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    菊糖抗氧化活性及其機(jī)理

    2015-11-11 02:38:04劉德萍吳平
    關(guān)鍵詞:菊糖存活率自由基

    劉德萍,吳平

    (江南大學(xué)直屬附屬醫(yī)院(無(wú)錫市第四人民醫(yī)院),江蘇無(wú)錫214062)

    菊糖抗氧化活性及其機(jī)理

    劉德萍,吳平*

    (江南大學(xué)直屬附屬醫(yī)院(無(wú)錫市第四人民醫(yī)院),江蘇無(wú)錫214062)

    通過(guò)測(cè)定菊糖的還原能力、Fe2+螯合能力,以及DPPH自由基清除能力等方法,評(píng)價(jià)菊糖的抗氧化能力,并采用Caco-2細(xì)胞模型探討其抗氧化機(jī)理。3種抗氧化活性實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,菊糖具有良好的抗氧化活性。與陽(yáng)性對(duì)照組比較,菊糖對(duì)H2O2誘導(dǎo)的Caco-2細(xì)胞氧化損傷具有顯著的保護(hù)作用。當(dāng)菊糖質(zhì)量濃度為0.8 mg/mL時(shí),Caco-2細(xì)胞中過(guò)氧化氫酶、谷胱甘肽還原酶,以及谷胱甘肽過(guò)氧化物酶的活力,分別提高了35.8%,47.6%和61.2%。菊糖主要通過(guò)提高細(xì)胞內(nèi)抗氧化酶的活力發(fā)揮其抗氧化作用。

    菊糖;抗氧化活性;Caco-2細(xì)胞模型;機(jī)制

    菊糖,又名菊粉、菊苣多糖,是D-果糖經(jīng)β(2→1)鍵連接的鏈狀果聚糖,末端常含有一個(gè)葡萄糖基,一般從菊苣或菊芋中提取獲得[1]。菊糖作為一種水溶性很好的膳食纖維,具有很多促進(jìn)人體健康的生理功能。例如,具有低熱量、非胰島素依賴性、非齲齒性等特點(diǎn),適于糖尿病患者食用;菊糖還可降低血液中膽固醇和甘油三酯的含量,可用來(lái)減肥、預(yù)防心血管疾病和高膽固醇血癥;也可作為雙歧桿菌增殖因子,調(diào)節(jié)腸道功能,預(yù)防結(jié)腸癌等。此外,菊糖持水性高,可預(yù)防便秘,可廣泛應(yīng)用于開(kāi)發(fā)臨床營(yíng)養(yǎng)治療產(chǎn)品、功能性食品和保健品等[2]。

    目前,大量研究結(jié)果顯示,部分植物多糖如黃芪多糖[3]、大蒜多糖[4-5]等具有清除自由基、抑制脂質(zhì)氧化及提高抗氧化酶活性的功能。目前,已有部分文獻(xiàn)報(bào)道菊糖具有抗氧化活性[6-7],但對(duì)其抗氧化機(jī)理探討還鮮見(jiàn)報(bào)道。國(guó)內(nèi)外營(yíng)養(yǎng)學(xué)研究表明,活性多糖的抗氧化作用主要是清除體內(nèi)自由基、提高抗氧化酶活性及抑制脂質(zhì)過(guò)氧化等,多數(shù)活性多糖的抗氧化機(jī)理可能是調(diào)控Nrf2-Keap1-ARE信號(hào)通路[8]。作者利用3種體外方法和Caco-2細(xì)胞模型對(duì)菊糖抗氧化功能進(jìn)行分析,并探討菊糖抗氧化活性作用機(jī)理,為今后菊糖在醫(yī)藥及保健品開(kāi)發(fā)方面的應(yīng)用提供依據(jù)。

    1 實(shí)驗(yàn)器材

    1.1材料與試劑

    菊糖ORFTITMHP型,江南大學(xué)食品學(xué)院提供;磷酸緩沖液、無(wú)水乙醇、三氯乙酸、氯化高鐵(FeCl3· H2O)、七水合硫酸亞鐵、H2O2(體積分?jǐn)?shù)30%)、NaOH,購(gòu)自國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司;鐵氰化鉀,上海試劑一廠產(chǎn)品;DPPH(1,1-二苯基苦基苯肼)、Ferrizine試劑,Sigma公司產(chǎn)品;DMEM培養(yǎng)基、胎牛血清、鏈霉素、青霉素、非必需氨基酸,美國(guó)Gibco公司產(chǎn)品;質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.25%胰酶(含EDTA)、Triton X-100過(guò)氧化氫酶(CAT)、谷胱甘肽氧化酶(GSH-Px)、谷胱甘肽還原酶(GSH-Rx),碧云天生物技術(shù)研究所研制;其他各種分析純?cè)噭?,?guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司產(chǎn)品。

