丙型肝炎核心抗原檢測(cè)的臨床意義

鮮玉萍，楊紅英（成都市第六人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 610051）

丙型肝炎核心抗原檢測(cè)的臨床意義

鮮玉萍，楊紅英（成都市第六人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 610051）

目的應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）分別檢測(cè)丙型肝炎病毒核心抗原（HCV－cAg）和抗體（HCVAb），了解丙型肝炎病毒核心抗原檢測(cè)的意義。方法 采用HCV－cAg試劑盒及HCV－Ab試劑盒，對(duì)200例來自手術(shù)前篩查的血清樣本和36例丙型肝炎或疑似丙型肝炎患者的血清樣本進(jìn)行HCV－cAg和HCV－Ab檢測(cè)，陽性者用反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)（RT－PCR）檢測(cè)HCV－RNA證實(shí)。結(jié)果200例術(shù)前篩查樣本 HCV－Ab均為陰性，HCV－cAg陽性3例，其中HCV－RNA陽性1例；36例丙型肝炎或疑似丙型肝炎患者HCV－Ab全部陽性，其中檢出HCV－cAg陽性21例，HCV－RNA陽性24例。HCV－cAg與 HCV－RNA符合率為87.5%（21/24）。結(jié)論 HCV－cAg檢出時(shí)間早于HCV－Ab，對(duì)臨床樣本同時(shí)進(jìn)行丙型肝炎病毒核心抗原和抗體的ELISA檢測(cè)，能夠明顯提高丙型肝炎診斷符合率。

丙型肝炎病毒抗體； 丙型肝炎病毒核心抗原； 反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)

我國的丙型肝炎病毒（HCV）感染率大約為3.2%，而多數(shù)HCV感染都是無癥狀性的，少數(shù)引起急性肝炎的患者，其癥狀也比甲型和乙型急性肝炎的癥狀輕。但感染HCV后形成慢性感染的概率很高，且有相當(dāng)比例患者會(huì)發(fā)展成肝硬化、肝癌。為此，較早檢出HCV感染，及時(shí)有效地阻斷HCV傳播非常重要。丙型肝炎標(biāo)志物包括丙型肝炎病毒核心抗原（HCV－cAg）和抗體（HCV－Ab）及HCV－RNA。本文應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）分別檢測(cè) HCV－cAg和 HCV－Ab，并對(duì) HCV－cAg陽性的標(biāo)本進(jìn)行 HCV－RNA證實(shí)，以了解 HCV－cAg檢測(cè)的意義，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 住院患者標(biāo)本來自2012年2月本院入院手術(shù)前進(jìn)行病毒篩查的血液標(biāo)本，隨機(jī)抽取200例，采用雙盲法同時(shí)檢測(cè)HCV－Ab和HCV－cAg。2011年4月至2012年4月本科HCV－Ab檢測(cè)陽性的血液標(biāo)本36例，分離血清并置－20℃冰箱保存。

1.2 方法與試劑

1.2.1 HCV－Ab檢測(cè)采用鄭州安圖生物公司生產(chǎn)的 HCVAb ELISA試劑盒。按說明書上的方法操作，陽性結(jié)果經(jīng)二次復(fù)檢。

1.2.2 HCV－cAg檢測(cè)采用山東萊博公司商業(yè)化的 HCV－cAg ELISA試劑盒，按說明書上的方法操作，陽性結(jié)果經(jīng)二次復(fù)檢。

1.2.3 HCV－RNA檢測(cè)采用中山大學(xué)達(dá)安基因股份有限公司生產(chǎn)的丙型肝炎病毒RNA聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）檢測(cè)試劑盒，按說明書上的方法操作。

2 結(jié) 果

2.1 HCV－Ab、HCV－cAg、RT－RNA檢測(cè)結(jié)果見表1。

2.2200例住院術(shù)前篩查患者標(biāo)本HCV－Ab檢測(cè)均為陰性，HCV－cAg陽性3例，占1.5%，其中 HCV－RNA陽性1例。

表1 HCV－Ab、HCV－cAg、RT－RNA檢測(cè)結(jié)果（n）

2.336例HCV－Ab陽性的樣本檢出HCV－cAg陽性21例，HCV－cAg與 HCV－Ab陽性符合率為58.3%（21/36）；HCV－RNA與 HCV－Ab陽性符合率為66.7%（24/36）；HCV－cAg與HCV－RNA陽性符合率為87.5%（21/24）。

