復(fù)方多西環(huán)素緩釋藥膜的制備與臨床應(yīng)用

陳 福 ，陳松軍 ，陳才軍

(1.浙江省舟山醫(yī)院，浙江 舟山 316004; 2.浙江省舟山市食品藥品檢驗所，浙江 舟山 316000)

牙周炎、冠周炎為口腔常見病、多發(fā)病，目前臨床主張盡量采用局部用藥，并認為控、緩釋抗菌藥物是較理想的劑型。多西環(huán)素對牙周炎有較好的治療作用[1]，替硝唑?qū)ρ乐艽褒l盲袋內(nèi)的厭氧菌有強大的抑制和殺滅作用[2]。為此，我院制備了復(fù)方多西環(huán)素緩釋藥膜，經(jīng)臨床應(yīng)用觀察，對治療牙周炎、冠周炎有顯著的療效?，F(xiàn)報道如下。

1 儀器與試藥

Agilent 1100型高效液相色譜儀。鹽酸多西環(huán)素(武漢合中生化制造有限公司);替硝唑(珠海蔚藍醫(yī)藥有限公司);多西環(huán)素對照品(中國藥品生物制品檢定所，批號為0485－9901，含量86.0%);替硝唑?qū)φ掌?中國藥品生物制品檢定所，批號100336 －200402，含量 100.0%);聚乙烯醇(PVA，江蘇啟東精細化工廠，相對分子質(zhì)量8×104，平均聚合度為1 750±50);羧甲基纖維素鈉(CMC－Na，武漢健民藥業(yè)集團股份有限公司)。

2 方法與結(jié)果

2.1 處方與制備

2.1.1 處方

多西環(huán)素2 g，替硝唑3 g，聚乙烯醇12 g，羧甲基纖維素鈉8 g，甘露醇，甘油，糖精鈉1 g，純化水適量。

2.1.2 制備

稱取聚乙烯醇，用適量純化水浸泡，溶脹24 h，在水浴上加熱溶解成膠狀，加羧甲基纖維素鈉攪拌溶解，待用;稱取多西環(huán)素、替硝唑，加甘油和適量純化水，研勻，再加入到已溶解的成膜材料漿液中，加入甘露醇、糖精鈉的水溶液，攪拌均勻，置約60℃水浴中保溫、脫泡30 min，將膜料傾入預(yù)先用75%乙醇搽洗的玻璃板上，鋪成2 000 cm2的藥膜，放置于10萬級潔凈室中，待自然干燥后，分割成2 cm×2 cm的小片(每片約含多西環(huán)素4 mg和替硝唑6 mg)，密封、包裝即得。

2.2 一般質(zhì)量控制

2.2.1 性狀

本品為淡黃色半透明薄膜，有一定的韌性。

2.2.2 鑒別

在含量測定項下記錄的色譜圖中，供試品溶液主峰(替硝唑、多西環(huán)素)保留時間與對照品溶液主峰保留時間一致。

2.2.3 檢查

應(yīng)符合2010年版《中國藥典(二部)》附錄ⅠM膜劑項下有關(guān)的各項規(guī)定。

2.3 含量測定

2.3.1 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗

色譜柱:Agilent zorbax－Extend C18柱(250 mm×4.6 mm，5 μm);流動相:0.05 mol/L 草酸銨溶液 － 二甲基甲酰胺－0.2 mol/L磷酸氫二銨溶液(65∶30∶5)，用氨試液調(diào)節(jié) pH 為(8.0 ±0.2);流速:1.0 mL/min;柱溫:25 ℃;檢測波長:280 nm;進樣量:20 μL。在上述色譜條件下，多西環(huán)素、替硝唑色譜峰分離良好，輔料對主成分測定無干擾，色譜圖見圖1。

圖1 高效液相色譜圖

2.3.2 溶液制備

取多西環(huán)素、替硝唑?qū)φ掌犯鬟m量，精密稱定，加0.01 mol/L鹽酸溶液溶解并稀釋成每1 mL中含多西環(huán)素0.24 mg、替硝唑0.36 mg的對照品溶液。取樣品適量，精密稱定，加流動相溶解并定量稀釋成每1 mL中約含多西環(huán)素0.08 mg、替硝唑0.12 mg的溶液，濾過，作為供試品溶液。

2.3.3 方法學(xué)考察

線性關(guān)系考察:分別精密量取對照品溶液 1.0，2.0，3.0，4.0，5.0 mL，置 10 mL 容量瓶中，用流動相稀釋至刻度，搖勻。照上述色譜條件，精密量取20 μL，注入液相色譜儀，記錄峰面積。以峰面積 A對質(zhì)量濃度 C進行線性回歸，得多西環(huán)素回歸方程A=92.12+795.86 C，r=0.999 5(n=5);替硝唑回歸方程 A=56.80+403.83 C，r=0.999 4(n=5)。結(jié)果表明，多西環(huán)素質(zhì)量濃度在 0.024 ～0.12 g/L、替硝唑質(zhì)量濃度在 0.036 ～0.18 g/L范圍內(nèi)與峰面積呈良好的線性關(guān)系。

精密度試驗:精密吸取同一份對照品溶液20 μL，按上述色譜條件重復(fù)進樣6次，測定峰面積。結(jié)果多西環(huán)素的 RSD為0.46%，替硝唑的 RSD為0.34%(n=6)，表明儀器精密度良好。

穩(wěn)定性試驗:取同一份供試品溶液，分別于 0，1，2，4，8，12 h時進樣，測定峰面積。結(jié)果多西環(huán)素的 RSD為 0.95%，替硝唑的 RSD為 0.74%，表明供試品溶液在室溫下穩(wěn)定性良好。

