復(fù)方丹參片質(zhì)量評(píng)價(jià)方法的探討

何廣吉，李漢榮

（茂名石化醫(yī)院，廣東 茂名 525011）

復(fù)方丹參片是一種臨床常見(jiàn)的中成藥，其主要成分為丹參、冰片和三七，其主要臨床作用為治療與預(yù)防心肌梗死、腦出血和心絞痛［1］，其發(fā)揮臨床作用的成分主要為丹參素和原兒茶醛［2］。冠心病是冠狀動(dòng)脈粥樣硬化使管腔阻塞，容易導(dǎo)致心肌缺血，常表現(xiàn)為心絞痛、心肌梗死、心力衰竭等，嚴(yán)重危害了患者的生命健康。丹參用于預(yù)防和治療心血管疾病在中國(guó)有悠久的歷史，復(fù)方丹參制劑是以丹參為君藥，輔以其他中藥制成，劑型多為片劑、丸劑、注射液等，如復(fù)方丹參片、復(fù)方丹參注射液等，組方略有不同。本研究采用高效液相色譜進(jìn)行檢測(cè)并分析檢測(cè)方法的質(zhì)量及含量分析。

1 儀器與方法

1.1 儀器與試劑

本研究采用日本生產(chǎn)的LG-5A高效液相色譜進(jìn)行丹參片質(zhì)量評(píng)價(jià)，主要包括LC-10AT泵，SPD-10A檢測(cè)儀和DGC-12A脫氣儀器，同時(shí)采用分析天平、醫(yī)用超聲清洗設(shè)備和離心機(jī)。主要試劑采用原兒茶醛和丹參素標(biāo)準(zhǔn)試劑，其均購(gòu)買(mǎi)于中國(guó)藥品生物制品檢定所。本研究搜集10批復(fù)方丹參片藥物進(jìn)行研究，輔助試劑主要為甲醇、乙腈等，均為分析級(jí)純度。

1.2 研究方法

主要包括色譜設(shè)置和溶液配制，其中色譜主要采用Hypersil ODS柱；采用甲醇-乙腈-冰醋酸-水作為流動(dòng)相，其濃度分布為3∶5∶1∶91，一次進(jìn)樣量為10μL，以保證檢驗(yàn)試劑在進(jìn)行分析時(shí)在峰形時(shí)無(wú)雜峰干擾。配制丹參素溶液和對(duì)照品，配制溶液時(shí)采用蒸餾水，注意配制的精密性，再配制精密吸取復(fù)方丹參片溶液和原兒茶醛對(duì)照品進(jìn)行配制，分別配制丹參素和原兒茶醛梯度濃度，其中丹參素梯度濃度為7.5、15、30、75、120、150μg／mL。原兒茶醛濃度為2.5、5.0、10.0、20.0、40.0、6.0μg／mL。分別進(jìn)行測(cè)量建立線(xiàn)性關(guān)系，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，建立回歸方程，其中復(fù)方丹參素建立標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)后繪制回歸方程為Y＝61225X-25364，原兒茶醛繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)后建立回歸方程為Y＝15394X-16284，兩個(gè)方程R均大于0.99。對(duì)實(shí)驗(yàn)所需的試劑和儀器進(jìn)行精確性、穩(wěn)定性和回收率分析顯示，本實(shí)驗(yàn)精確度大于98.5%，穩(wěn)定性為相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD＝1.8%，回收率均大于97.5%。

2 結(jié)果

對(duì)10批復(fù)方丹參片中丹參素和原兒茶醛含量進(jìn)行分析研究顯示，其中丹參素最大含量為0.412mg／片，最小含量為0.139mg／片；原兒茶醛最大含量為0.844mg／片，最小含量為0.246mg／片，丹參素及原兒茶醛含量均分布差異性較大，見(jiàn)表1。

表1 復(fù)方丹參片中丹參素和原兒茶醛含量檢測(cè)分析

3 討論

復(fù)方丹參滴丸（CSDP）是在復(fù)方丹參片的基礎(chǔ)上制成的，復(fù)方丹參滴丸是由丹參、三七、冰片組成，經(jīng)現(xiàn)代藥學(xué)新技術(shù)研制而成的純中藥復(fù)方制劑，是一種高度分散狀態(tài)的固體分散物。其溶出速度快、生物利用度高、不良反應(yīng)小、高效速效的特點(diǎn)已使其成為心內(nèi)科的常備急診藥。根據(jù)中醫(yī)傳統(tǒng)理論，采用現(xiàn)代高科技手段研制的一種純中藥滴丸劑，在質(zhì)量控制、藥理作用和臨床療效上均明顯優(yōu)于復(fù)方丹參片，可作為治療冠心病的急救藥物。

