女貞子萃取物對斷奶仔豬生長性能、抗氧化功能及血清生化指標(biāo)的影響

東北農(nóng)業(yè)大學(xué)動物營養(yǎng)研究所 張 超 單安山 劉天陽 王佳麗

女貞子具有滋補(bǔ)肝腎、明目烏發(fā)的作用，是一味臨床常用中草藥。近幾年已經(jīng)開始研究其作為飼料添加劑在畜禽生產(chǎn)中的作用。然而飼料中添加大量女貞子粉會影響動物的適口性。本試驗(yàn)在前人研究的基礎(chǔ)上，探討不同水平女貞子CO2超臨界萃取物對仔豬斷奶期生長性能、血清生化指標(biāo)和抗氧化功能的影響，從而為女貞子萃取物廣泛應(yīng)用于仔豬飼糧提供理論依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 女貞子萃取物制備 本試驗(yàn)所用的女貞子購于中藥大市場，100目粉碎，采用超臨界CO2萃取法提純。萃取條件為：物料比為1∶1（V/m）的80%乙醇浸潤物料1 h后萃取，壓力28 MPa，溫度45℃，CO2流量為4.8 L/h，萃取時間為3.5 h，得浸膏狀萃取物。利用高效液相色譜分析女貞子萃取物成分，測定其有效成分齊墩果酸含量為6.87%。

1.2 試驗(yàn)動物和試驗(yàn)設(shè)計 試驗(yàn)選擇96頭（28±5）日齡斷奶的健康三元雜交仔豬 （杜×長×大），公、母各半，隨機(jī)分為4個處理，每個處理4個重復(fù)，每個重復(fù)6頭豬。4個處理分別為：（1）基礎(chǔ)日糧（對照組）；（2）基礎(chǔ)日糧+0.05%女貞子萃取物（0.05%LLE 組）；（3）基礎(chǔ)日糧+0.1%女貞子萃取物（0.1%LLE 組）；（4）基礎(chǔ)日糧+0.2%女貞子萃取物（0.2%LLE組）。日糧配方參照NRC（1998）標(biāo)準(zhǔn)配制，日糧組成及營養(yǎng)水平見表1。

1.3 飼養(yǎng)管理與樣品采集 試驗(yàn)豬的飼養(yǎng)管理、免疫消毒等程序按生產(chǎn)常規(guī)進(jìn)行，自由飲水，自由采食，試驗(yàn)期間腹瀉豬不用藥物治療。試驗(yàn)第28天清晨，由每個重復(fù)隨機(jī)選取2頭接近平均體重的仔豬，前腔靜脈采血，3500 r/min離心10 min，分離血清，分裝于1.5 mL Ep管中，編號，-20℃保存?zhèn)溆茫涝缀蟛杉?、肝，制備組織勻漿，測定抗氧化性能。

表1 基礎(chǔ)日糧組成及營養(yǎng)水平（干物質(zhì)基礎(chǔ)）

1.4 測定指標(biāo)和方法 于試驗(yàn)開始后第1天和第28天清晨空腹逐頭稱重，記錄每頭供試仔豬的采食量，以欄為單位計算平均日增重（ADG）、平均日采食量（ADFI）、飼料增重比（F/G）。

檢測仔豬各組織和血清中超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）活性和總抗氧化能力（T-AOC）、丙二醛（MDA）含量。 試驗(yàn)所用的試劑盒均來自南京建成生物工程研究所。

檢測血清中尿素氮（BUN）、總蛋白（TP）、葡萄糖（GLU）、堿性磷酸酶（ALP）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）、谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）的含量，采用的試劑盒由中生北控生物科技股份有限公司生產(chǎn)，樣品用意大利FULLY-全自動生化分析儀測定。

1.5 統(tǒng)計分析 數(shù)據(jù)采用SPSS 17.0軟件進(jìn)行方差分析和多重比較，以P＜0.05作為差異顯著性判斷標(biāo)準(zhǔn)，結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤表示。

2 結(jié)果

2.1 女貞子萃取物對斷奶仔豬生長性能的影響由表2可知，與對照組相比，各試驗(yàn)組的平均日增重、平均日采食量都有升高的趨勢，料重比有降低的趨勢，但差異均不顯著（P＞0.05）。