    1.2儀器與設(shè)備

    722型可見(jiàn)分光光度計(jì),上海精密儀器有限公司制造;UV-2100型紫外可見(jiàn)分光光度計(jì),尤尼柯儀器有限公司制造;AKTATM蛋白質(zhì)分析純化系統(tǒng),瑞士Amersham Bioscences公司制造;J-26XPI型高效冷凍離心機(jī),美國(guó)BECKMAN公司制造;細(xì)胞培養(yǎng)瓶及培養(yǎng)板,美國(guó)Corning公司制品;CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱、Nano drop 2000型分光光度儀,美國(guó)ThermoForma公司制造;細(xì)胞刮刀,上海耐思生物公司制品;BIOsafe12型生物安全柜,中國(guó)HealForce公司制造;恒溫水浴鍋,上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司制造;MS3digital漩渦震蕩器、搖床,德國(guó)IKA公司制造;U410型超低溫冷凍冰箱,美國(guó)New Brunswick Scientific公司制造;4000 mini型Image Quant LAS,美國(guó)GE公司制造;倒置顯微鏡,日本OLY MPUS公司制造;臺(tái)式高速冷凍離心機(jī)、PCR儀,德國(guó)Eppedorf公司制造。

    2 實(shí)驗(yàn)方法

    2.1還原能力的測(cè)定

    將菊糖樣品配制成質(zhì)量濃度分別為1、5、10、25、50 mg/mL的溶液,各取出2 mL作為樣品待測(cè)溶液,分別加入0.2 mol/L pH 6.6的磷酸鹽緩沖液2 mL,質(zhì)量分?jǐn)?shù)10%的鐵氰化鉀(K3Fe(CN)6)溶液2 mL混勻,50℃水浴中保溫20 min,接著加入體積分?jǐn)?shù)10%的三氯乙酸(TCA)溶液2 mL,振蕩混勻后離心(1 000 r/min)。再各取去沉淀后的上清液2 mL加入2 mL去離子水和0.4 mL質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.1%的FeCl3溶液,振蕩混勻后在50℃水浴下保溫10 min,溶液慢慢由黃色變?yōu)樯钏{(lán)色,在波長(zhǎng)700 nm下進(jìn)行比色。樣品空白對(duì)照為去離子水。測(cè)定值取3次平行測(cè)定的平均值。

    2.2螯合金屬離子能力的測(cè)定

    Fe2+螯合能力測(cè)定[10]方法:配制質(zhì)量濃度分別為1、5、10、25、50 mg/mL的菊糖溶液,從中分別取出0.5 mL樣品液,以等體積去離子水代替樣品液作空白對(duì)照,吸光值為A,所有測(cè)定值為3次平均值。配制FeCl2溶液濃度為0.25、0.20、0.15 mmol/L,加入至各質(zhì)量濃度樣品測(cè)量吸光值。螯合率按公式(1)計(jì)算:

    式(1)中,Ac為去離子水吸光值,Ay為加入FeCl2溶液的菊糖樣品液吸光值。

    2.3DPPH自由基捕獲能力的測(cè)定

    DPPH自由基捕獲能力的測(cè)定[11]方法:配置0.1 mmol/L DPPH溶液(溶于體積分?jǐn)?shù)95%的乙醇),樣品組菊糖質(zhì)量濃度分別為1、5、10、25、50 mg/ mL,稱取不同質(zhì)量濃度的樣品溶于2 mL去離子水中,加入2 mL DPPH溶液,避光反應(yīng)25 min;陽(yáng)性對(duì)照組為2 mL DPPH溶液加入2 mL去離子水(代替樣品),空白組為等體積去離子水和體積分?jǐn)?shù)95%乙醇混合液。在波長(zhǎng)517 nm處分別測(cè)定吸光值A(chǔ)i、Aj、A0。清除率按公式(2)計(jì)算:

