心腦寧片對東莨菪堿所致小鼠記憶障礙模型的影響

呂宏迪，郝少君，張中華，張正臣

心腦寧片由人參、當(dāng)歸、川芎等組成，具有活血化瘀，益氣安神，用于治療冠心病，腦血栓形成等，亦可用于治療記憶力減退，抗衰老等。為探究其增強(qiáng)記憶力的作用，筆者進(jìn)行了心腦寧片對東莨菪堿所致小鼠記憶障礙模型影響的實(shí)驗(yàn)研究。

1 材料與方法

1.1 藥品 心腦寧片由解放軍第371醫(yī)院制劑室提供，批號20110606；吡拉西坦片，上海信誼藥廠有限公司生產(chǎn)，批號110606；金納多片，德國威瑪舒培博士藥廠生產(chǎn)，批號20090808；亞硝酸鈉，天津市化學(xué)試劑三廠生產(chǎn)，批號20080908；氫溴酸東莨菪堿注射液，上海禾豐制藥有限公司生產(chǎn)，批號110701；羧甲基纖維素鈉，天津恒興化學(xué)試劑制造有限公司，批號20090723；生理鹽水，河南華利制藥股份有限公司生產(chǎn)，批號11041806。

1.2 動物 小鼠，清潔級，河北省實(shí)驗(yàn)動物中心提供，合格證號1112078。

1.3 儀器 YLS-2T型小鼠跳臺記錄儀，山東省醫(yī)學(xué)科學(xué)院設(shè)備站生產(chǎn)；BA-200小鼠避暗儀，成都泰盟科技有限公司；萬用電表 （滬）制01040006上海精益儀表廠。

1.4 方法

1.4.1 對小鼠獲得性記憶障礙模型的影響（跳臺法） 取體重18～21 g小鼠，篩選小鼠雙前肢腳掌皮膚電阻在150～200 kΩ的小鼠70只，雌雄各半，隨機(jī)分為7組，其中1組為空白對照組，6組造東莨菪堿記憶獲得障礙模型。造模型6組小鼠分別灌服大、中、小劑量心腦寧片混懸液（2.2、1.12、0.56 g/kg，用 0.5%CMC 配成 0.11、0.056、0.028 g/ml，0.2 ml/10 g），吡拉西坦混懸液（1.2 g/kg，用 0.5%CMC 配成 0.06 g/ml，0.2 ml/10 g），金納多混懸液（60 mg/kg，用 0.5%CMC 配成 3 mg/ml，0.2 ml/10g）和同體積的0.5%CMC；空白對照組灌同體積0.5%CMC。給藥1次/d，連續(xù)給藥 7 d，于第 6天給藥后 1 h后，造模型6組小鼠均腹腔注射5 mg/kg的東莨菪堿，空白對照組腹腔注射同體積的生理鹽水，10 min后將小鼠放入跳臺儀的小盒內(nèi)進(jìn)行訓(xùn)練。訓(xùn)練時先讓小鼠在跳臺儀小盒內(nèi)適應(yīng)3 min，再接通36 V電源（0.25 mA電流），小鼠受到電擊后正常反應(yīng)是跳回跳臺上躲避電擊。以小鼠雙足同時按觸銅柵為觸電，視為錯誤反應(yīng)，訓(xùn)練5 min。第7天（24 h后）給藥1 h，重新測試小鼠記憶情況，觀察并記錄小鼠首次從跳臺上跳下的潛伏期及5 min內(nèi)錯誤次數(shù)。

1.4.2 對小鼠獲得性記憶障礙模型的影響（避暗法） 取體重18～21 g小鼠，篩選小鼠雙前肢腳掌皮膚電阻在150～200 kΩ，放入避暗法測定盒（不通電）40 s內(nèi)進(jìn)入暗室的小鼠70只，雌雄各半，隨機(jī)分為7組，其中1組為空白對照組，6組造東莨菪堿記憶獲得障礙模型。造模型6組小鼠分別灌服大、中、小劑量心腦寧片混懸液 （2.2、1.12、0.56 g/kg，用0.5%CMC 配成 0.11、0.056、0.028 g/ml，0.2 ml/10 g）， 吡拉西坦混懸液（1.2 g/kg，用 0.5%CMC 配成 0.06 g/ml，0.2 ml/10g），金納多混懸液（60mg/kg，用 0.5%CMC 配成 3mg/ml，0.2ml/10g）和同體積的0.5%CMC；空白對照組灌同體積0.5%CMC。給藥1次/d，連續(xù)給藥7 d，于第6天給藥后1 h后，造模型6組小鼠均腹腔注射5 mg/kg的東莨菪堿，空白對照組腹腔注射同體積的生理鹽水，10 min后將小鼠頭部背向洞口放入明室，同時開始計(jì)時，保持通電5 min，進(jìn)行電擊記憶訓(xùn)練。第7天（24 h后）給藥1 h，重新測試，記錄小鼠自放入明室到首次進(jìn)入暗室的時間（潛伏期）和5 min內(nèi)小鼠進(jìn)入暗室的次數(shù)（受電擊次數(shù)），5 min內(nèi)未進(jìn)入暗室的小鼠潛伏期按300 s計(jì)。

