金櫻根、莖提取物的抗炎、解熱作用對(duì)比研究△

譚年秀，王嵩，江振霖，田素英*

(1.廣州中醫(yī)藥大學(xué)，廣東 廣州 510006；2.廣東藥學(xué)院中山校區(qū)，廣東 中山 528458)

金櫻根、莖提取物的抗炎、解熱作用對(duì)比研究△

譚年秀1，王嵩2，江振霖2，田素英2*

(1.廣州中醫(yī)藥大學(xué)，廣東 廣州 510006；2.廣東藥學(xué)院中山校區(qū)，廣東 中山 528458)

目的研究金櫻根、莖提取物的抗炎、解熱作用。方法通過(guò)小鼠足跖腫脹、腹腔毛細(xì)血管通透性和大鼠棉球肉芽腫實(shí)驗(yàn)觀察金櫻根、莖提取物的抗炎作用；通過(guò)干酵母制備大鼠發(fā)熱模型，觀察金櫻根、莖提取物的解熱作用。結(jié)果金櫻根、莖提取物可減輕小鼠足跖腫脹，降低小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性，對(duì)大鼠棉球肉芽腫的生成具有顯著的抑制作用；金櫻根醇提物和金櫻莖水提物對(duì)發(fā)熱大鼠有顯著降溫作用。結(jié)論金櫻根、莖提取物對(duì)急、慢性炎癥模型均有明顯的對(duì)抗作用；金櫻根醇提物和金櫻莖水提物具有一定的解熱作用。金櫻莖在一定條件下可作為金櫻根入藥。

金櫻根；金櫻莖；抗炎；解熱

金櫻根為薔薇科植物金櫻子RosalaevigataMichx.的干燥根，為民間常用藥物，具有固精澀腸功效，主要用于治療滑精、遺尿、痢疾泄瀉、崩漏帶下、子宮脫垂、痔疾、燙傷等癥[1-2]。近年來(lái)金櫻根受到較廣泛的應(yīng)用，如婦科千金片、金雞膠囊、廣東涼茶、三金片、三金顆粒等[3]。但目前金櫻根中?；煊媒饳亚o，二者在抗炎、解熱方面有何差異，未見(jiàn)報(bào)道?，F(xiàn)就其抗炎、解熱作用進(jìn)行研究。

1 材料

1.1 試藥

金櫻根和金櫻莖(購(gòu)于廣州致信藥業(yè)有限公司，批號(hào)：20100820，經(jīng)廣東藥學(xué)院副教授田素英鑒定為金櫻子RoselaevigataMichx.的根和莖)；硫酸鏈霉素(華北制藥股份有限公司，批號(hào)：0910102)；青霉素鈉(哈藥集團(tuán)制藥總廠，批號(hào)：A 080506813)；阿司匹林(拜耳醫(yī)藥保健有限公司，批號(hào)：BJ01117)；高活性酵母(安琪酵母股份有限公司，批號(hào)：GB/T20886)。

1.2 水/醇提取物

分別取金櫻根和金櫻莖2 kg，打成粗粉，分別用水以及70%乙醇以飲片-溶劑(1∶8)比例超聲提取30 min，再置于燒瓶中加熱回流30 min，紗布過(guò)濾，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀以及恒溫水浴鍋濃縮(醇提物濃縮至無(wú)醇味)分別得到金櫻根水、醇提物，金櫻莖水、醇提物(各含生藥量為0.72 g·mL-1)，放入冰箱恒溫保存?zhèn)溆谩?/p>

1.3 動(dòng)物

SPF級(jí)別，KM小鼠，SD大鼠，均購(gòu)于廣東省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心；許可證號(hào)：SCXK(粵)2008-0002。在清潔級(jí)動(dòng)物房?jī)?nèi)飼養(yǎng)，每天早上喂養(yǎng)飼料以及換水，每2天更換一次墊料，并保持室內(nèi)干凈衛(wèi)生，使房?jī)?nèi)通風(fēng)透氣，保證飼料和飲水正常。室溫控制在(20±4)℃，濕度為(70±10)%。

