翟平平,劉友超,姚安慶 (長(zhǎng)江大學(xué)農(nóng)學(xué)院 ,湖北 荊州434025)
小麥赤霉病殺菌劑室內(nèi)篩選試驗(yàn)
翟平平,劉友超,姚安慶 (長(zhǎng)江大學(xué)農(nóng)學(xué)院 ,湖北 荊州434025)
選取己唑醇、戊唑醇、嘧菌酯、醚菌酯和多菌靈5種藥劑,采用生長(zhǎng)速率法進(jìn)行小麥赤霉病殺菌劑的室內(nèi)篩選試驗(yàn)。結(jié)果表明:戊唑醇抑菌效果最好,EC50為0.5153mg/L;其次是多菌靈和己唑醇,EC50分別為1.9641mg/L、2.2094mg/L;嘧菌酯和醚菌酯抑制效果最差,EC50分別為84.71299mg/L、16.81299mg/L。
小麥赤霉病; 生長(zhǎng)速率法;藥劑篩選
赤霉病是小麥生產(chǎn)上的重要病害之一, 在我國(guó)長(zhǎng)江中下游冬麥區(qū)和北春麥區(qū)3年一次中度流行、5年一次大流行。小麥赤霉病不僅造成小麥大幅度減產(chǎn), 而且感病病粒中還含有脫氧腐鐮刀菌醇、雪腐鐮刀菌醇、玉蜀赤霉烯酮等多種毒素。當(dāng)病粒數(shù)超過(guò)10%就可導(dǎo)致家畜中毒,超過(guò)4.7%就失去作為糧食食用價(jià)值和加工價(jià)值。近年來(lái),隨著耕作制度的改革和小麥品種的推廣,小麥赤霉病有蔓延加重的趨勢(shì)[1]。據(jù)報(bào)道,小麥赤霉病菌已對(duì)常用殺菌劑如多菌靈產(chǎn)生抗藥性[2],所以篩選防治赤霉病替代殺菌劑品種,對(duì)于有效防治赤霉病具有重要意義。
1.1 材料
供試禾谷鐮孢菌(FusariumgraminearumSchw)由長(zhǎng)江大學(xué)農(nóng)學(xué)院植物病理實(shí)驗(yàn)室提供。
培養(yǎng)基采用馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基(PDA)。
供試藥劑包括250g/L的戊唑醇水乳劑(永農(nóng)生物科學(xué)有限公司產(chǎn)品)、80%的多菌靈可濕性粉劑(陜西先農(nóng)生物科技有限公司產(chǎn)品)、5%的己唑醇懸浮劑(南京保豐農(nóng)藥有限公司產(chǎn)品)、30%的醚菌酯懸浮劑(山東祥隆化工有限公司產(chǎn)品)、200g/L EC的嘧菌酯乳油(湖南省益陽(yáng)潤(rùn)野化工產(chǎn)品)。
1.2 試驗(yàn)方法
表1 各藥劑濃度梯度
試驗(yàn)采用生長(zhǎng)速率法[3]。上述5種藥劑各設(shè)定5個(gè)濃度梯度(表1),每處理重復(fù)3次,以不加藥劑的空白為對(duì)照。首先將稱量好的各藥劑用無(wú)菌水配制成所需最大濃度的10倍為母液,將母液依次稀釋得到其他10倍濃度的藥液。在超凈工作臺(tái)上將供試藥液3ml加入到27ml經(jīng)滅菌融化的PDA培養(yǎng)基中,再分別倒入3個(gè)滅菌的培養(yǎng)皿中搖勻、冷卻制成平板。以配制多菌靈的最大有效濃度(10.00mg/L)為例,先用無(wú)菌水配制濃度為100.00mg/L的藥液,取3ml 100.00mg/L藥液加入到裝有27ml培養(yǎng)基的錐形瓶中,此時(shí)藥液的有效濃度被稀釋10倍,變?yōu)?0.00mg/L,即實(shí)驗(yàn)所需的有效濃度。
將在PDA培養(yǎng)基上培養(yǎng)的鐮孢菌用0.65cm的打孔器沿菌落邊緣打成菌餅,用無(wú)菌操作法接于PDA平板上(菌絲面貼在培養(yǎng)基上),用保鮮膜將培養(yǎng)皿封口后置于26℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。待培養(yǎng)6d后,用十字交叉法測(cè)得各培養(yǎng)皿中的菌落直徑并分別計(jì)算平均抑菌率。將菌率轉(zhuǎn)換成幾率值,藥劑濃度轉(zhuǎn)換成對(duì)數(shù)值,用EXCEL軟件分別計(jì)算毒力回歸方程及其EC50、EC95值[4]。