復(fù)方丹參滴丸是一種以活血化淤通絡(luò)止痛為主的純中藥制劑，其主要成分是丹參、三七、冰片。醫(yī)學(xué)研究證實(shí)：該復(fù)方制劑具有有效成分純度高，分散均勻，溶出速度快，無(wú)明顯耐藥性、可直接經(jīng)粘膜快速吸收入血，無(wú)肝臟首過(guò)效應(yīng)，大大提高生物利用度及安全無(wú)毒等優(yōu)點(diǎn)，對(duì)抗血小板聚集、改善血液流變學(xué)狀態(tài)、降低血脂、清除自由基、抑制脂質(zhì)過(guò)氧均具有一定的療效。此種中成藥的病理作用很簡(jiǎn)單，就是改變血液循環(huán)動(dòng)力，具有溶栓作用：復(fù)方丹參滴丸能影響多種凝血因子，改善血液流變性，降低血液粘稠度，調(diào)節(jié)細(xì)胞電脈率，改善微循環(huán)，改善內(nèi)皮功能，清除自由基 。因此對(duì)血瘀患者血液的“粘、聚、滯”傾向有很好療效，具有抗凝血、抗血栓、降低血粘度的作用，此外還能激活纖維酶原，促進(jìn)纖維蛋白轉(zhuǎn)化為裂解產(chǎn)物，產(chǎn)生纖溶作用，從而促進(jìn)血栓溶解。而且現(xiàn)在對(duì)中醫(yī)藥的觀察進(jìn)一步發(fā)展，已經(jīng)有實(shí)驗(yàn)指出，復(fù)方丹參滴丸不僅僅是治療心血管疾病方面的首選藥物，而且治療范圍還在不斷擴(kuò)大，比如眼科臨床居然也能用此藥。相信，隨著臨床研究的進(jìn)一步深入，復(fù)方丹參滴丸會(huì)有更廣闊的發(fā)展前景。

高效液相色譜，簡(jiǎn)稱(chēng)HPLC，是色譜檢測(cè)法的一個(gè)重要分支，原理為以液體為流動(dòng)相，利用高壓輸液系統(tǒng)，對(duì)具有不同極性的單一溶劑或不同分布的混合溶劑、緩沖液等流動(dòng)相泵入裝有固定相的色譜柱，在柱內(nèi)進(jìn)行各成分分離，最后進(jìn)入檢測(cè)器進(jìn)行檢測(cè)分析，目的為實(shí)現(xiàn)對(duì)試樣各成分的分析。該方法已成為化學(xué)、醫(yī)學(xué)和商檢等學(xué)科領(lǐng)域中重要的分離分析技術(shù)。復(fù)方丹參片是一種中藥材，具有多種成分，其臨床發(fā)揮中藥的作用。但由于原料濃度不恒定，生產(chǎn)過(guò)程中沒(méi)有較強(qiáng)的提純濃度，雖然可以發(fā)揮重要的臨床藥效，具有擴(kuò)張心腦血管、消除自由基和抗血小板聚集的作用，但由于發(fā)揮作用的藥物成分含量不穩(wěn)定，其發(fā)揮臨床作用時(shí)受到一定的限制［3-5］。本研究結(jié)果顯示對(duì)10批復(fù)方丹參片中丹參素和原兒茶醛含量進(jìn)行分析研究顯示，其中丹參素最大含量為0.412mg／片，最小含量為0.139mg／片；原兒茶醛最大含量為0.844mg／片，最小含量為0.246mg／片，丹參素及原兒茶醛含量均分布差異性較大。可見(jiàn)采用高效液相色譜進(jìn)行復(fù)方丹參片質(zhì)量評(píng)價(jià)準(zhǔn)確可靠且可重復(fù)性好，但復(fù)方丹參片中丹參素和原兒茶醛含量差異性較大。

［1］丁伯平，楊解解，劉曉平，等.丹參葡萄注射液對(duì)麻醉開(kāi)胸犬血?jiǎng)恿W(xué)的影響［J］.中國(guó)中醫(yī)藥科技，2005，12（6）：371.

［2］葉素梅，熊小村.HPLC法測(cè)定香丹注射液中丹參素和原兒茶醛［J］.基層中藥雜志，2001，15（4）：7.

［3］王宏宇，李亞娟，王穎，等.丹參的藥理研究進(jìn)展［J］.黑龍江醫(yī)藥，2000，13（3）：172.

［4］史宏濤，韓清華.復(fù)方丹參滴丸對(duì)冠心病心絞痛患者心肌總?cè)毖?fù)荷和心臟相關(guān)事件的影響［J］.中西醫(yī)結(jié)合心腦血管病雜志，2009（1）：34.

［5］唐潤(rùn)蓮.復(fù)方丹參滴丸治療冠心病心絞痛37例臨床觀察［J］.疑難病雜志，2007，10（8）：89.