋、綠茶、冰糖和檸檬酸為原料,研制綠茶桑椹醋飲料,并對(duì)該飲料的減肥功能進(jìn)行研究。然而關(guān)于將茶葉與水果混合,利用醋酸發(fā)酵生產(chǎn)保健茶醋的文獻(xiàn)報(bào)道還沒(méi)有。因此本文將茶葉通過(guò)浸提得到的茶湯與蘋(píng)果汁混合,接種醋酸菌進(jìn)行醋酸發(fā)酵釀造蘋(píng)果茶醋,試制開(kāi)發(fā)一種保健型的茶醋,能保留果醋和茶葉特點(diǎn),旨在為新型發(fā)酵茶醋開(kāi)發(fā)提供依據(jù)。

    1 材料和方法

    1.1 原料及試劑

    蘋(píng)果(煙臺(tái)紅富士):市售;茶葉(炒青):市售;菌種:安琪葡萄酒用高活性干酵母(安琪酵母有限公司);醋酸菌:滬釀1.01醋酸菌(上海迪發(fā)生物公司);葡萄糖、碳酸鈣、檸檬酸、偏重亞硫酸鉀、3,5-二硝基水楊酸、氫氧化鈉、硫酸亞鐵、酒石酸鉀鈉等均為分析純;果膠酶、白砂糖均為食品級(jí);瓊脂(生化試劑):天津市福晨化學(xué)試劑廠(chǎng);酵母膏(生化試劑):北京奧博星生物技術(shù)有限公司。

    1.2 主要儀器設(shè)備

    手持折光計(jì)(上海測(cè)維光電技術(shù)有限公司);附溫比重瓶(上海信誼儀器廠(chǎng));PB-10酸度計(jì)(Sartorius公司);UV-2102C型紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)(尤尼柯(上海)儀器有限公司);SPX-150C型恒溫培養(yǎng)箱(上海博訊實(shí)業(yè)有限公司);無(wú)菌操作臺(tái)(上海三發(fā)科學(xué)儀器有限公司);榨汁機(jī)(蘇泊爾股份有限公司);電子恒溫水浴鍋(上海申生科技有限公司);HQL150C型恒溫?fù)u床(武漢中科科儀技術(shù)發(fā)展有限公司)。

    1.3 試驗(yàn)方法

    1.3.1 茶醋生產(chǎn)工藝流程

    1.3.2 指標(biāo)方法測(cè)定

    總糖:手持折光儀[11];還原糖測(cè)定:3,5-二硝基水楊酸比色法(DNS 法)[12];酒精度:密度瓶法[13];總酸:酸堿滴定法(以醋酸計(jì))[13];總酚含量:酒石酸亞鐵比色法[14]。

    1.3.3 醋酸發(fā)酵過(guò)程的研究

    1.3.3.1 茶酒制備

    茶葉研磨粉碎,過(guò)60目篩,采用微波結(jié)合水浴的方法提取,微波處理2次,每次3min,再用50℃水浴浸提1次10min[15]。茶多酚浸出率達(dá)90%以上。

    取蘋(píng)果,清洗干凈,除殘果去核,榨汁與茶湯按3∶1混合[15],接種3%安琪葡萄酒用高活性干酵母,20℃靜置發(fā)酵,備用。測(cè)定初始酸度、酒度、總酚含量。

    1.3.3.2 影響醋酸發(fā)酵的單因素實(shí)驗(yàn)

    在保持其他因素相同的條件下,分別考察不同溫度、初始酒精度、接種量、發(fā)酵時(shí)間對(duì)醋酸發(fā)酵的影響,為正交法優(yōu)化發(fā)酵工藝提供有意義的取值范圍。

    溫度設(shè)計(jì)為 25℃,28℃,31℃,34℃,37℃,在接種量8%,初始酒精度6%的條件下發(fā)酵10d,測(cè)定發(fā)酵終止后的酸度,考察不同溫度對(duì)醋酸發(fā)酵的影響。

