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    Ki67、Survivin蛋白在原發(fā)性肝細胞癌組織中的表達及臨床意義

    2012-09-05 01:56:38劉起勝
    山東醫(yī)藥 2012年35期
    關(guān)鍵詞:癌栓肝細胞免疫組化

    劉起勝

    (湖南中醫(yī)藥高等??茖W校,湖南 株洲 412012)

    細胞核增殖抗原(Ki67)、凋亡抑制蛋白(Survivin)的異常表達與多種惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān),但兩者在原發(fā)性肝細胞癌(HCC)的發(fā)生、發(fā)展中是否有相關(guān)性,目前尚無定論。2001年1月~2010年12月,我們采用免疫組化SP法檢測了Survivin、Ki67在HCC組織中的表達,旨在進一步探討HCC的發(fā)生機制。

    1 材料與方法

    1.1 材料 收集我院手術(shù)切除的HCC組織標本60份(腫瘤組),患者男37例,女23例,年齡23~70(46.43±11.78)歲;均經(jīng)病理證實且未行化療、放療和免疫治療。另取正常肝組織標本20份作為正常組(肝破裂切除及尸檢標本)。兩組一般資料無統(tǒng)計學差異。DAB顯色試劑盒和S-P試劑盒,兔抗人Survivin、鼠Ki67抗原、SP試劑及DAB顯色試劑盒。

    1.2 Ki67、Survivin表達檢測 采用免疫組化 SP法。實驗步驟按試劑盒說明進行操作,以3%H2O2室溫孵育5~10min除去內(nèi)源性過氧化物酶的活性,微波抗原修復,常規(guī)免疫組化標記。已知陽性切片作陽性對照,用PBS代替一抗作為陰性對照。結(jié)果判斷標準:在組織切片中,以試劑盒中陽性片作為陽性對照,以PBS代替一抗作為陰性對照。Ki67以細胞核著棕褐色顆粒為陽性,每張切片隨機觀察10個具有代表性的高倍視野,計數(shù)100個腫瘤細胞的陽性細胞數(shù),以≤10%為(-),>10%的細胞著色為陽性[1]。Survivin定位于胞質(zhì),少數(shù)胞核可同時染色。Survivin均以腫瘤細胞出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽性表達。根據(jù)陽性腫瘤細胞占腫瘤細胞總數(shù)的比例判定陰陽性及其程度:陽性細胞數(shù)≤10%為陰性( -),>10%為陽性[2]。

    1.3 統(tǒng)計學方法 采用SPSS15.0統(tǒng)計軟件,計數(shù)資料采用χ2檢驗,兩變量之間采用Spearman等級相關(guān)分析,以P≤0.05為有統(tǒng)計學意義。

    2 結(jié)果

    2.1 Ki67、Survivin表達 腫瘤組及正常組Ki67陽性率分別為 76.7%(46/60)、30.0%(6/20),Survivin 陽性率分別為 78.3%(47/60)、25.0%(5/20),P 均 <0.01。

    2.2 Ki67、Survivin表達水平與HCC病理參數(shù)的關(guān)系 見表1。

    表1 Ki67、Survivin表達水平與HCC病理參數(shù)的關(guān)系

    2.3 相關(guān)性分析 HCC組織中Ki67與Survivin表達呈正相關(guān)(r=0.566,P <0.01)。

    3 討論

    Survivin蛋白是迄今發(fā)現(xiàn)最強的凋亡抑制因子,Survivin蛋白的表達與多種腫瘤的生物學(或)疾病分期有關(guān)[3],mRNA原位雜交和免疫組化結(jié)果表明,Survivin在肺癌、結(jié)腸癌、胃癌、乳腺癌等多種惡性腫瘤中均有過表達,陽性表達率為30% ~100%[4]。本研究腫瘤組Survivin陽性率明顯高于正常組,提示Survivin參與HCC的發(fā)生、發(fā)展,其可能是參與抑制惡性腫瘤細胞的凋亡過程中的重要因素。本研究顯示,Survivin在肝細胞癌組織中的表達與患者性別、年齡均無關(guān)聯(lián),與癌栓形成及腫瘤轉(zhuǎn)移、包膜侵犯有關(guān)聯(lián)。眾多學者認為,癌栓形成、腫瘤轉(zhuǎn)移、包膜侵犯可以代表肝癌侵襲和轉(zhuǎn)移程度和時效,Survivin陽性表達與他們相關(guān),說明這種陽性表達可能與肝癌的侵襲和轉(zhuǎn)移相關(guān),但具體機制仍待進一步研究。

    Ki67抗原是研究細胞增殖性的重要指標,Ki67抗原表達可反映腫瘤細胞增殖活性,與惡性腫瘤的發(fā)展、轉(zhuǎn)移及預后高度相關(guān)[5]。Ki67的檢測已被廣泛用于反映腫瘤細胞增殖速度和預測腫瘤預后[6~8]。本研究發(fā)現(xiàn),腫瘤組中Ki67陽性率明顯高于正常組,Ki67在肝細胞癌組織中的表達與患者性別、年齡均無關(guān),與包膜侵犯、癌栓形成及腫瘤轉(zhuǎn)移均呈顯著正相關(guān)。提示腫瘤組乳腺癌細胞的增殖活性高。并支持Ki67可作為反映乳腺癌細胞增殖活性和判斷其生物學行為的一個指標。本研究還發(fā)現(xiàn),Ki67和Survivin在肝細胞癌組織表達具有一致性,由此推測,其作為均與細胞增殖相關(guān)的分子,在癌細胞增殖過程中均不同程度地發(fā)揮了作用。

    總之,聯(lián)合檢測Ki67和Survivin可能有助于對肝細胞癌惡性程度的判定及侵襲轉(zhuǎn)移能力的評估,進而為肝細胞癌的預后判斷和合理治療提供參考依據(jù)。

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