接塵工人血清中人表皮生長(zhǎng)因子受體3抗體的表達(dá)水平

晉曉飛，郝長(zhǎng)付，姚 武

(鄭州大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院勞動(dòng)衛(wèi)生與職業(yè)病學(xué)教研室 河南鄭州 450001)

接塵工人血清中人表皮生長(zhǎng)因子受體3抗體的表達(dá)水平

晉曉飛，郝長(zhǎng)付，姚 武

(鄭州大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院勞動(dòng)衛(wèi)生與職業(yè)病學(xué)教研室 河南鄭州 450001)

目的:觀察人表皮生長(zhǎng)因子受體3抗體在接塵工人血清內(nèi)的表達(dá)水平及其與塵肺病的關(guān)系。方法:采集159例接塵工人和85例健康對(duì)照者的外周靜脈血，應(yīng)用雙位點(diǎn)夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測(cè)血清中HER3-Ab的含量。結(jié)果:健康對(duì)照組血清HER3抗體含量為(1.29±1.83)mg/L，接塵工齡＜5年組和≥5年組人群血清HER3抗體含量分別為(3.72±7.17)mg/L和(9.96±21.86)mg/L，各組間人群血漿HER3-Ab的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。結(jié)論:自身免疫抗體HER3-Ab的表達(dá)水平與接塵有關(guān)。

塵肺;抗體:人表皮生長(zhǎng)因子受體3抗體

塵肺病是由生產(chǎn)性粉塵引起的肺組織彌漫纖維化為主的全身性疾病，長(zhǎng)期以來(lái)我國(guó)已采取了大量措施來(lái)預(yù)防、控制生產(chǎn)性粉塵的危害，并取得了一定的成效，但塵肺病目前仍是我國(guó)職業(yè)病中發(fā)病率最高、死亡率較大、對(duì)勞動(dòng)者危害最嚴(yán)重的一類［1］。塵肺病所致的肺纖維化是一個(gè)長(zhǎng)期慢性的過(guò)程，目前尚無(wú)將其消除或是逆轉(zhuǎn)的根治方法，只能根據(jù)病情進(jìn)行綜合醫(yī)治以減輕癥狀、延緩病情的進(jìn)展。積極預(yù)防并盡早的診斷對(duì)于提高病人的生存質(zhì)量及延長(zhǎng)壽命尤為重要［2］。矽肺的發(fā)病機(jī)制目前雖尚無(wú)明確定論，為了認(rèn)清塵肺病的發(fā)生發(fā)展和演進(jìn)過(guò)程，國(guó)內(nèi)外已有學(xué)者提出了多種研究策略［3］。早在六七十年代，有研究者已著手塵肺與機(jī)體免疫方面的研究，發(fā)現(xiàn)塵肺病患者體內(nèi)存在多種免疫異常，其以不同的方式參與了粉塵與機(jī)體的相互作用，而且矽肺患者機(jī)體內(nèi)存在自身抗體，即發(fā)生了自身免疫反應(yīng)［4，5］。人表皮生長(zhǎng)因子受體3(HER3)抗體在胃癌、口腔癌、前列腺癌、乳腺癌等腫瘤中常與 HER2一起出現(xiàn)過(guò)度表達(dá)［6，7］，參與自身免疫反應(yīng)，但在肺纖維化方面的研究目前還很少。因此本研究對(duì)159名接塵人員和85名非接塵人員的血清的HER3-Ab含量進(jìn)行了檢測(cè)，探討其與塵肺病的關(guān)系。

1 材料與方法

1.1 研究對(duì)象 中國(guó)平煤神馬集團(tuán)體檢的、正在接塵的159例男性煤礦工人，年齡20～55歲，平均年齡(34.03±8.30)歲，均為掘進(jìn)車間井工，接塵工齡1～38年，接塵工齡中位數(shù)為5年。根據(jù)接塵工齡分為兩組:接塵年限 ＜5年組年齡20～44歲，平均年齡為(29.14±5.688)歲，平均年限為(1.81±0.935)年;接塵年限≥5年組年齡22～55歲，平均年齡為(38.86±7.625)歲，平均年限為(13.35±9.736)。對(duì)照組:同期體檢的男性崗前人群85例，無(wú)粉塵接觸職業(yè)史，均排除心、腦、肝、腎等臟器的纖維化疾病以及免疫性疾病，年齡19 ～40歲，平均年齡為(27.52±4.95)歲。