    初始酒精度設(shè)計(jì)為4%,5%,6%,7%,8%,理論上,1%的酒精產(chǎn)生1%的酸,1%的酸需要2%的糖發(fā)酵得到。因此將初始糖度設(shè)為8%,10%,12%,14%,16%。酒精發(fā)酵結(jié)束后測(cè)定酒精度。根據(jù)初始酒精度設(shè)計(jì),利用1.3.3.1發(fā)酵好的酒精含量高的茶酒與酒精含量低的茶酒進(jìn)行勾兌,得到所需的初始酒精度后,在溫度31℃,接種量8%條件下發(fā)酵10d,測(cè)定發(fā)酵終止后的酸度,考察不同初始酒精度對(duì)醋酸發(fā)酵的影響。

    接種量設(shè)計(jì)為2%,5%,8%,11%,14%,在溫度31℃,初始酒精度6%條件下發(fā)酵10d,測(cè)定發(fā)酵終止后的酸度,考察不同接種量對(duì)醋酸發(fā)酵的影響。

    發(fā)酵天數(shù)設(shè)計(jì)為 4d,6d,8d,10d,12d 在溫度31℃,接種量8%,初始酒精度6%條件下發(fā)酵,測(cè)定發(fā)酵終止后的酸度,考察不同發(fā)酵時(shí)間對(duì)醋酸發(fā)酵的影響。

    1.3.3.3 醋酸發(fā)酵條件的優(yōu)化

    在單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上,設(shè)計(jì)正交試驗(yàn)L16(45),以最終達(dá)到的酸度為指標(biāo),研究溫度、接種量、初始酒度、發(fā)酵時(shí)間對(duì)醋酸發(fā)酵的影響。找出對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果影響顯著的因素,為確定最佳醋酸發(fā)酵條件提供依據(jù)。

    表1 優(yōu)化醋酸發(fā)酵工藝條件的正交試驗(yàn)因素與水平

    2 結(jié)果與分析

    2.1 溫度對(duì)醋酸發(fā)酵的影響

    圖1 溫度對(duì)醋酸發(fā)酵的影響

    如圖1所示,25℃時(shí)醋酸發(fā)酵較為緩慢,產(chǎn)酸量不高;37℃時(shí)發(fā)酵很快,在第6天趨于平穩(wěn),但產(chǎn)酸量較低,這可能是由于溫度過(guò)高,使得醋酸菌提前老化。因此,醋酸發(fā)酵的適宜范圍是28℃~34℃。

    2.2 初始酒度對(duì)醋酸發(fā)酵的影響

    如圖2所示,初始酒度為4%時(shí),起始發(fā)酵速度快,但最終酸度過(guò)低,影響品質(zhì)。初始酒度在5%~8%時(shí)發(fā)酵比較平穩(wěn)且最終酸度隨著初始酒精度的增加而增加。已有資料[16-18]表明,初始酒度高于10%以上,高酒精濃度會(huì)抑制醋酸菌的生長(zhǎng),不利于醋酸發(fā)酵的進(jìn)行。因此,本文醋酸發(fā)酵的適宜初始酒度為5%~8%。

    圖2 初始酒度對(duì)醋酸發(fā)酵的影響

    2.3 接種量對(duì)醋酸發(fā)酵的影響

    圖3 接種量對(duì)醋酸發(fā)酵的影響

    如圖3所示,醋酸菌接種量在2%時(shí),發(fā)酵較慢且不徹底,最終酸度不高。接種量為5%~14%時(shí)差別不大,但接種量為5%時(shí)發(fā)酵相對(duì)緩慢。因此醋酸發(fā)酵的適宜接種量為5%~14%。