抑菌率計(jì)算方法[5]:
D=D1-D2
式中,D:菌落增長(zhǎng)直徑 ;D1:菌落直徑;D2菌餅直徑;I:菌絲生長(zhǎng)抑制率;D0:空白對(duì)照菌落增長(zhǎng)直徑;Dt:藥劑處理菌落增長(zhǎng)直徑。
表2 各藥劑平均抑菌率
將試驗(yàn)所得原始數(shù)據(jù)進(jìn)行抑菌率的計(jì)算,由結(jié)果可知,同種藥劑的不同濃度下的抑菌率差異顯著,并且抑菌率隨著濃度的增加而顯著增加;在同一濃度下不同藥劑的抑菌率差異也較大(表2)。
將各藥劑的平均抑菌率在EXCEL進(jìn)行數(shù)據(jù)分析處理,得到所測(cè)藥劑的毒力回歸方程、EC50、EC95等其他參數(shù)(表3)。由表3可看出,被測(cè)藥劑的EC50值各不相同,相差約164.38倍,表明各藥劑對(duì)赤霉病菌的毒力差異較大。
表3 各藥劑的毒力回歸方程
甾醇類的2種藥劑戊唑醇和己唑醇抑菌活性較好,EC50分別是0.51534mg/L和2.20943mg/L;而甲氧基丙烯酸酯類的2種藥劑醚菌酯和嘧菌酯活性較差,并且此2種藥劑之間的活性差異顯著,EC50分別是16.21899mg/L和84.71299mg/L;作為標(biāo)準(zhǔn)藥劑多菌靈的EC50為1.96414mg/L。
根據(jù)室內(nèi)藥劑的毒力測(cè)定結(jié)果可知,在離體條件下,甾醇類殺菌劑對(duì)赤霉菌的抑菌效果顯著大于甲氧基丙烯酸酯類殺菌劑,其中戊唑醇的毒力較標(biāo)準(zhǔn)藥劑多菌靈高出1倍以上,建議用戊唑醇與多菌靈混合或交替使用防治小麥赤霉病。
醚菌酯和嘧菌酯屬于廣譜性殺菌劑,離體測(cè)定時(shí)可能因?yàn)椴≡呐月费趸緩蕉档推鋵?duì)藥劑的敏感性。小麥赤霉病菌是否也具有旁路氧化途徑有待進(jìn)一步研究。
本試驗(yàn)未選取一些傳統(tǒng)農(nóng)藥,如甲基硫菌靈,而選用了新型的廣譜高效殺菌劑,以便找到藥劑對(duì)赤霉病菌的新的作用靶標(biāo),為開(kāi)發(fā)針對(duì)赤霉病的特效藥提供依據(jù)。
[1]楊榮明,吳 燕,朱 鳳,等.2010年江蘇省小麥赤霉病流行特點(diǎn)及防治對(duì)策探討[J].中囯植保導(dǎo)刊,2011,(2):16-19.
[2]石志琦,史建榮.小麥赤霉病菌對(duì)多菌靈的抗藥性研究[J].農(nóng)藥學(xué)學(xué)報(bào),2000,(4):22-27.
[3]胡林峰,韓會(huì)娟,侯建虎.六種植物的提取物抑菌活性研究[J].湖北農(nóng)業(yè)科學(xué),2011,(7):50-52.
[4]劉 霞,路永貴,閆當(dāng)萍.EXCEL在農(nóng)藥毒力測(cè)定中的應(yīng)用[J].中國(guó)農(nóng)學(xué)通報(bào),2009,25(19):206-208.
[5]張長(zhǎng)青,馬躍峰,馬國(guó)良,等.防治春小麥赤霉病的室內(nèi)藥劑篩選[J].農(nóng)業(yè)與技術(shù),2005,6(3):25-27.
[6]金麗華,陳長(zhǎng)軍,王建新,等.嘧菌酯及SHAM對(duì)4種植物病原真菌的活性和作用方式研究[J].中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué),2007,40(10):2206-2213.
10.3969/j.issn.1673-1409(S).2012.03.001
S435.121.4+5
A
1673-1409(2012)03-S001-02
2012-03-10
翟平平(1990-),男,江西萬(wàn)年人,現(xiàn)從事植物保護(hù)研究。