采用TLC法鑒別參芪苓術(shù)合劑中黃芪和黃連

羅 峰

（河南省藥品審評(píng)認(rèn)證中心，河南 鄭州450000）

參芪苓術(shù)合劑是汝州市濟(jì)仁糖尿病醫(yī)院在臨床經(jīng)驗(yàn)的基礎(chǔ)上研制的醫(yī)院制劑，由黃芪、黃連、茯苓、白術(shù)等11味中藥組成.主要功能為益氣生津，潤(rùn)燥止渴.對(duì)糖尿病引起的口渴引飲，小便頻數(shù)，神疲氣短等有較好的療效.為了更好地控制其內(nèi)在質(zhì)量，經(jīng)參考有關(guān)文獻(xiàn)及反復(fù)試驗(yàn)，建立了黃芪和黃連的TLC定性鑒別方法，該方法可靠、專屬性強(qiáng)，可作為該制劑的質(zhì)量控制方法.

1 儀器與試藥

1.1 儀器 TCQ－250超聲波清洗器（北京醫(yī)用儀器二廠）等.

1.2 對(duì)照品與對(duì)照藥材 黃芪甲苷對(duì)照品、鹽酸小檗堿對(duì)照品、黃連對(duì)照藥材均購自中國(guó)藥品生物制品檢定所.

1.3 試劑 薄層層析用硅膠G（青島海洋化工廠），水為純化水，其余試劑均為分析純.參芪苓術(shù)合劑樣品由汝州市濟(jì)仁糖尿病醫(yī)院提供，批號(hào)為：20110603、20110106、20110309.

2 TLC定性鑒別

2.1 黃芪的 TLC定性鑒別［1，2］取本品30mL，用水飽和的正丁醇振搖提取3次，每次30mL，合并正丁醇提取液，用氨試液洗滌2次，每次20mL，取正丁醇液，蒸干，殘?jiān)蛹状?mL使溶解，加在中性氧化鋁柱（100～200目，8g，內(nèi)徑10～15mm）上，用水50mL洗脫，棄去水洗液，再用50%乙醇80mL洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘?jiān)蛹状?.5mL使溶解，制成供試品溶液.去除處方中黃芪，將處方中其他藥材按比例制成合劑，再按照供試品液的制備方法制備成陰性對(duì)照溶液.另取黃芪甲苷對(duì)照品，加甲醇制成每1mL含1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液.照薄層色譜法（《中國(guó)藥典》2010年版一部附錄VI B）試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液和陰性對(duì)照溶液各10μL、對(duì)照品溶液2μL，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷－乙酸乙酯－甲醇－水（10∶20∶11∶5）10℃以下放置的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干.噴以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰.供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；而陰性對(duì)照無干擾，見圖1.

圖1 黃芪的薄層色譜圖

2.2 黃連的薄層色譜鑒別［1，2］取本品3mL，蒸干，殘?jiān)蛹状?mL振搖使溶解，濾過，取濾液作為供試品溶液.將處方中其他所列藥材按比例及工藝制備缺黃連的合劑作為陰性樣品，同供試品制備得陰性對(duì)照溶液.另取黃連對(duì)照藥材0.25g，加甲醇25mL，超聲處理30min，濾過，取濾液作為對(duì)照藥材溶液.再取鹽酸小檗堿對(duì)照品，加甲醇制成每1mL含0.5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液.照薄層色譜法（《中國(guó)藥典》2010年版一部附錄ⅥB）試驗(yàn)，吸取上述四種溶液各5 μL，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以甲苯－乙酸乙酯－異丙醇－甲醇－水（12∶6∶3∶3∶0.6）為展開劑，置用濃氨試液預(yù)飽和20min的展開缸內(nèi)，展開，取出，晾干，置紫外光燈（365 nm）下檢視.供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜和對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)，而陰性對(duì)照無干擾，見圖2.

圖2 黃連的薄層色譜圖

3 結(jié)果與討論

3.1 參芪苓術(shù)合劑處方中，主要成分為黃芪、黃連，為更好地控制該制劑的質(zhì)量，建立了對(duì)黃芪、黃連的TLC定性鑒別方法.

3.2 由圖1、圖2可以看出該制劑中各藥味的供試品色譜中，在與對(duì)照品和對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上顯相同顏色的斑點(diǎn).而所有的陰性樣品在此相應(yīng)的位置上未有斑點(diǎn)顯示，表明樣品中其他組分對(duì)鑒別無干擾，對(duì)參芪苓術(shù)合劑中黃芪、黃連顯示出較好的專一性.

3.3 2.1黃芪的TLC定性鑒別中的供試品溶液的制備：曾選用供試品加三氯甲烷、乙酸乙酯及大孔吸附樹脂提取的方法，雜質(zhì)斑點(diǎn)較正文多，且陰性有干擾.展開劑曾選用乙酸乙酯－丁酮－甲酸－水（5∶3∶1∶1），效果不如正文方法.

［1］國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典2010年版（一部）［S］.北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2010：442，570，627，685，1019.

［2］呂武清，龍新華.中成藥中的藥材薄層色譜鑒別［M］.第1版.北京：人民衛(wèi)生出版社，1997：469－493.