    式(2)中,Ai為樣品組吸光值,Aj為空白組吸光值,A0為對(duì)照組吸光值。

    2.4Caco-2細(xì)胞培養(yǎng)

    將Caco-2細(xì)胞培養(yǎng)于含體積分?jǐn)?shù)20%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基中,培養(yǎng)溫度37℃,CO2體積分?jǐn)?shù)5%,隔天換一次培養(yǎng)液。本實(shí)驗(yàn)中所采用的細(xì)胞傳代數(shù)均為15~55代。Caco-2細(xì)胞長(zhǎng)滿培養(yǎng)瓶底約85%面積時(shí),吸去培養(yǎng)基,加入PBS清洗兩次,加入消化液1 mL,消化2~3 min后,吹打至細(xì)胞呈單個(gè)懸浮狀,以1×106個(gè)/孔的密度接種到培養(yǎng)板中,隔天換液。當(dāng)Caco-2細(xì)胞鋪滿培養(yǎng)板底約85%面積時(shí)進(jìn)行各項(xiàng)指標(biāo)測(cè)定。

    2.5Caco-2細(xì)胞體外氧化損傷模型的建立

    按照2.4中Caco-2細(xì)胞培養(yǎng)方法,待細(xì)胞長(zhǎng)至培養(yǎng)板底面積85%左右時(shí),吸去培養(yǎng)基,PBS清洗兩次,再加入不含血清的培養(yǎng)基。每孔加入濃度不同的H2O2,使終濃度為0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 mmol/ L,作用4 h后檢測(cè)細(xì)胞存活率。每組實(shí)驗(yàn)設(shè)置3個(gè)平行,以無(wú)任何處理的Caco-2細(xì)胞的存活率作為100%。

    2.6細(xì)胞存活率檢測(cè)

    采用WST-1法檢測(cè)細(xì)胞存活率,當(dāng)48孔中Caco-2細(xì)胞培養(yǎng)結(jié)束后,每孔加入100 μL培養(yǎng)液,再加入10 μL WST-1試劑,培養(yǎng)30 min后于450 nm處測(cè)定每孔吸光值。以無(wú)任何處理的Caco-2細(xì)胞組為對(duì)照組,按公式(3)計(jì)算細(xì)胞存活率

    式(3)中,A450為實(shí)驗(yàn)組的吸光值,A'450為對(duì)照組的吸光值。

    2.7菊糖對(duì)Caco-2細(xì)胞的抗氧化保護(hù)作用

    待Caco-2細(xì)胞長(zhǎng)滿培養(yǎng)板底85%左右面積時(shí),吸去培養(yǎng)基,用PBS清洗兩次,加入不含血清的培養(yǎng)基,接著分為4組進(jìn)行處理比較。

    1)陰性Caco-2細(xì)胞對(duì)照組(NEG):只加入不含胎牛血清的培養(yǎng)基;

    2)陽(yáng)性Caco-2細(xì)胞對(duì)照組(POS):在培養(yǎng)基中加入H2O2,終濃度為1 mmol/L;

    3)正常Caco-2細(xì)胞實(shí)驗(yàn)組:加入含有不同質(zhì)量濃度的菊糖培養(yǎng)基孵育細(xì)胞2 h后,吸去舊培養(yǎng)基,接著用PBS清洗,最后加入含H2O2的培養(yǎng)基;

    4)加入菊糖的Caco-2細(xì)胞對(duì)照組:加入含有不同質(zhì)量濃度菊糖的培養(yǎng)基,細(xì)胞孵育6 h,按照WST-1法檢測(cè)細(xì)胞存活率,陰性對(duì)照組的細(xì)胞存活率為100%。

    2.8細(xì)胞內(nèi)氧化還原酶系指標(biāo)的測(cè)定

    分別按紫外比色法檢測(cè)過(guò)氧化氫酶、谷胱甘肽還原酶、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶的活力。

    2.9數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計(jì)方法

    采用GraphPad Prism○R5 package軟件制圖,實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用t-test法比較兩組間差異。

    3 結(jié)果與討論

    3.1還原能力

    如圖1所示,不同質(zhì)量濃度菊糖樣品溶液(1、5、10、25、50 mg/mL)的吸光值在可檢測(cè)范圍內(nèi),而且其還原能力隨著菊糖質(zhì)量濃度的增加而增強(qiáng)。

    圖1 不同質(zhì)量濃度菊糖還原能力Fig.1 Reduction ability of inulin with various concentrations

