胰腺癌組織中MMP-2、MMP-9的表達

吳俊本 張潔 成丕光 王樹靜 鞏本剛 徐懷勇

·論著·

胰腺癌組織中MMP-2、MMP-9的表達

吳俊本 張潔 成丕光 王樹靜 鞏本剛 徐懷勇

目的檢測胰腺癌組織基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-2,MMP-9)的表達，分析其與臨床病理特征的關(guān)系。方法應(yīng)用免疫組化SP法檢測30例胰腺癌及配對癌旁胰腺組織以及11例慢性胰腺炎、6例正常胰腺組織中MMP-2、MMP-9的表達，運用統(tǒng)計軟件SPSS12.0分析其與臨床病理特征的相關(guān)性。結(jié)果正常胰腺組織均無MMP-2及MMP-9的表達。慢性胰腺炎組織MMP-2、MMP-9的陽性表達率均為18.2%(2/11)。胰腺癌組織MMP-2、MMP-9的陽性表達率分別為63.3%(19/30)和56.7%(17/30)；配對癌旁組織的陽性表達率分別為23.3%(7/30)和40.0%(12/30)。胰腺癌組織的MMP-2及MMP-9陽性表達率均顯著高于配對癌旁組織(P<0.05)；胰腺癌組織及癌旁組織中MMP-2及MMP-9的表達均顯著高于慢性胰腺炎組織和正常胰腺組織(P值均<0.05)。MMP-2、MMP-9的表達與胰腺癌臨床分期、腫瘤大小、分化程度及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)。結(jié)論胰腺癌組織中MMP-2、MMP-9呈高表達，其高表達與腫瘤的惡性程度相關(guān)。

胰腺腫瘤； 基質(zhì)金屬蛋白酶-2； 基質(zhì)金屬蛋白酶-9； 免疫組織化學

腫瘤細胞在侵襲、轉(zhuǎn)移過程中必須破壞細胞外基質(zhì)等一系列自然屏障。基質(zhì)金屬蛋白酶類(MMPs)直接參與這一過程，其中MMP-2和MMP-9在腫瘤生長、轉(zhuǎn)移過程中起重要作用[1-5]。本研究檢測MMP-2、MMP-9在胰腺癌組織中的表達，探討它們與胰腺癌臨床病理特征和預(yù)后的關(guān)系。

材料與方法

一、材料

收集2005年1月至2009年9月間濱州市人民醫(yī)院肝膽外科經(jīng)手術(shù)及病理證實的30例胰腺癌標本，其中男17例，女13例，年齡38～82歲，平均(60±12)歲。按UICC的臨床分期：Ⅰ期6例，Ⅱ期8例，Ⅲ期12例，Ⅳ期4例。組織學分級：高分化腺癌10例，中分化腺癌15例，低分化腺癌5例。以同期病理證實的11例慢性胰腺炎和6 例正常胰腺組織標本作為對照。

二、免疫組織化學染色

使用即用型快捷免疫組化MaxVisionTM檢測試劑盒(福州邁新生物技術(shù)有限公司)檢測MMP-2、MMP-9的表達，按照試劑盒說明書操作?？筂MP-2、MMP-9一抗購自福州邁新生物技術(shù)有限公司。 MMP-2和MMP-9蛋白表達主要定位于胞質(zhì),陽性染色為胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)淡黃色至棕褐色顆粒。陽性結(jié)果判斷參考Volm等[6]的方法。隨機選取10個高倍視野,觀察1000個細胞,按陽性細胞百分數(shù)(0、1%～、26%～、50%～)和染色強度( 無、淡黃色、棕黃色、棕褐色) 分別計為0、1、2、3分,將兩分值相加，0～2 分為陰性(-)，3～4 分為弱陽性(+)，5～6分為強陽性(++)。

三、統(tǒng)計學處理

應(yīng)用SPSS12.0統(tǒng)計軟件包處理數(shù)據(jù)，采用χ2檢驗。P<0.05為差異具有統(tǒng)計學意義。

結(jié) 果

一、MMP-2和MMP-9在各胰腺組織中的表達

6例正常胰腺組織均無MMP-2及MMP-9的表

達。11例慢性胰腺炎組織中各有2例表達MMP-2和MMP-9，陽性表達率均為18.2%。胰腺癌組織中MMP-2、MMP-9的陽性表達率分別為63.3%(19/30)和56.7%(17/30，圖1)；配對癌旁組織的陽性表達率分別為23.3%(7/30)和40.0%(12/30)，胰腺癌組織的MMP-2及MMP-9陽性表達率均顯著高于配對癌旁組織(χ2=9.774、6.169，P值均<0.05)。而且胰腺癌組織及癌旁組織中MMP-2及MMP-9的表達均顯著高于慢性胰腺炎組織和正常胰腺組織(P值均<0.05)。