2.2 女貞子萃取物對斷奶仔豬抗氧化能力的影響

表2 女貞子萃取物對斷奶仔豬生長性能的影響

2.2.1 對斷奶仔豬組織及血清中MDA含量的影響 由表3可知，0.2%LLE組仔豬心臟和肝臟MDA含量顯著低于對照組和0.05%LLE組 （P＜0.05）；0.1%LLE組仔豬肝臟中MDA含量比對照組和0.05%LLE組分別顯著降低14.36%和11.64%（P ＜ 0.05）；0.05%LLE 組仔豬血清中MDA含量顯著低于其他三組，分別降低21.96%、16.06%和 15.37%（P＜0.05）。

表3 女貞子萃取物對斷奶仔豬組織及血清中MDA含量的影響

2.2.2 對斷奶仔豬組織及血清中SOD活性的影響 由表4可知，與對照組相比，0.1%LLE和0.2%LLE試驗(yàn)組仔豬心臟和肝臟中SOD活性分別顯著提高3.33%、4.22%（P＜0.05）和5.04%、7.34%（P＜0.05），0.05%LLE組有所提高，但差異不顯著（P＞0.05）；對于仔豬血清中SOD活性，各試驗(yàn)組相對于對照組均有所提高，但差異不顯著（P ＞ 0.05）。

表4 女貞子萃取物對斷奶仔豬組織及血清中SOD活性的影響

2.2.3 對斷奶仔豬組織及血清中GSH-Px活性的影響 由表5可知，0.1%LLE和0.2%LLE組仔豬血清中GSH-Px活性分別比對照組顯著提高6.24%和7.78%（P＜0.05）；各試驗(yàn)組仔豬心臟和肝臟中GSH-PX活性相對于對照組均有所提高，但差異不顯著（P＞0.05）。

表5 女貞子萃取物對斷奶仔豬組織及血清中GSH-Px活性的影響

2.2.4 對斷奶仔豬組織及血清中T-AOC水平的影響 由表6可知，與對照組相比，0.05%LLE和0.1%LLE組心臟中T-AOC水平分別顯著提高21.43%和32.14%（P＜0.05）；對于肝臟中 TAOC水平，各試驗(yàn)組相對于對照組均有所提高，但差異不顯著（P＞0.05）；對于血清中T-AOC水平，各試驗(yàn)組均比對照組分別提高11.20%、12.30%和16.30%，其中0.2%LLE組效果最顯著（P ＜ 0.05）。

表6 女貞子萃取物對斷奶仔豬組織及血清中T-AOC水平的影響

2.3 對斷奶仔豬血清生化指標(biāo)的影響 由表7可知，與對照組相比，各添加組仔豬血清GLU水平均有所提高，且0.2%LLE組比對照組顯著提高14.44%（P＜0.05）；各處理組之間TP含量，BUN水平，ALP、ALT和AST活性差異均不顯著（P ＞ 0.05）。

表7 女貞子萃取物對斷奶仔豬血清生化指標(biāo)的影響

3 討論

3.1 不同水平女貞子萃取物對斷奶仔豬生長性能的影響 徐建凱等（2010）研究發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加女貞子可提高斷奶仔豬平均日增重和日采食量。侯磊等（2011）研究表明，女貞子粉及其萃取物有提高仔豬日增重和日采食量，降低料重比的趨勢，在一定程度上可以改善生長性能。本試驗(yàn)研究表明，女貞子萃取物可提高斷奶仔豬平均日增重和平均日采食量，降低料重比，與前人的結(jié)論基本一致。