2 方法

2.1 動(dòng)物分組

每個(gè)實(shí)驗(yàn)均將小鼠或大鼠分為6組，每組10只，分別為金櫻根醇提物組(下稱(chēng)根醇組)、金櫻根水提物組(下稱(chēng)根水組)、金櫻莖醇提物組(下稱(chēng)莖醇組)、金櫻莖水提物組(下稱(chēng)莖水組)、陽(yáng)性藥物組、0.9%氯化鈉溶液對(duì)照組。

2.2 給藥劑量設(shè)置

分別以成人每天用量的劑量96 g·(60 kg)-1，根據(jù)體重?fù)Q算法：動(dòng)物用藥劑量(g·kg-1)=K×人用量(g·kg-1)，計(jì)算小鼠(20 g，K=9.01)、大鼠(200 g，K=6.25)金櫻根、莖提取物的劑量，小鼠：14.42 g飲片·kg-1，大鼠：9.97 g飲片·kg-1。阿司匹林0.2 g·kg-1。

2.3 抗炎作用

2.3.1 小鼠足跖腫脹實(shí)驗(yàn) 取體重18～22 g健康小鼠60只，雌雄各半，分6組，灌胃給藥7 d，阿司匹林陽(yáng)性組在第4天才開(kāi)始灌胃給藥，第7天末次給藥后30 min，測(cè)量小鼠右后肢的體積，再往小鼠右后肢肉墊里注射用0.9%氯化鈉溶液配制好的10%蛋清溶液(0.1 mL/跖)[4]，每小時(shí)測(cè)量小鼠右后肢體積，連測(cè)6次。計(jì)算腫脹率。

腫脹率=(致炎后體積-致炎前體積)/致炎前體積×100%

2.3.2 對(duì)小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性影響 取體重18～22 g健康小鼠60只，雌雄各半，分6組，灌胃給藥7 d，于末次給藥1 h后，給小鼠尾靜脈注射0.3%伊文思藍(lán)[0.1 mL·(10g)-1]，隨即腹腔注射0.6%醋酸[0.12 mL·(10g)-1]；20 min后，脫臼處死小鼠，在小鼠下腹部剪開(kāi)一小口，用0.9%氯化鈉洗滌溶液腹腔，收集洗滌液，離心處理15 min(3 000 r·min-1)，取上清液，用721分光光度計(jì)590 nm處測(cè)量其吸收度。

2.3.3 大鼠棉球肉芽腫實(shí)驗(yàn)[5]取體重150～200 g健康大鼠60只，雌雄各半，分6組，腹腔注射戊巴比妥鈉溶液(80 mg·kg-1)，待其進(jìn)入麻醉狀態(tài)后，將大鼠右前肢腋下的毛剪掉，涂抹碘酒消毒，再用70%乙醇脫碘，用手術(shù)剪剪開(kāi)1 cm長(zhǎng)的小口，用眼科鑷將滅菌脫脂棉球(每個(gè)重20.0 mg，每個(gè)棉球滴加青鏈霉素混合液)埋入皮下，縫合；術(shù)后2 h，連續(xù)灌胃給藥7 d，第8天將大鼠脫臼處死，取出棉球，去除脂肪組織，用真空干燥器烘干棉球(真空度：0.09 MPa，溫度：40 ℃)至恒重，減去原棉球重量，得出肉芽腫凈重。

2.4 解熱作用

實(shí)驗(yàn)前3 d每天測(cè)體溫2次，挑選體溫在36.6～38.0 ℃、體溫變化不超過(guò)0.3℃的大鼠供制備發(fā)熱模型用。取體重150～200 g健康大鼠60只，雌雄各半，分6組，連續(xù)灌胃給藥6 d，第7天按[1 mL·(100 g)-1]的劑量給大鼠皮下注射20%酵母粉混懸液，1 h后開(kāi)始測(cè)肛溫，然后每1 h測(cè)1次，于第4小時(shí)有80%以上的大鼠體溫升至0.5 ℃以上時(shí)即為造模成功。然后每1 h測(cè)1次體溫，測(cè)9 h。以每次測(cè)得的體溫與基礎(chǔ)體溫的差值△℃比較其解熱效果。