表1 心腦寧對東莨菪堿所致小鼠記憶障礙模型作用（跳臺法，±s，n=10）

表1 心腦寧對東莨菪堿所致小鼠記憶障礙模型作用（跳臺法，±s，n=10）

與模型組比，*P<0.05；與模型組比，#P<0.01

組別 劑量（g/kg） 潛伏期（s） 錯誤次數(shù)（次）空白對照組 146.0±57.0# 2±1#模型組 39.0±13.6 4.3±2吡拉西擔(dān)組 1.2 82.7±18.6# 2.4±1.2*金納多組 0.06 79.9±27.9# 2.4±1.1*大劑量心腦寧片組 2.2 78.2±30.6# 2.8±1.4中劑量心腦寧片組 1.12 80.7±31.3# 2.6±1.2*小劑量心腦寧片組 0.56 82.5±20.0# 2.4±1*

2 結(jié)果

2.1 對獲得性記憶障礙的影響 （跳臺法） 從表1可看出，與空白對照組比，模型組小鼠首次出現(xiàn)錯誤的潛伏期顯著縮短（P<0.01）、5 min 內(nèi)出現(xiàn)的錯誤次數(shù)顯著增加（P<0.01），說明造小鼠記憶獲得障礙模型成功。與模型組比，大、中、小劑量心腦寧片組、吡拉西擔(dān)組和金納多組均可顯著延長小鼠首次出現(xiàn)錯誤的潛伏期（P<0.01），中、小劑量心腦寧片組、吡拉西擔(dān)組和金納多組均可顯著減少小鼠5 min內(nèi)出現(xiàn)的錯誤次數(shù)（P<0.01）；以中、小劑量心腦寧片組對東莨菪堿所致小鼠記憶獲得障礙模型的改善作用為好。

2.2 對獲得性記憶障礙的影響 （避暗法） 從表2可看出，與空白對照組比，模型組小鼠首次出現(xiàn)錯誤的潛伏期顯著縮短（P<0.01）、5 min 內(nèi)出現(xiàn)的錯誤次數(shù)顯著增加（P<0.01），說明造小鼠記憶獲得障礙模型成功。與模型組比，大、中劑量心腦寧片組和吡拉西擔(dān)組均可顯著延長小鼠首次進(jìn)入暗室的潛伏期（P<0.01），大劑量心腦寧片組和吡拉西擔(dān)組可顯著減少小鼠5 min內(nèi)進(jìn)入暗室的次數(shù)（P<0.01）；以大、中劑量心腦寧片組對東莨菪堿所致小鼠記憶獲得障礙模型的改善作用為好。

表2 心腦寧對東莨菪堿所致小鼠記憶障礙模型作用（避暗法±s，n=10）

表2 心腦寧對東莨菪堿所致小鼠記憶障礙模型作用（避暗法±s，n=10）

與模型組比，*P<0.05；與模型組比，#P<0.01

組別 劑量（g/kg） 潛伏期（s） 錯誤次數(shù)（次）空白對照組 53.6±46# 2.9±1.1#模型組 20.2±12 7.3±4.3吡拉西擔(dān)組 1.2 51.5±28# 3.6±2*金納多組 0.06 38±25.6 4.7±3.3大劑量心腦寧片組 2.2 49.3±29.3# 4.0±1.8*中劑量心腦寧片組 1.12 47.9±19.2# 4.6±2.3小劑量心腦寧片組 0.56 47.3±38.2 5.6±2.5

