左軍 孔繁軍 丁旭
全血或血漿測(cè)定dimer的研究
左軍 孔繁軍 丁旭
目的全血或血漿測(cè)定dimen的研究。方法目前測(cè)定D-二聚體多數(shù)采用109 mmol/L或105 mmol/L枸櫞酸鈉作為抗凝劑,全血與抗凝劑的比例為9∶1分離血漿來(lái)測(cè)定,離心、測(cè)試時(shí)間長(zhǎng),我們采用瑞萊生物工程(深圳)有限公司提供的ReLIA多功能免疫檢測(cè)系統(tǒng)及其試劑,用抗凝全血(105 mmol/L枸櫞酸鈉作為抗凝劑)和(EDTA2 k抗凝劑)全血及血漿分別測(cè)定D-二聚體。結(jié)果三者結(jié)果有顯著的差異,用105 mmol/L枸櫞酸鈉作為抗凝劑全血測(cè)定結(jié)果最低。EDTA2 k抗凝劑的全血測(cè)定高于前者,而用105 mmol/L枸櫞酸鈉作為抗凝劑的血漿結(jié)果最高。結(jié)論用抗凝全血檢測(cè)D-二聚體可以作為一種快速篩查手段。
全血D-二聚體ReLIA;免疫檢測(cè)
1.1 材料瑞萊生物工程(深圳)有限公司提供的ReLIA多功能免疫檢測(cè)系統(tǒng)試劑批號(hào)20111001023。凝血常規(guī)檢測(cè)抗凝管(105 mmol/L枸櫞酸鈉)、EDTA2K抗凝劑采血管
1.2 方法分別選取30分兩種抗凝全血和105 mmol/L枸櫞酸鈉抗凝血漿來(lái)測(cè)定第二聚體含量觀察測(cè)試結(jié)果
1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法使用SPSSl3.0軟件系統(tǒng),兩樣本均數(shù)比較,用配對(duì)資料t檢驗(yàn)。
抗凝全血和抗凝血漿檢測(cè)D-二聚體兩種方法T=2.8452 (P<0.01)有顯著差異用105 mmol/L枸櫞酸鈉作為抗凝劑全血和EDTA2 k抗凝劑的全血兩者比較T=0.7656(P>0.05)無(wú)顯著差異。用枸櫞酸鈉作為抗凝劑分離血漿樣本和EDTA2 k抗凝劑的全血兩者比較T=2.2088(P<0.05)顯著差異。見(jiàn)表1。
表1
ReLIA多功能免疫檢測(cè)系統(tǒng)采用的是專(zhuān)利雙向免疫測(cè)流技術(shù)[1]。人體纖維蛋白溶解系統(tǒng),是人體最重要的抗凝系統(tǒng),對(duì)保持血管壁的正常通透性,維持血液流動(dòng)狀態(tài)和組織修復(fù)起到極為重要的作用,纖溶系統(tǒng)有4個(gè)主要成分,纖溶酶原纖溶酶原激活劑(如tpa)纖溶酶和纖溶酶抑制物,當(dāng)血液凝固時(shí),纖維蛋白形成結(jié)塊,tpa激活后,使纖溶酶原轉(zhuǎn)化為纖溶酶,其可以溶解凝血中的纖維蛋白凝塊其降解產(chǎn)物即各種可溶性蛋白片段組成為X-寡聚體、第二聚體、中間片段和片段E.D-二聚體來(lái)源于纖溶酶溶解的交聯(lián)纖維蛋白凝塊,因此D-二聚體與靜脈血栓的診斷、肺栓塞、DIC心肌梗死及腦血栓、白血病、妊娠、組織損傷惡性實(shí)體腫瘤、外科手術(shù)以及纖溶亢進(jìn)等多種疾病有著密切的關(guān)系。卡米拉,木克代斯[2],因此D-二聚體的檢測(cè)對(duì)臨床有著重要的輔助診斷價(jià)值。為了能夠快速檢測(cè)D-二聚體含量[3]。夏訊生。我們嘗試用全血法來(lái)測(cè)定該項(xiàng)目,以便為臨床快速提供參考依據(jù)。
從表中數(shù)據(jù)可以看出105 mmol/L枸櫞酸鈉作為抗凝劑的全血結(jié)果最低、EDTA2 k抗凝劑的全血結(jié)果高些,而用105 mmol/L枸櫞酸鈉抗凝血漿結(jié)果最高(其參考值范圍為0-2400 ng/ml)經(jīng)過(guò)統(tǒng)計(jì)學(xué)比較三者有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義.
實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)表明D-二聚體可以用全血法來(lái)檢測(cè),也可以用血漿來(lái)檢測(cè),但是全血法的穩(wěn)定性和血漿法比較穩(wěn)定性略差,特別是對(duì)于D-二聚體含量較低的樣本檢測(cè)結(jié)果不是很理想當(dāng)?shù)陀?0 ng/ml時(shí)候不能呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系,這可能與全血中的有形成分的干擾有一定的關(guān)系,其正常參考范圍還有待進(jìn)一步的測(cè)試統(tǒng)計(jì),但也是某一地域性的范圍,如果作為過(guò)篩檢測(cè)初步判斷D-二聚體的含量便于臨床快速診斷還是有很大的幫助的。
由于D-二聚體測(cè)定方法很多。崔樹(shù)明[4],沒(méi)有一個(gè)統(tǒng)一的或者說(shuō)一種金方法來(lái)衡量,因此其正常參考范圍也由很大區(qū)別,ReLIA法的參考范圍為0-2400 ng/ml很大,而ACL9000則為0-255ng/ml兩種方法無(wú)法進(jìn)行比較,這也給臨床診斷帶來(lái)一定的差異,對(duì)于ReLIA多功能免疫檢測(cè)系統(tǒng)測(cè)定D-二聚體是一項(xiàng)比較快速(<20 min)簡(jiǎn)單的檢測(cè)手段,它的優(yōu)勢(shì)在于可以用全血來(lái)檢測(cè),免去了由于長(zhǎng)時(shí)間離心而延遲的檢測(cè)機(jī)會(huì)。盡管全血法檢測(cè)D-二聚體還有待進(jìn)一步的探討,但是作為一種快速檢測(cè)手段還是值得參考。
[1]瑞萊生物工程(深圳)有限公司試劑儀器使用指南.
[2]卡米拉.木克代斯D-二聚體檢測(cè)的意義.血栓與止血,2009,4 (4):100-101.
[3]夏訊生,唐寧,張碧玉,等.D-二聚體兩種定量檢測(cè)方法的檢測(cè)與評(píng)價(jià).血栓與止血,2007,2:82-85.
[4]崔樹(shù)明.《醫(yī)學(xué)理論與實(shí)踐》D-二聚體測(cè)定及臨床應(yīng)用研究進(jìn)展,2011,24(8):896-898.
130011長(zhǎng)春,一汽總醫(yī)院(吉大四院)檢驗(yàn)科