    3.2螯合金屬離子能力

    過(guò)渡金屬離子鐵離子是非常強(qiáng)的自由基發(fā)生劑,能夠催化各種自由基的生成,如羥基自由基和超氧陰離子自由基。金屬離子的存在使得捕捉自由基的抗氧劑消耗掉。如圖2所示,選取濃度分別為0.15、0.20、0.25 mmol/L的底物FeCl2溶液,在底物FeCl2溶液濃度為0.15 mmol/L時(shí),F(xiàn)e2+螯合率大約在4.5%~10%;底物FeCl2溶液濃度為0.20 mmol/L時(shí),F(xiàn)e2+螯合率大約在15.8%~17.8%;底物FeCl2溶液濃度為0.25 mmol/L時(shí),F(xiàn)e2+螯合率約在16.8%~21.7%。隨著菊糖濃度增加,二價(jià)鐵離子的螯合能力逐漸增強(qiáng),且隨著底物濃度的增加,同一質(zhì)量濃度菊糖的二價(jià)鐵離子的螯合能力也逐步增強(qiáng)。

    3.3DPPH自由基的捕獲能力

    DPPH·(1,1-二苯基苦基苯肼自由基)是一種合成的穩(wěn)定的有機(jī)自由基,主要用來(lái)測(cè)定酚類物質(zhì)和食品的抗氧化活性,多糖的抗氧化活性測(cè)定也可以采用此方法。此變化與抗氧化劑抗氧化能力及其數(shù)量呈定量關(guān)系。

    圖2 不同質(zhì)量濃度菊糖對(duì)金屬離子的螯合能力Fig.2 Metal ions chelating activityof inulin with various concentrations

    如圖3所示,伴隨著菊糖質(zhì)量濃度逐漸增加,DPPH自由基清除率逐步增加,提示隨著菊糖質(zhì)量濃度增加,菊糖抗氧化能力逐漸增強(qiáng)。當(dāng)菊糖質(zhì)量濃度達(dá)到60 mg/mL時(shí),DPPH自由基清除率最高可達(dá)31.2%;當(dāng)質(zhì)量濃度為5 mg/mL時(shí),清除率為4.9%。

    圖3 不同質(zhì)量濃度菊糖對(duì)DPPH自由基的捕獲能力Fig.3 DPPH free radical scavenging activity of inulin with various concentrations

    3.4H2O2誘導(dǎo)Caco-2細(xì)胞氧化損傷模型

    Caco-2細(xì)胞模型是近20年來(lái)國(guó)內(nèi)外廣泛采用的研究藥物小腸吸收的體外模型。它具有培養(yǎng)相對(duì)簡(jiǎn)單、結(jié)果重復(fù)性好及應(yīng)用范圍較廣的優(yōu)點(diǎn)。Caco-2細(xì)胞來(lái)源于人體的直腸癌,結(jié)構(gòu)與功能與人小腸上皮細(xì)胞相似,含有與小腸刷狀緣上皮相關(guān)的酶類,且與人體正常小腸上皮轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)及酶類相似。由圖4可知,0.2~1.0 mmol/L濃度范圍的H2O2作用4 h后對(duì)Caco-2細(xì)胞具有顯著的毒性作用,導(dǎo)致Caco-2細(xì)胞存活率降低;也可以發(fā)現(xiàn)Caco-2細(xì)胞存活率與H2O2濃度呈現(xiàn)負(fù)相關(guān),在H2O2濃度為1.0 mmol/L時(shí),Caco-2細(xì)胞存活率為51.5%,損傷程度較大。為突顯菊糖的抗氧化活性保護(hù)作用,選擇濃度為1.0 mmol/L的H2O2作用于Caco-2細(xì)胞的氧化損傷模型。如果用大于濃度1.0 mmol/L的H2O2作用于Caco-2細(xì)胞,導(dǎo)致Caco-2細(xì)胞存活率更低,作為一種抗氧化保護(hù)劑,抗氧化保護(hù)能力是有限的。

    圖4 不同濃度H2O2對(duì)Caco-2細(xì)胞存活率的影響Fig.4 Effect of H2O2with different concentrations on the viability of Caco-2 cells

    3.5菊糖對(duì)Caco-2細(xì)胞氧化損傷的保護(hù)