1.2 樣品采集 全部研究對(duì)象取清晨空腹靜脈血2 ml，靜置 30 min后，離心分離血清(1000 r/min，10 min)，置－20℃保存待用。

1.3 血清HER3-Ab的檢測(cè) 采用雙位點(diǎn)夾心酶聯(lián)免疫吸附法即ELISA法，測(cè)定血清自身免疫抗體HER3-Ab的含量，人血清自身免疫抗體HER3-Ab試劑盒由安迪生物科技(上海)有限公司生產(chǎn)，分析儀器為TECAN SUNR ISE REMOTE型酶標(biāo)儀。操作均嚴(yán)格按照說(shuō)明書進(jìn)行，質(zhì)量控制和定標(biāo)結(jié)果均在要求范圍內(nèi)。

1.4 統(tǒng)計(jì)方法 采用SPSS 12.0統(tǒng)計(jì)軟件包對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，計(jì)數(shù)數(shù)據(jù)以(中位數(shù)±四分位數(shù)間距)表示，進(jìn)行秩和檢驗(yàn)，計(jì)量數(shù)據(jù)以四格表形式表示，進(jìn)行 χ2檢驗(yàn)，檢驗(yàn)水準(zhǔn)為 α=0.05。

2 結(jié)果

2.1 不同組別人群血漿中HER3-Ab抗體濃度的比較 接塵組人群按接塵時(shí)間進(jìn)行分組，由于接塵中位時(shí)間為5年，所以分為≥5年組和＜5年組。表1可見，各組間人群血漿HER3抗體濃度的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。兩兩比較可發(fā)現(xiàn)，＜5年組人群血漿HER3抗體濃度高于對(duì)照組，且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.017);≥5年組人群抗體濃度也高于對(duì)照組，且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.017);≥5年組人群血漿抗體濃度均高于＜5年組，且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.017)。

表1 不同組別人群血漿中HER3抗體濃度比較(中位數(shù)±四分位數(shù)間距)

2.2 接塵組不同年齡工人血清中自身免疫抗體HER3-Ab含量及其與年齡的相關(guān)性分析 表2可見各年齡組人群血漿HER3抗體濃度不同，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。兩兩比較可發(fā)現(xiàn)，30～40年組與＜30年組比較血漿HER3抗體濃度無(wú)差異，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.017);≥40年組與＜30年組比較血漿抗HER3抗體濃度有差異，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.017);≥40年組與30～40年組比較比較血漿HER3抗體濃度不同，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.017)。

表2 接塵組不同年齡工人血清中HER3抗體含量比較(中位數(shù)±四分位數(shù)間距)

2.3 吸煙對(duì)接塵組血清中自身免疫抗體HER3-Ab含量的影響 采用二元logistic分析方法分析吸煙是否對(duì)接塵組的血清中的HER3-Ab含量是否有影響，由表3可見吸煙變量對(duì)接塵組的血清中的HER3-Ab含量的影響無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。

表3 logistic方程中的變量

3 討論

塵肺是一種以肺纖維化為主要病變的慢性疾病，它的發(fā)生發(fā)展與機(jī)體自身內(nèi)外因素密切相關(guān)，纖維化實(shí)質(zhì)上是機(jī)體對(duì)肺損傷的一種修復(fù)機(jī)制，與多種纖維化有關(guān)的自身免疫抗體密切相關(guān)，它們的表達(dá)反映了受損害程度的大小，預(yù)示了疾病發(fā)展的結(jié)局，在早期的異常表達(dá)亦可做為判斷預(yù)防控制疾病的預(yù)警信息。塵肺患者出現(xiàn)自身抗體，其機(jī)理可能與巨噬細(xì)胞的吞噬活動(dòng)有關(guān)，煤塵細(xì)胞的毒作用使巨噬細(xì)胞吞噬煤塵后變性、壞死、崩解。巨噬細(xì)胞的自身崩解，使細(xì)胞核內(nèi)多種抗體成分暴漏，產(chǎn)生自身免疫抗體。自身抗體含量的升高可反映機(jī)體免疫應(yīng)答的失調(diào)。煤礦工人塵肺和進(jìn)行性大塊肺纖維化的血清學(xué)變化顯示塵肺患者的自身免疫抗體水平比正常人高的多。本次研究的目的就在于探討自身免疫抗體HER3抗體在塵肺病早期變化中表達(dá)水平的變化及其意義，探討其做為肺纖維化早期診斷指標(biāo)的可能性。