2.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)

3 結(jié)果

3.1 抗炎作用

結(jié)果見(jiàn)表1、2、3。

表1 足跖腫脹實(shí)驗(yàn)結(jié)果

注：1.與空白對(duì)比，*P<0.05；2.與陽(yáng)性對(duì)比，#P<0.05；3.與根水對(duì)比，△P<0.05；4.與根醇對(duì)比，▲P<0.05；下同。

表2 腹腔毛細(xì)血管通透性實(shí)驗(yàn)結(jié)果

表3 棉球肉芽腫實(shí)驗(yàn)結(jié)果

從表1中可以看出在第1小時(shí)時(shí)各給藥組均有抑制足跖腫脹作用，且根水組、根醇組均強(qiáng)于莖水組、莖醇組，但與陽(yáng)性組阿司匹林比較差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；在第2小時(shí)時(shí)根水組、根醇組、陽(yáng)性組、莖水組均有抑制足跖腫脹作用，莖醇組抑制作用不明顯，且根水組、根醇組與陽(yáng)性組阿司匹林、莖水組均沒(méi)有明顯差異；在第3、4小時(shí)時(shí)根水組、根醇組、陽(yáng)性組均有抑制足跖腫脹作用，但莖醇組、莖水組抑制作用不明顯，且根水組、根醇組均與陽(yáng)性組阿司匹林差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；在第5、6小時(shí)時(shí)根水組、根醇組、陽(yáng)性組均均有抑制足跖腫脹作用，但根水組、根醇組沒(méi)陽(yáng)性組阿司匹林明顯；莖水、莖醇組沒(méi)有明顯的抑制足跖腫脹作用。

從表2中可以看出根水組、根醇組、莖水組和莖醇組與空白組對(duì)比，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，說(shuō)明金櫻根、莖水、醇提取物均可抑制炎性物滲出，但作用弱于阿司匹林；根醇組、莖醇組、莖水組、根水組組間比較，差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

從表3中可以看出各組均具有抑制棉球肉芽腫作用，說(shuō)明金櫻根、莖水、醇提取物均對(duì)慢性炎癥有抑制作用，且根水組最強(qiáng)，但其作用均弱于陽(yáng)性組阿司匹林；根醇組作用強(qiáng)于與莖水組、莖醇組。

3.2 解熱作用

結(jié)果見(jiàn)表4。

表4 解熱實(shí)驗(yàn)結(jié)果

從表4中可知根醇組、根水組、莖水組、陽(yáng)性組與空白組對(duì)比，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，說(shuō)明其有一定的解熱作用，但其作用均弱于阿司匹林，莖醇組解熱作用不明顯；組間比較的結(jié)果顯示，根醇組弱與根水組。根醇組、根水組解熱作用與莖水組對(duì)比，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

4 討論

在足跖腫脹實(shí)驗(yàn)中，金櫻根的水提物和醇提物自始至終均有明顯抗炎作用(與空白組比，P<0.05)，且在第1、2、3、4小時(shí)時(shí)與陽(yáng)性阿司匹林組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；而金櫻莖的提取物在第1小時(shí)時(shí)有抑制足跖腫脹作用，且作用弱于金櫻根提取物，在第2小時(shí)時(shí)莖水組尚有抑制足跖腫脹作用，但明顯弱于金櫻根的提取物，而莖醇組抑制作用不明顯；在第3、4、5、6小時(shí)時(shí)莖醇組、莖水組抑制作用與空白組比無(wú)明顯區(qū)分(P>0.05)。

在腹腔毛細(xì)血管通透性實(shí)驗(yàn)中，根水組、根醇組、莖水組和莖醇組均有抗炎作用(與空白組比，P<0.05)，但作用弱于阿司匹林(與陽(yáng)性組比，P<0.05)；根醇組、莖醇組、莖水組、根水組組間比較差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

