美國貝克曼庫爾特LH750血細(xì)胞分析儀WBC分類原理及一例典型故障分析

【作 者】徐彬鋒，胡亞榮，劉虔鋮，宗健康

1 廣東食品藥品職業(yè)學(xué)院醫(yī)療器械系，廣東，廣州，510520

2 廣州凱農(nóng)儀器有限公司，廣東，廣州，510075

LH750型血細(xì)胞分析儀是由美國貝克曼庫爾特公司生產(chǎn)的一種高檔五分類全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀。該儀器運(yùn)用VCS[V(電阻抗)、C(高頻傳導(dǎo))、S(激光散射)]專利技術(shù)，對白細(xì)胞進(jìn)行精確的分類及三維分析，能提供31項(xiàng)細(xì)胞分析參數(shù)，白細(xì)胞分類散點(diǎn)圖，以及各種懷疑性、限定性旗標(biāo)，分析速度達(dá)到110 /h。

1 WBC分類原理

1.1 分類試劑

首先在標(biāo)本內(nèi)加入溶血?jiǎng)〦-LYSE，使紅細(xì)胞膨脹到破裂并被溶解掉；然后再加入穩(wěn)定劑S-LYSE，使白細(xì)胞表面、胞漿及細(xì)胞大小恢復(fù)到之前的原始狀態(tài)。

1.2 VCS技術(shù)

運(yùn)用V、C、S三種探針，在流式通道的某一位點(diǎn)，對通過的單列白細(xì)胞進(jìn)行逐個(gè)的、同時(shí)的、三重的檢測，以及三維分析，以確定其亞群性質(zhì)，如圖1所示。

圖1 VCS分析圖譜

圖2 體積檢測圖譜

體積檢測探針V，運(yùn)用檢測細(xì)胞的電阻抗從而獲得細(xì)胞的體積，如圖2所示。

細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)檢測探針C，運(yùn)用細(xì)胞的高頻特性，檢測其內(nèi)部結(jié)構(gòu)，從而獲得細(xì)胞核的復(fù)雜程度的信息，并區(qū)分分葉核和非分葉核細(xì)胞；如圖3所示：

細(xì)胞顆粒特性檢測探針S，運(yùn)用一個(gè)10o～70o寬角度的范圍，測量細(xì)胞的散射特性，以區(qū)分淋巴細(xì)胞、中性粒細(xì)胞和嗜酸細(xì)胞，如圖4所示。

圖3 細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)檢測圖譜

圖4 細(xì)胞顆粒特性檢測圖譜

三維分析技術(shù)是將檢測的8192個(gè)細(xì)胞定位在以V、C、S三維檢測的坐標(biāo)中，可以將白細(xì)胞五個(gè)亞群進(jìn)行分類，如圖5所示。

圖5 白細(xì)胞五分類三維圖

2 WBC分類故障一例

故障現(xiàn)象（如圖6所示），WBC分類圖形散亂，但無PC1和PC2報(bào)警信息，右圖的計(jì)數(shù)“已顯示”顆粒只有448個(gè)遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于8192個(gè)。

圖6 WBC出現(xiàn)分類故障

原因分析 在做標(biāo)本期間，取少量樣品檢測，觀察LH750儀器上的小顯示屏，當(dāng)出現(xiàn)VCS脈沖時(shí)，V和C的脈沖基線很高，有可能是化學(xué)不平衡導(dǎo)致，即溶血?jiǎng)〦-LYSE和穩(wěn)定劑S-LYSE的加入量比例不正確。然后觀察這兩個(gè)試劑的加樣泵，發(fā)現(xiàn)S-LYSE試劑泵頂端有大量氣泡，判斷可能是泵本身漏氣或上方的三通電磁閥閉合不嚴(yán)所致。

故障處理 更換三通電磁閥后氣泡依舊，說明泵漏氣，拆開S-LYSE試劑泵，進(jìn)行重新密封后，明顯大量氣泡消失，但偶爾管壁會(huì)粘附微小氣泡，根據(jù)經(jīng)驗(yàn)判斷，屬于正?，F(xiàn)象。然后做標(biāo)本W(wǎng)BC分類，圖形明顯好轉(zhuǎn)，但計(jì)數(shù)“已顯示”顆粒數(shù)最高只有5500個(gè)，仍未達(dá)到要求。調(diào)節(jié)S-LYSE試劑泵的加樣量，最終使“已顯示”顆粒數(shù)達(dá)到8000以上，且WBC分類圖形也達(dá)到了預(yù)期效果，如圖7所示。

圖7 故障排除后WBC分類結(jié)果

[1]劉國先.庫爾特全自動(dòng)血球計(jì)數(shù)儀排除故障2例[J].醫(yī)療設(shè)備信息,2003,18(12):42.

[2]胡柏成,吳曉虹,戴群瑩.庫爾特HMX全自動(dòng)五分類血液細(xì)胞計(jì)數(shù)儀故障分析與處理[J].醫(yī)療設(shè)備信息,2007,22(8): 120-121.

[3]叢玉隆,王淑娟.今日臨床檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)[M],北京,中國科學(xué)技術(shù)出版社,1997