當(dāng)EGFR的胞外區(qū)與之相應(yīng)的配體如EGF等結(jié)合后，受體發(fā)生二聚化，激活胞內(nèi)區(qū)的RTK，激酶使受體自身或底物蛋白上的酪氨酸磷酸化后引起一系列的信號(hào)傳導(dǎo)級(jí)聯(lián)反應(yīng)，主要是通過(guò)PI3K途徑、MAPK途徑、STAT途徑等，最終引起DNA的復(fù)制、細(xì)胞的分裂與增殖等生物效應(yīng)［6］。因此這次的研究有很強(qiáng)創(chuàng)新性和實(shí)用性。本研究結(jié)果表明接塵工人血清的HER3-Ab含量高于對(duì)照組，這表明，接塵工人血清的HER3-Ab可能與粉塵暴露之間存在一定的關(guān)系，有成為粉塵暴露生物監(jiān)測(cè)指標(biāo)的可能性，但其具體機(jī)制尚不明確，仍需進(jìn)行進(jìn)一步的研究。同時(shí)研究結(jié)果顯示接塵工人血清中HER3-Ab的含量與接塵工齡之間有關(guān)，但是還需要進(jìn)一步的研究以證實(shí)這種相關(guān)性的存在，這對(duì)于粉塵的暴露及塵肺的診斷有十分積極的意義。接塵工人血清中HER3-Ab的含量與年齡之間有關(guān)，與工齡之間的結(jié)果一致。但未發(fā)現(xiàn)接塵工人血清中HER3-Ab的含量與吸煙之間存在相關(guān)性，這需要在以后的研究中收集詳細(xì)的粉塵暴露資料來(lái)闡明。

綜上本次研究提示，自身免疫抗體HER3-Ab表達(dá)水平與接塵有關(guān)，因此具有作為監(jiān)測(cè)粉塵暴露的指標(biāo)，亦可考慮作為作為早期篩查塵肺高危人群的指標(biāo)的研究意義。

［1］ 李德鴻.我國(guó)塵肺防治工作55年［J］.現(xiàn)代職業(yè)安全，2005，(5):26-28.

［2］ Maestrelli P，Guarnieri.Diagnosis of occupational chronic pulmonary diseases［J］.G ital Med Lav Ergon.2010，32(4):1 33-436.

［3］ Okamoto T，Mukai Y，Yoshioka Y，et al.Optimal construction of nonimmune scFv phage display libraries from mouse bone marrow and spleen established to select specific scFvs efficiently binding to antigen［J］.Biochem Biophys Res Commun.2004，323(2):583-579.

［4］ Lee H W，Lee S H，Park K J，et al.Design and validation of a synthetic VH repertoire With tailored diversity for protein recognition［J］.2006，19(5):413-422.

［5］ Richard M，Perreault J，Gane P，et al.Phage-derived monoclonal anti-Lu［J］.Transfusion.2006，46(6):1011-1017.

［6］ Yarden Y，Sliwkowski M X.Untanling the ErbB signalling network［J］.Nat ReV MoI Cell Biol，2001，2(2):127.

［7］ Klapper L N ，Kirschbaum M H，Sela M，et al.Biochemical and clinical implications of the ErbB/HER signaling network of growth factor receptors［J］.Adv Cancer Res，2000，77:25-79.

HER3-Ab serum level in dust exposed workers

JIN Xiao-fei，HAO Chang-fu，YAO Wu
(Department of Occupational Health and Occupational Disease，Public Heath College，Zhengzhou University，Zhengzhou 450001，China)

Objective:To observe the level of HER3-Ab in serum of coal workers，and to discuss the role in pneumoconiosis.Methods:159 exposed workers and 85 healthy subjects were selected.Then use ELISA to detect the serum HER3-Ab of all cases.Results:The serum HER3 antibody of healthy control group，＜5 years exposure group and ≥ 5 years group was(1.29±1.83)mg/L，(3.72±7.17)mg/L and(9.96±21.86)mg/L.There was significant differences in them(P ＜0.05).Conclusion:The expression of HER3-Ab was related to dust exposure.

pneumoconiosis;antibody;HER3-Ab

R 392

B

10.3969/j.issn.1004-437X2012.03.006

2012-08-12;

2012-09-13

國(guó)家自然科學(xué)基金資助課題(81072278)。

晉曉飛(1985－)，男，河南靈寶人，在讀碩士研究生，

研究方向:職業(yè)性肺部疾病的防治。

姚武(1962－)，男，教授，博士生導(dǎo)師，E-mail:yaowu@zzu.edu.cn。

1004-437X(2012)03-0274-03