中藥干預(yù)對地震恐懼模型SD大鼠發(fā)育的影響

張先庚 劉琴 張輝 王紅艷 毛羽佳 梁小利 高靜 彭德忠(成都中醫(yī)藥大學(xué)，610075)

自然災(zāi)害對人類的損傷，可以表現(xiàn)在母子兩代。評估和減輕地震災(zāi)害對母子兩代(孕婦及新生兒)的影響已經(jīng)成為一個(gè)迫切而嚴(yán)峻的現(xiàn)實(shí)問題[1]?！澳I在志為恐”、“恐則氣下”等中醫(yī)特色內(nèi)容為研究恐懼情緒對臟腑的損害奠定了理論基礎(chǔ)，而腎為先天之本，主生殖發(fā)育，則為探討恐懼對胎損的研究提供了病機(jī)支持。中醫(yī)在胎教胎損上有獨(dú)特認(rèn)識，從唐代的孫思邈、王燾，到元代的朱丹溪，明代的萬全，再到清代的陳復(fù)正等從孕期有關(guān)行為、攝養(yǎng)、起居、飲食、生活、睡臥等生理心理各個(gè)方面的胎教做了詳細(xì)闡述。為了弘揚(yáng)和發(fā)展中醫(yī)對“胎損”、“胎教”的經(jīng)典理論和豐富的實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)，科學(xué)進(jìn)行胎養(yǎng)胎教[2]，有效地規(guī)避胎損帶來的不利影響，我們設(shè)計(jì)了模擬地震和模擬地震后中藥干預(yù)兩組研究實(shí)驗(yàn)，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 選取初次受孕，體重224.5～260.5 g的SD雌性大鼠8只。

1.1.2 儀器 標(biāo)準(zhǔn)大鼠籠2套(60 cm×60 cm×60 cm)，為塑料邊框，籠底和籠蓋為不銹鋼絲網(wǎng)，籠下有塑料托盤；電子天平一臺；直尺一把，記錄本和筆等。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 實(shí)驗(yàn)分組 將8只受孕母鼠按照隨機(jī)數(shù)字表法隨機(jī)分為兩組：地震模擬胎損組(地震組)，地震模擬胎損后中藥干預(yù)組(中藥組)。兩組孕鼠體重、身長差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

1.2.2 實(shí)驗(yàn)造模 從從孕期第一天開始，將兩組孕鼠放置于標(biāo)準(zhǔn)鼠籠中飼養(yǎng)，地震組每天模擬地震震動(dòng)2～3次，60 min/次。利用地震測速器測定數(shù)據(jù)如下：烈度為9.6～10.5，水平合成峰值加速度：1 000～1 050 mg，垂直向峰值加速度：800～850 mg[3]。中藥組在實(shí)施同樣的震動(dòng)干預(yù)后用注射器灌喂金匱腎氣丸藥液2～3次，用量按照成人千克重用量的10倍進(jìn)行折算[4]。

1.2.3 身長、體質(zhì)量、尾長的測量 子代大鼠出生后第1、5、10、15、20天5個(gè)時(shí)間段分別測量子鼠身長、體重和尾長[5]。用電子天平取體重，以克(g)計(jì)數(shù)。將大鼠平放桌上，背面向上，使身體伸直，用直尺量取鼠頭至鼠尾根部的長度為大鼠的身長，長度單位以厘米(cm)計(jì)算。使尾部伸直，貼于桌面，用直尺量取鼠尾根部至鼠尾尖部的長度為大鼠的尾長，單位以厘米(cm)計(jì)算[6]。

1.2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 使用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。正態(tài)分布資料采用單因素方差分析和多因素方差分析，非正態(tài)分布資料采用卡方檢驗(yàn)和秩和檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 兩組子代鼠Mauchly的球形度檢驗(yàn)(表1)

表1 兩組子代鼠體質(zhì)量、身長、尾長Mauchly的球形度檢驗(yàn)