重復(fù)性試驗:對同一批樣品(批號為090317)平行取樣6份，制備供試品溶液，按上述色譜條件測定。結(jié)果多西環(huán)素和替硝唑平均含量分別為 97.70%和 100.35%，RSD分別為 0.85%和0.65%(n=6)，表明方法重復(fù)性良好。

回收率試驗:按處方比例精密稱取多西環(huán)素和替硝唑?qū)φ掌犯鬟m量，加入處方量的輔料，加流動相溶解并稀釋成每1 mL中分別含多西環(huán)素和替硝唑約 0.064 mg 和 0.096 mg，0.08 mg 和0.12 mg，0.096 mg和 0.144 mg的溶液各 3 份，依法測定含量，計算回收率。結(jié)果多西環(huán)素低、中、高質(zhì)量濃度的回收率分別為99.0% ，99.7% ，100.4% ，RSD 分別為 0.35% ，0.58% ，0.55%;替硝唑低、中、高質(zhì)量濃度的回收率分別為98.7%，99.9%，99.2% ，RSD 分別為 0.46%，0.29%，0.63%。

2.3.4 樣品測定

取樣品適量，依法制備供試品溶液，按擬訂的色譜條件測定，記錄色譜圖;另取多西環(huán)素、替硝唑?qū)φ掌愤m量，精密稱定，同法稀釋和測定，按外標(biāo)法計算。結(jié)果批號為090317，090412，090425的樣品中多西環(huán)素相對標(biāo)示含量分別為97.2%，98.9%，95.4%，替硝唑相對標(biāo)示含量分別為101.1%，99.4%，101.2%。

2.4 藥膜中多西環(huán)素體外溶出試驗

將盛有10 mL純化水的試管置36℃恒溫水浴中預(yù)熱，精密稱取10片藥膜，置上述試管中，同時開始計時。每隔5 min精密吸取試管中溶液2 mL，加流動相溶解并定量稀釋成每1 mL中約含多西環(huán)素0.08 mg的溶液，濾過，按擬訂的色譜條件測定，同時補充同體積同溫度的溶出介質(zhì)2 mL，計算平均累積溶出百分率。結(jié)果溶出時間為 5，10，15，20，25，30 min 時，平均累積溶出百分率分別為(20.5±4.1)%，(59.2±6.8)%，(79.7±5.3)%，(88.0 ±5.4)%，(97.3 ± 5.1)%，(101.1 ± 3.4)%(n=5)。

2.5 臨床應(yīng)用

2.5.1 病例選擇

按照《口腔內(nèi)科學(xué)》診斷標(biāo)準(zhǔn)[3]，將門診牙周炎、冠周炎80例患者隨機分成復(fù)方多西環(huán)素緩釋藥膜組(治療組)和口服多西環(huán)素片劑組(對照組)，各40例，治療期間均未使用其他抗菌藥物。

2.5.2 給藥方法

治療組患者診斷明確后，將患牙隔濕，根據(jù)牙周袋的深淺和大小，將臨用時分割成0.25 cm×0.4 cm小片的藥膜插入牙周袋或齦盲袋內(nèi)(1～2片)，每日1次，5 d為1個療程;對照組口服多西環(huán)素片劑，首次0.2 g、每日2次，次日后0.1 g、每日2次，以5 d為1個療程。

2.5.3 療效評定標(biāo)準(zhǔn)

牙周炎療效:顯效為牙齦外觀基本恢復(fù)正常，牙周袋無溢膿或變淺，齦溝出血指數(shù)下降，患牙無叩痛;有效為初診時的多數(shù)癥狀有所減輕，牙齦輕度腫脹，牙周袋溢膿改善，齦溝出血指數(shù)下降，患牙叩痛減輕;無效為:癥狀、體征均無明顯改善。以前兩者合計為總有效。

冠周炎療效:治愈為癥狀消失，冠周軟組織腫脹消失，牙齦盲袋無溢膿;顯效為癥狀明顯好轉(zhuǎn)，腫脹、疼痛等減輕，冠周軟組織腫脹明顯減輕，牙齦盲袋溢膿明顯減少;有效為癥狀略有減輕，冠周軟組織腫脹仍然存在，牙齦盲袋溢膿減少;無效為癥狀、體征均無改善或加重。以治愈、顯效和有效為總有效。

2.5.4 結(jié)果

復(fù)方多西環(huán)素緩釋藥膜和多西環(huán)素片劑治療牙周炎、冠周炎結(jié)果見表1?？梢姡舅幠ρ乐苎?、冠周炎有較好的臨床療效，顯效率明顯高于口服多西環(huán)素片劑。

表1 藥膜與多西環(huán)素片劑治療牙周炎和冠周炎的療效比較[例(%)]

3 討論

處方中，采用聚乙烯醇和羧甲基纖維素鈉作為成膜材料，性質(zhì)穩(wěn)定，柔韌性好;甘油為保濕劑;甘露醇為增塑劑。所制藥膜在局部溶解快，組織相容性好，無刺激性。

由于藥物直接作用于患處，同時借助聚乙烯醇的緩釋作用，可使病灶部位保持恒定的藥物濃度，故療效較好。另外，局部用藥劑量遠低于口服給藥，能顯著降低不良反應(yīng)的發(fā)生率。

[1]肖忠革，金 劍.亞抗菌劑量多西環(huán)素治療牙周炎的臨床評價[J].藥學(xué)服務(wù)與研究，2007，7(1):25 －27.

[2]潘亞萍，仇麗鴻，任 平.替硝唑治療冠周炎、牙周炎的臨床及微生態(tài)學(xué)評價[J].中國微生態(tài)學(xué)雜志.1998，10(2):75.

[3]張舉之.口腔內(nèi)科學(xué)[M].第3版.北京:人民衛(wèi)生出版社，1997:312－314.