    為探討菊糖對(duì)H2O2誘導(dǎo)損傷的Caco-2細(xì)胞的保護(hù)作用,實(shí)驗(yàn)中菊糖與Caco-2細(xì)胞共同孵育6 h。由圖5可知,與對(duì)照組相比,經(jīng)過(guò)0.2~0.6 mg/mL菊糖處理的Caco-2細(xì)胞,細(xì)胞存活率均在86%左右,存活率雖有所下降但無(wú)顯著差異(p>0.05);但經(jīng)過(guò)0.8~1.2 mg/mL菊糖處理的Caco-2細(xì)胞存活率出現(xiàn)下降趨勢(shì),隨著質(zhì)量濃度增加,存活率下降,表現(xiàn)出細(xì)胞毒性作用(p<0.05)。菊糖對(duì)Caco-2細(xì)胞抗氧化保護(hù)作用的雙重性:低質(zhì)量濃度時(shí),菊糖有一定的抗氧化活性,對(duì)細(xì)胞具有抗氧化保護(hù)作用,但質(zhì)量濃度超過(guò)一定的程度,可能也會(huì)使細(xì)胞機(jī)能和形態(tài)發(fā)生改變,從而導(dǎo)致Caco-2細(xì)胞死亡。在一定質(zhì)量濃度范圍內(nèi)會(huì)隨著質(zhì)量濃度增加抗氧化保護(hù)能力逐漸增強(qiáng),但達(dá)到頂峰時(shí),繼續(xù)增加菊糖的質(zhì)量濃度,那將會(huì)導(dǎo)致對(duì)Caco-2細(xì)胞的致死作用強(qiáng)于抗氧化保護(hù)作用。故在研究菊糖的抗氧化機(jī)理時(shí),選用0.2~0.8 mg/mL質(zhì)量濃度的菊糖對(duì)Caco-2細(xì)胞進(jìn)行抗氧化保護(hù)。

    圖5 不同質(zhì)量濃度菊糖對(duì)Caco-2細(xì)胞存活率的影響Fig.5Effects of inulin with different concentrations onthe viability of Caco-2 cells

    3.6菊糖對(duì)過(guò)氧化氫酶活力的調(diào)節(jié)

    從圖6可知,與陰性對(duì)照組比較,只加入H2O2的Caco-2細(xì)胞中,過(guò)氧化氫酶活力降低。與陽(yáng)性對(duì)照組比較,加入0.2~0.8 mg/mL的菊糖處理后再加入H2O2的Caco-2細(xì)胞中,過(guò)氧化氫酶的活力分別提高了7.8%、15.9%、24.7%和35.8%。0.4~0.8 mg/ mL 3組與陽(yáng)性對(duì)照組比較,過(guò)氧化氫酶活力顯著提高(p<0.05);與陰性對(duì)照組相比,無(wú)顯著性差異;只接受0.8 mg/mL菊糖處理組,過(guò)氧化氫酶活力稍降低,無(wú)顯著性差異。

    圖6 不同質(zhì)量濃度菊糖對(duì)過(guò)氧化氫酶活力的影響Fig.6 Effects of inulin with different concentrations oncatalase activity

    3.7菊糖對(duì)谷胱甘肽還原酶活力的調(diào)節(jié)

    從圖7可以得知,與陰性對(duì)照組比較,只加入H2O2的Caco-2細(xì)胞中GSH-Rx酶活力降低。與陽(yáng)性對(duì)照組比較,加入0.2~0.8 mg/mL的菊糖處理后再加入H2O2的Caco-2細(xì)胞中,GSH-Rx酶活力分別提高了10.5%、31.6%、33.5%及37.6%。0.4~0.8 mg/ mL 3組與陽(yáng)性對(duì)照組比較,過(guò)氧化氫酶活力顯著提高(2<0.05);與陰性對(duì)照組相比,無(wú)顯著性差異;只接受0.8 mg/mL菊糖處理組,GSH-Rx酶活力稍提高,無(wú)顯著性差異。

    圖7 不同質(zhì)量濃度菊糖對(duì)谷胱甘肽還原酶活力的影響Fig.7Effects of inulin with different concentrations onglutathione reductase(GSH-Rx)activity

    3.8菊糖對(duì)谷胱甘肽過(guò)氧化物酶活力的調(diào)節(jié)