圖1胰腺癌組織的MMP-2(a)、MMP-9(b)的表達(免疫組化 ×400)

二、胰腺癌MMP-2和MMP-9的表達與臨床病理特征的關(guān)系

胰腺癌組織MMP-2 和MMP-9的表達與患者性別、年齡及腫瘤部位均無關(guān),而與腫瘤分期、大小、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、分化程度有關(guān)(P值均<0.05,表1)。

表1 MMP-2、MMP-9表達與胰腺癌臨床病理特征的關(guān)系

討 論

由于胰腺癌惡性程度及轉(zhuǎn)移發(fā)生率高，大多數(shù)胰腺癌預(yù)后較差。淋巴轉(zhuǎn)移通路是胰腺癌細胞最主要的轉(zhuǎn)移方式之一，而細胞外基質(zhì)(extracellular matrix, ECM) 的降解和基底膜的破壞是腫瘤浸潤和轉(zhuǎn)移的先決條件。MMPs能降解ECM,破壞基底膜,促進腫瘤血管新生。文獻報道，MMP-2和MMP-9的表達與多種腫瘤的發(fā)生、分化、轉(zhuǎn)移密切相關(guān)[7-8],人工合成的MMP抑制劑Batimastat(BB- 94)可以有效地抑制腫瘤的生長和轉(zhuǎn)移[9]。

本實驗結(jié)果表明，MMP-2和MMP-9在胰腺癌組織中的表達高于配對癌旁組織、慢性胰腺炎組織及正常胰腺組織的表達，提示MMP-2和MMP-9的高表達與胰腺癌的發(fā)生有關(guān)。本結(jié)果還顯示，胰腺癌組織MMP-2和MMP-9表達與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈正相關(guān)，表明MMP-2和MMP-9通過降解ECM，破壞基底膜，促進腫瘤轉(zhuǎn)移；MMP-2和MMP-9表達與胰腺癌的分化程度和腫瘤大小相關(guān)，提示MMP-2和MMP-9表達與胰腺癌的惡性程度密切相關(guān)，而胰腺癌的惡性程度又與患者預(yù)后密切相關(guān)。因此通過檢測癌組織中MMP-2和MMP-9蛋白的表達可評估胰腺癌分期、惡性程度以及患者的預(yù)后。

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Expressionofmatrixmetalloproteinases(MMP-2、MMP-9)inthepancreaticcarcinoma

WUJun-ben,ZHANGJie,CHENGPi-guang,WANGShu-jing,GONGBen-gang,XUHuai-yong.
DepartmentofHepatobiliarysurgery,BinzhouCityPeople′sHospital,Binzhou256610,China

ZHANGJie,Email:whl918@126.com

ObjectiveTo study the expression of matrix metallopro-teinase-2 (MMP-2), matrix metalloproteinase-9(MMP-9) in the pancreatic carcinomas.MethodsMMP-2,MMP-9 expression were detected by immunohistochemistry in surgically resected specimens (cancer tissues, cancer-adjacent tissues and normal tissues) from 30 PC patients，11 pancreatitis patients and 6 normal patients. the results were analyzed combined with clinical pathologic characteristics. The data was analyzed by Chi-Square test.ResultsThere was no expression of MMP-2,MMP-9 in normal pancreatic tissues. Both of MMP-2 and MMP-9 expressions were 18.2% in chronic pancreatitis titssues. Expression of MMP-2, MMP-9 were higher in cancer tissues than in cancer-adjacent tissues(63.3%vs23.3%,56.7%vs40.0%,P<0.05). There were positive correlation between MMP-2,MMP-9 expression and lymph nodal metastasis,tumor sizes,clinical stage and differentiation of tumor(P<0.05).ConclusionsThe expression of MMP-2 and MMP-9 was high, and linked to its unfavorable prognosis.

Pancreatic neoplasms; Matrix metalloproteinase-2; Matrix metalloproteinase-9; Immunohistochemistry

10.3760/cma.j.issn.1674-1935.2011.06.010

山東省醫(yī)藥衛(wèi)生科技發(fā)展計劃(2009HW001)

256610 山東，山東省濱州市人民醫(yī)院肝膽外科

張潔，Email:whl918@126.com

2011-03-15)

(本文編輯：呂芳萍)