3 討論

心腦寧片是根據(jù)中醫(yī)理論和現(xiàn)代藥理研究成果擬定的院內(nèi)協(xié)定處方。方中以人參為君藥，《名醫(yī)別錄》：調(diào)中，止消渴，通血脈，破堅(jiān)疾，令人不忘，以其主補(bǔ)五臟，安精神，定魂魄；黃芪，補(bǔ)中益氣，為臣藥；當(dāng)歸，活血養(yǎng)血；川芎，其性善降結(jié)氣，以走肝經(jīng)，氣中之血藥，通行十二經(jīng)，具有理氣、活血化瘀的作用為佐藥。4藥合用，集活血化瘀、抗血栓、益氣之功于一體，既重視疏通脈管，以改善臟器供血，又注意改善人體整體功能及代謝，達(dá)到扶正祛邪之目的。本實(shí)驗(yàn)進(jìn)行了心腦寧片對東莨菪堿所致小鼠記憶障礙模型影響的實(shí)驗(yàn)研究，結(jié)果顯示：造小鼠記憶獲得障礙模型成功。與模型組比，大、中、小劑量心腦寧片組、吡拉西擔(dān)組和金納多組均可顯著延長小鼠首次出現(xiàn)錯誤的潛伏期（P<0.01），中、小劑量心腦寧片組、吡拉西擔(dān)組和金納多組均可顯著減少小鼠5 min內(nèi)出現(xiàn)的錯誤次數(shù)（P<0.01）；以中、小劑量心腦寧片組對東莨菪堿所致小鼠記憶獲得障礙模型的改善作用為好。與模型組比，大、中劑量心腦寧片組和吡拉西擔(dān)組均可顯著延長小鼠首次進(jìn)入暗室的潛伏期（P<0.01），大劑量心腦寧片組和吡拉西擔(dān)組可顯著減少小鼠5 min內(nèi)進(jìn)入暗室的次數(shù)（P<0.01）；以大、中劑量心腦寧片組對東莨菪堿所致小鼠記憶獲得障礙模型的改善作用為好。本研究為其治療中風(fēng)患者改善記憶力減退提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

志謝 本實(shí)驗(yàn)在河南中醫(yī)學(xué)院苗明三教授指導(dǎo)下完成，特此致謝

[1]苗明三，楊保新，史晶晶.益腦膠囊對東莨菪堿致小鼠記憶獲得障礙模型的影響[J].中藥藥理與臨床，2008，24(6):71-72.

[2]周小梅，楊全余，陳秋紅.藏藥腦血康對小鼠學(xué)習(xí)記憶的改善作用[J]. 中成藥，2007，29(4):578-579.

[3]顧 彬，汪 淼，張文生.強(qiáng)記片對東莨菪堿致小鼠學(xué)習(xí)記憶障礙的影響及機(jī)理研究[J].北京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報，2008，31(9):616-618.

[4]張紅英，張順興，秦孝智.水芹提取物對小鼠學(xué)習(xí)記憶促進(jìn)作用的影響[J].時珍國醫(yī)國藥，2006，17(6):914-915.

[5]周小梅，楊全余，陳秋紅.藏藥腦血康對小鼠學(xué)習(xí)記憶的改善作用[J]. 中成藥，2007，29(4):578-579.

[6]葉翠飛，魏海峰，張 麗，等.何首烏提取物二苯乙烯苷對東莨菪堿致學(xué)習(xí)記憶障礙模型小鼠的影響[J].中國藥房，2004，15(11):658-660.

[7]侯 悅，吳春福，何 祥，等.氯氮平、奧氮平對小鼠在避暗實(shí)驗(yàn)中學(xué)習(xí)記憶獲得、鞏固和再現(xiàn)過程的影響[J].中國臨床康復(fù)，2006，10(38):61-64.

[8]張紅英，張順興，秦孝智.水芹提取物對小鼠學(xué)習(xí)記憶促進(jìn)作用的影響[J].時珍國醫(yī)國藥，2006，17(6):914-915.

[9]朱未名，胡海燕.安神益智方對老年癡呆癥模型小鼠學(xué)習(xí)記憶能力及腦組織內(nèi)自由基代謝的影響研究[J].中華中醫(yī)藥學(xué)刊，2007，25(6):1230-1232.

[10]董文心，阮克鋒，顧豐華，等.歸苓片改善動物學(xué)習(xí)記憶功能的研究[J]. 中草藥，2006，37(12):1831-1835.

[11]陳紅燕，劉思源，袁麗娟，等.復(fù)方棗仁水提物對小鼠學(xué)習(xí)記憶的影響研究[J].中國藥業(yè)，2011，20(16):29-31.

[12]郭 麗，苗明三，楊保新.益腦膠囊對記憶鞏固性障礙小鼠模型的影響[J].醫(yī)藥論壇雜志，2006，27(19):19-23.

[13]瞿禮萍，曾 南，盧陸飛，等.逍遙散對小鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響[J].中藥藥理與臨床，2008，24(6):1-3.

[14]張 季，張丹參，嚴(yán)春臨，等.蒺藜皂苷對小鼠記憶障礙的影響[J].中藥藥理與臨床，2007，23(3):47-49.

[15]瞿禮萍，曾 南，盧陸飛，等.逍遙散對小鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響[J].中藥藥理與臨床，2008，24(6):1-3.