3 討 論

HCV感染通常是持續(xù)性的終生感染，抗體檢測(cè)是一個(gè)非常有效的方法。但因感染HCV后，抗HCV出現(xiàn)較慢，一般情況下，抗體的血清學(xué)轉(zhuǎn)換可以延遲到暴露后幾個(gè)月才發(fā)生[1]；此時(shí)可發(fā)生抗HCV的假陰性（也就是說在抗體可檢出之前或在血清學(xué)轉(zhuǎn)換之中即所謂的“窗口期”），故在早期診斷丙型肝炎感染上有困難。

反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)（RT－PCR）是一個(gè)很敏感的方法。HCV－RNA可以在暴露后的1～2周被檢出[2]。另外，在一些HCV感染后恢復(fù)期的人群中，抗HCV可能會(huì)逐漸降低到檢測(cè)限之下[3]；或免疫功能低下的HCV感染者，抗HCV會(huì)持續(xù)陰性，這時(shí)，HCV－RNA的檢測(cè)是感染的惟一證據(jù)。故使用RT－PCR技術(shù)檢測(cè)HCV－RNA是判斷感染最有效的方法。但其技術(shù)復(fù)雜，環(huán)境、條件要求較高，不易被多數(shù)實(shí)驗(yàn)室接受和推廣。HCV－cAg幾乎與HCV－RNA同時(shí)出現(xiàn)，采用單克隆抗體制備的ELISA試劑盒檢測(cè) HCV核心抗原，經(jīng) HCV－RNA PCR法復(fù)核，符合率大于85%[4]；另有報(bào)道，HCV－cAg檢測(cè)可以較 HCV－Ab檢出時(shí)間提早23～46d[5]，且ELISA法較PCR法簡(jiǎn)便、快速，現(xiàn)有能開展ELISA檢測(cè)的實(shí)驗(yàn)室無需增加特殊設(shè)備，均可檢測(cè)。本次結(jié)果在被測(cè)的36例HCV－Ab陽性樣本中HCV－cAg陽性21例，HCV－RNA陽性24例，符合率為87.5%（21/24），與文獻(xiàn)報(bào)道一致。因此，在不具備RNA檢測(cè)條件的實(shí)驗(yàn)室開展HCV－cAg檢測(cè)是很好的篩查方法[6]。

36例HCV－Ab陽性僅檢出21例 HCV－cAg陽性，HCV－cAg檢出率低的原因，可能一是由于有抗體的存在，干擾了抗原的檢測(cè)或樣本中的HCV抗體可能與用于核心抗原檢測(cè)的單克隆抗體競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合抗原而造成HCV－cAg的假陰性，為避免這種干擾，需對(duì)單克隆抗體作進(jìn)一步篩選或作丙型肝炎核心總抗原檢測(cè)。二是由于 HCV－Ab是丙型肝炎總抗體，單純HCV－Ab陽性說明現(xiàn)癥患者或既往感染患者，恢復(fù)期患者血清中HCV－Ab也陽性。本研究200例HCV－Ab檢測(cè)陰性的臨床樣本中，檢出 HCV－cAg陽性3例，經(jīng) HCV－RNA確認(rèn)其中有1例陽性。表明“窗口期”的患者因測(cè)不出HCV－Ab易被漏診。僅用 HCV－Ab檢測(cè)將有可能存在0.5%（1/200）漏診的風(fēng)險(xiǎn)，就這0.5%也是不容忽視的，尤其是對(duì)手術(shù)前HCV篩查的患者，涉及術(shù)中感染責(zé)任、用血安全等問題，HCV－cAg檢測(cè)在一定程度上降低了這些風(fēng)險(xiǎn)。因此，認(rèn)為HCV－cAg檢測(cè)可作為HCV抗體檢測(cè)的補(bǔ)充試劑聯(lián)合應(yīng)用臨床，但其敏感性和特異性有待提高。

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10.3969/j.issn.1672－9455.2012.18.033

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2012－05－25）