3.2 不同水平女貞子萃取物對斷奶仔豬抗氧化功能的影響 女貞子的有效成分為齊墩果酸、熊果酸，均屬于三萜類化合物。Tang等（2005）研究發(fā)現(xiàn)，三萜類化合物具有抗氧化的作用。抗氧化功能其根本是消除體內(nèi)由于自由基的產(chǎn)生而引起的對生物膜結(jié)構(gòu)和功能完整性的破壞，其中SOD和GSH-PX能分別達(dá)到去除自由基、催化還原反應(yīng)，是最主要的抗氧化酶類。徐建凱等（2010）研究發(fā)現(xiàn)，女貞子可提高斷奶仔豬血清及組織中SOD和GSH-PX活性。本試驗(yàn)研究表明，在飼糧中分別添加0.1%LLE和0.2%LLE，都能顯著提高心臟和肝臟SOD活性、血清GSH-Px活性。Freeman和Crapo（1982）發(fā)現(xiàn)，應(yīng)激可誘導(dǎo)胞膜內(nèi)生成過量脂質(zhì)過氧化物MDA，MDA又可氧化細(xì)胞膜中不飽和脂肪，導(dǎo)致細(xì)胞膜的完整性受損，因此MDA是機(jī)體內(nèi)氧化還原反應(yīng)的重要檢測指標(biāo)。本試驗(yàn)研究表明，添加0.2%LLE顯著降低心臟和肝臟中MDA含量，添加0.1%LLE顯著降低肝臟MDA含量，添加0.05%LLE可顯著降低血清MDA含量。這與徐建凱等（2010）及郭曉秋等（2007）等在仔豬和肉仔雞中研究結(jié)果相符。T-AOC表示的是機(jī)體內(nèi)抗氧化物質(zhì)的總體抗氧化能力。本試驗(yàn)研究表明，添加不同水平LLE均能不同程度能提高組織和血清T-AOC水平。

3.3 不同水平女貞子萃取物對斷奶仔豬血清生化指標(biāo)的影響 BUN是蛋白質(zhì)分解的最終產(chǎn)物，也是反映蛋白質(zhì)代謝的重要指標(biāo)。Malmolf（1988）認(rèn)為，血清BUN水平可以反映動物體內(nèi)蛋白質(zhì)與氨基酸之間的平衡狀況，氨基酸平衡良好時血清BUN水平應(yīng)維持在較低的水平。本試驗(yàn)在日糧中添加不同水平LLE均能降低BUN水平，而且以0.1%LLE組效果最為明顯。ALT、AST和ALP三種酶存在于動物的各種組織器官中，當(dāng)機(jī)體受到外界刺激或自身損傷時，這三種酶會逸出細(xì)胞進(jìn)入血液，使血液中這幾種酶的活性升高，因此，血清酶活性的升高表示機(jī)體組織器官受損。本試驗(yàn)結(jié)果表明，在日糧中添加不同水平LLE，三種酶的活性均有降低的趨勢，這與李群道等（2005）在肉雞中的添加女貞子原粉得到的結(jié)果相一致，表明女貞子萃取物可以提高仔豬的抗應(yīng)激能力，具體作用途徑有待進(jìn)一步研究。血清中TP和GLU的含量可反映仔豬對飼料蛋白質(zhì)和淀粉的吸收及代謝程度，本試驗(yàn)結(jié)果表明，添加0.2%LLE可顯著提高血清GLU水平，且不同添加水平的LLE均能提高血清TP含量，以0.1%LLE最為明顯。

4 結(jié)論

仔豬飼糧中添加不同水平女貞子萃取物，均能一定程度上改善仔豬組織和血清的抗氧化能力，提高斷奶仔豬的生長性能，綜合考慮以0.1%為最佳添加量。

[1]郭曉秋，單安山，趙云，等.女貞子水提物對AA肉仔雞抗氧化指標(biāo)的影響[J].動物營養(yǎng)學(xué)報，2007，19（1）：81 ～ 85.

[2]侯磊，單安山，李建平，等.女貞子粉及其萃取物對斷奶仔豬生產(chǎn)性能和免疫功能的影響[J].中國飼料，2011，9：25 ～ 27.

[3]李群道，單安山，馬得瑩，等.女貞子、五味子與寡糖配伍對肉雞抗氧化功能和血液生化指標(biāo)的影響[J].動物營養(yǎng)學(xué)報，2005，17（1）：45 ～ 48.

[4]徐建凱，單安山，李建平，等.女貞子對斷奶仔豬生產(chǎn)性能及抗氧化功能的影響[J].東北農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報，2010，41（4）：76 ～ 81.

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