在抑制棉球肉芽腫實(shí)驗(yàn)中，金櫻根、莖各提取物均具有抑制棉球肉芽腫作用(與空白組比，P<0.05)，且根水組最強(qiáng)，其次是根醇組，其作用均弱于陽(yáng)性組阿司匹林(與陽(yáng)性組比，P<0.05)；但根提取物組作用強(qiáng)于與莖提取物組。

以上說(shuō)明金櫻根的水、醇提取物抗炎作用整體上強(qiáng)于其莖的水、醇提取物。但在不同的實(shí)驗(yàn)中強(qiáng)弱有所不同，這可能與其所產(chǎn)生的抗炎機(jī)制不同有關(guān)。

大鼠解熱實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，金櫻根的水、醇提取物以及其莖的水提物有一定的解熱作用(與空白組比，P<0.05)，但其作用均弱于阿司匹林(P<0.05)，莖醇組解熱作用不明顯；根醇組弱于根水組(P<0.05)。說(shuō)明金櫻根的解熱作用好于金櫻莖。

綜上結(jié)果表明，金櫻根的抗炎、解熱作用比金櫻莖要強(qiáng)些，故建議金櫻根中不要混入金櫻莖，尤其是地上莖部分。再者無(wú)論是金櫻根或是金櫻莖，其水提取物的抗炎、解熱作用在一定程度上均強(qiáng)于其醇提物，這可能與其所含成分不同有關(guān)，這有待下一步進(jìn)行研究。

[1] 江蘇新醫(yī)學(xué)院.中藥大辭典[M].上冊(cè).上海：上海科學(xué)技術(shù)出版社，1977：1407.

[2] 日華子著，尚志均輯復(fù).日華子本草[M].合肥：安徽科學(xué)技術(shù)出版社，2005：156.

[3] 劉佩沂,田素英,梅全喜.金櫻根的研究進(jìn)展[J].海峽藥學(xué),2010,22(1)：98-100.

[4] 梅全喜，鐘希文，高玉橋，等.復(fù)方土牛膝糖漿劑抗炎作用的實(shí)驗(yàn)研究[J].中藥材，2007,30(5)：586-588.

StudyAnti-inflammatoryandAntipyreticEffectofExtractfromRootandStemofRosalaevigataMichx.

TAN Nian-xiu1，WANG-Song2，JIANGZhen-Lin2，TIAN Su-ying2

(1.GuangzhouUniversityofChineseMedicine,Guangzhou510006，China; 2,ZhongshanCampusofGuangdongPharmaceuticalUniversity,Zhongshan,528458,China)

Objective: Study anti-inflammatory,antipyretic effect of extract from root and stem ofRosalaevigataMichx..MethodsTo observe anti-inflammatory action on extract from root and stem ofRosalaevigataMichx..Through mouse model of paw swelling caused by egg white and peritoneal vascular permeability increased by acetic acid,and rat model of cotton-ball granulation.Observe antipyretic effect of extract from roots and stems ofRosalaevigataMichx.on fever rat model caused by dry yeast.ResultsThe extract from root and stem ofRosalaevigataMichx..Both have inhibitory effect on mice paw swelling,peritoneal capillary permeability and rat cotton-ball granuloma.The alcohol extract from root and the water extract from stem have a obvious cooling effect in fever rat model.ConclusionThe extract from root and stem ofRosalaevigataMichx.have inhibitory effect on acute and chronic inflammatory models.The alcohol extract from root ofRosalaevigataMichx.and the water extract from stem have good antipyretic action.The stem could replace the rootas traditional Chinese medicine in certain condition.

RosalaevigataMichx.; Anti-inflammatory;Antipyretic

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廣東省中山市健康基地專(zhuān)項(xiàng)基金(2009H020)

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田素英，E-mail：zsxqtsy@126.com

2012-03-07)