    2.4 發(fā)酵時(shí)間對(duì)醋酸發(fā)酵的影響

    圖4 時(shí)間對(duì)醋酸發(fā)酵的影響

    如圖4所示,發(fā)酵前期(1d~2d)酸度上升緩慢,這是由于醋酸菌處于適應(yīng)及增殖期,產(chǎn)酸量低;發(fā)酵中期(4d~10d)由于醋酸菌活力提高,發(fā)酵速度加快。發(fā)酵第10d,產(chǎn)酸達(dá)到最大值;發(fā)酵后期(10d~12d)醋酸菌活力減弱,酸度趨于一個(gè)穩(wěn)定值,發(fā)酵基本結(jié)束。由此可知,醋酸發(fā)酵的最佳時(shí)間是10d。

    2.5 醋酸發(fā)酵條件的優(yōu)化

    在單因素實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上,按照表1設(shè)計(jì)的正交試驗(yàn)對(duì)醋酸發(fā)酵過(guò)程中的發(fā)酵溫度、初始酒度、接種量及發(fā)酵時(shí)間等工藝參數(shù)進(jìn)行優(yōu)化。正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表2,方差分析見(jiàn)表3。

    表2 優(yōu)化醋酸發(fā)酵工藝條件的正交試驗(yàn)結(jié)果

    如表2所示,由極差分析得出影響醋酸發(fā)酵的最大因素為初始酒度B(R=12.15),其次為發(fā)酵時(shí)間D(R=10.43),接種量 C(R=4.3),溫度 A(R=3.75)。由此得知醋酸發(fā)酵最佳工藝參數(shù)為溫度34℃,接種量7%,初始酒度8%,發(fā)酵時(shí)間為10d。

    為了進(jìn)一步驗(yàn)證以上結(jié)果,做出方差分析,如表3所示,由于E因素為空列,作為誤差項(xiàng)計(jì)算。從結(jié)果中可以看出,B因素(初始酒度)和D因素(發(fā)酵時(shí)間)達(dá)極顯著水平,C因素(接種量)為顯著水平。因此,初始酒度和發(fā)酵時(shí)間是影響醋酸發(fā)酵的主要因素,所以生產(chǎn)中應(yīng)重點(diǎn)控制;同時(shí)接種量也是要考慮的因素,應(yīng)結(jié)合實(shí)際情況確定其添加量。

    表3 醋酸發(fā)酵正交試驗(yàn)結(jié)果的方差分析

    2.6 驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)

    按照正交實(shí)驗(yàn)得出的最佳工藝條件進(jìn)行3次平行驗(yàn)證實(shí)驗(yàn),結(jié)果表明,在最佳條件下發(fā)酵的茶醋,酸度平均達(dá)到62.7g/L,總酚含量為0.75g/L。

    2.7 質(zhì)量指標(biāo)

    2.7.1 感官指標(biāo)[19-22]

    發(fā)酵完的茶醋經(jīng)陳釀后,澄清透亮,色澤淡黃,醋香濃郁,稍有茶香和果香,口感醇厚、平衡,具發(fā)酵特有風(fēng)味。

    2.7.2 理化指標(biāo)

    總糖(可溶性固形物含量)≥4%;總酸(以醋酸計(jì))62.7g/L;還原糖(以葡萄糖計(jì))≥10g/L;總酚0.75g/L。

    2.7.3 微生物指標(biāo)[23]

    經(jīng)檢驗(yàn),細(xì)菌總數(shù)≤100cfu/mL;大腸桿菌≤3 cfu/mL;致病菌:未檢出。

    3 結(jié)論

    (1)本文以茶葉和蘋(píng)果為原料,接種醋酸菌進(jìn)行醋酸發(fā)酵,開(kāi)發(fā)了一種新型發(fā)酵茶醋產(chǎn)品。通過(guò)單因素及正交實(shí)驗(yàn)得到發(fā)酵型茶醋最佳工藝參數(shù)為:溫度34℃,醋酸菌接種量7%,初始酒度8%,發(fā)酵時(shí)間為10d。經(jīng)過(guò)驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)得到的茶醋最終酸度達(dá)到62.7g/L,總酚含量為0.75g/L。

    (2)發(fā)酵得到的茶醋經(jīng)過(guò)陳釀后澄清透亮,色澤金黃,醋味濃郁,稍有果香和茶香,酸味柔和,口感醇厚。

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