如表1可見，在對子鼠體重、身長和尾長測量數(shù)據(jù)中Mauchly的球形度檢驗(yàn)W值分別為0.097、0.246、0.162，P值均＜0.05，資料不滿足sphericity假設(shè)，需要自由度進(jìn)行校正，且選取Greenhouse-Geisser2校正，天數(shù)(體重、身長、尾長)以及天數(shù)和尾長的P值均＜0.05，說明時(shí)間因素以及時(shí)間因素和分組的交互作用具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，即體重、身長、尾長隨時(shí)間變化的趨勢隨分組不同而不同[7]。

2.2 兩組子代鼠不同測量時(shí)間段體質(zhì)量比較(表2)

表2 兩組子代鼠在不同時(shí)間段的體質(zhì)量比較()

表2 兩組子代鼠在不同時(shí)間段的體質(zhì)量比較()

時(shí)間(d) 地震組 中藥組n 體質(zhì)量(g) n 體質(zhì)量(g)1 50 5.32±0.62# 44 6.74±0.88*# & 5 33 9.88±1.01* 43 11.11±1.54*# & 10 33 15.48±2.18* 41 18.61±2.17# & 15 32 24.51±3.63* 40 25.71±2.59*20 32 26.75±5.03*# 40 33.59±4.32* &

如表2可見，采用LSD檢驗(yàn)在不同時(shí)間段中藥組的體重皆比地震組大，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。

2.3 兩組子代鼠不同測量時(shí)間點(diǎn)身長比較(表3)

表3 兩組子代鼠在不同時(shí)間段的身長比較()

表3 兩組子代鼠在不同時(shí)間段的身長比較()

時(shí)間(d) 地震組 中藥組n 身長(cm) n 身長(cm)1 50 4.77±0.12# 44 5.12±0.24*# & 5 33 5.88±0.20# 43 5.84±0.30 10 33 6.41±0.38 41 7.03±0.42*# & 15 32 8.23±0.82# 40 8.13±0.43#20 32 8.90±0.77*# 40 9.62±0.50* &

由表3可見，采用LSD檢驗(yàn)子代鼠在出生后中藥組的身長均比地震組長，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。

2.4 兩組子代鼠不同測量時(shí)間點(diǎn)尾長比較(表4) 由表4可見，采用LSD檢驗(yàn)子代鼠在出生后中藥組的尾長均比地震組長，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。

表4 兩組子代鼠在不同時(shí)間點(diǎn)上的尾長比較()

表4 兩組子代鼠在不同時(shí)間點(diǎn)上的尾長比較()

時(shí)間(d) 地震組 中藥組n 尾長(cm) n 尾長(cm)1 50 1.59±0.14 44 1.78±0.12*# & 5 33 2.64±0.16* 43 2.80±0.28 & 10 33 3.93±0.32 41 4.05±0.28*# & 15 32 5.61±0.62*# 40 5.49±0.51*#20 32 6.22±0.36# 40 6.64±0.59 &

3 討論

體重、身長、尾長是反映子鼠生理變化的基本指標(biāo)，可用來評價(jià)子鼠生長發(fā)育的情況[8]。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示體重、身長、尾長隨時(shí)間變化的趨勢隨分組不同而不同，地震模擬后中藥組子鼠的體重、身長、尾長均優(yōu)于地震組。由此可見，母代的地震恐懼影響會(huì)遺傳到子代，并降低子代的體重和身長，延緩子代的生長發(fā)育；金匱腎氣丸可糾正地震恐懼導(dǎo)致的胎損即子鼠發(fā)育遲緩[9]。可推測中藥金匱腎氣丸對地震恐懼孕鼠造成的傷害有較好的治療和預(yù)防作用[10]。至于模擬地震影響如何遺傳給子鼠和中藥金匱腎氣丸對地震恐懼孕鼠的治療和預(yù)防作用機(jī)制則需要從分子遺傳學(xué)角度進(jìn)行深入研究，也是未來研究的重點(diǎn)方向。

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