    從圖8可以得知,與陰性對(duì)照組比較,只加入H2O2的Caco-2細(xì)胞中GSH-Px活力降低。與陽(yáng)性對(duì)照組比較,加入0.2~0.8 mg/mL的菊糖處理后再加入H2O2的Caco-2細(xì)胞中,GSH-Px酶活力分別提高了1.9%、8.4%、29.7%及100.1%。0.6~0.8 mg/mL兩組與陽(yáng)性對(duì)照組比較,過(guò)氧化氫酶活力顯著提高(p<0.05);與陰性對(duì)照組相比,無(wú)顯著性差異;只接受0.8 mg/mL菊糖處理組,無(wú)顯著性差異。

    圖8 不同質(zhì)量濃度菊糖對(duì)谷胱甘肽過(guò)氧化物酶活力的影響Fig.8 Effects of inulin with different concentrations on glutathione peroxidase(GSH-Px)activity

    4 結(jié)語(yǔ)

    通過(guò)測(cè)定菊糖對(duì)鐵離子的還原能力、DPPH自由基清除能力及金屬離子螯合能力,證實(shí)了菊糖具有一定的抗氧化活性,而且隨著菊糖質(zhì)量濃度增大抗氧化活性逐漸增強(qiáng)。以Caco-2細(xì)胞為體外氧化損傷模型,探討菊糖對(duì)H2O2誘導(dǎo)損傷細(xì)胞內(nèi)抗氧化酶活力的調(diào)節(jié)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,菊糖可通過(guò)提高細(xì)胞內(nèi)的過(guò)氧化氫酶、谷胱甘肽還原酶及谷胱甘肽過(guò)氧化物酶活力,從而實(shí)現(xiàn)抗氧化保護(hù)作用。

    菊糖是一種天然碳水化合物,對(duì)人體有特殊的生理功能,目前己被世界上多個(gè)國(guó)家批準(zhǔn)為食品營(yíng)養(yǎng)增補(bǔ)劑。日本厚生省批準(zhǔn)菊糖為特定保健食品,美國(guó)食品和藥物管理局批準(zhǔn)菊糖為公認(rèn)的安全級(jí)配料,歐洲則把它作為控制人血液膽固醇水平的功能性甜味劑廣泛應(yīng)用。我國(guó)對(duì)菊糖的研究始于20世紀(jì)90年代,在很長(zhǎng)一段時(shí)間內(nèi)停留在實(shí)驗(yàn)室階段。因此,下一階段有必要開(kāi)展其生理活性與臨床應(yīng)用研究,如保護(hù)臟器氧化損傷、降低糞臭素、影響下丘腦神經(jīng)元以及菊糖過(guò)敏癥等,為其在消化、內(nèi)分泌、心血管疾病,以及腫瘤等的臨床防治提供理論依據(jù)。

    [1]烏日娜,朱軼霞,于永奇,等.菊芋的研究性狀及開(kāi)發(fā)潛力[J].草業(yè)科學(xué),2013,30(8):1295-1300.

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    Studies on the Antioxidant Activity of Inulin and Its Mechanism

    LIU Deping,WU Ping*
    (Affiliated Hospital of Jiangnan University,Wuxi 214000,China)

    The antioxidant activity of inulin was evaluated by the studies of the reduction ability,F(xiàn)e2+-chelating activity and DPPH free radical scavenging activity.The mechanism of its antioxidant activity was investigated using the Caco-2 cell monolayer model.Three different antioxidant activity assays showed that inulin exhibited good antioxidant activity.A significant protective effect of inulin on H2O2induced oxidative stress in Caco-2 cells was observed in comparison with the positive controls.With the treatment of 0.8 mg/mL insulin,the activities of superoxide dismutase,catalase and glutathione peroxidase were increased by 35.8%,47.6%,and 61.2%,respectively.The antioxidant activity of inulin takes effect mainly by activing the intracellular antioxidant enzymes.

    Inulin,antioxidant activity,the Caco-2 cell monolayer model,mechanism

    TS 201.4

    A

    1673—1689(2015)09—1002—06

    2015-03-23

    劉德萍(1962—),女,吉林長(zhǎng)春人,主管護(hù)師,主要從事?tīng)I(yíng)養(yǎng)護(hù)理及臨床實(shí)踐研究。E-mail:23368058@qq.com

    吳平(1981—),女,江蘇南通人,工學(xué)碩士,主治醫(yī)師,主要從事臨床營(yíng)養(yǎng)治療及研究。E-mail:wuping_1981@163.com

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