枯草芽孢桿菌對地面平養(yǎng)和籠養(yǎng)肉雞飼料營養(yǎng)利用率及血液生化指標(biāo)的影響

樊月圓，廖國周，張紅兵，蘇子峰，王桂瑛，程志斌*，廖啟順，劉紹貴

（1.云南農(nóng)業(yè)大學(xué)，昆明 650201；2.云南西南集團(tuán)，昆明 650224；3.大理學(xué)院農(nóng)學(xué)與生物科學(xué)學(xué)院，云南 大理 671003；4.云南農(nóng)業(yè)職業(yè)技術(shù)學(xué)院，昆明 650031；5.云南省種畜場，昆明 650212）

大量試驗(yàn)研究表明，枯草芽孢桿菌（Bacillus Subtilis）是替代飼用抗生素的畜禽安全飼料添加劑之一[1－8]。針對我國肉雞養(yǎng)殖業(yè)相對落后的云南省存在大量地面平養(yǎng)的實(shí)際情況，曾開展日糧添加枯草芽孢桿菌對不同飼養(yǎng)方式（地面平養(yǎng)或籠養(yǎng)）肉雞生長性能影響的初步研究，結(jié)果顯示，無論是地面平養(yǎng)還是籠養(yǎng)方式，枯草芽孢桿菌替代抗生素對改善肉雞的生長性能有良好效果，良好的生長性能取決于肉雞對飼料營養(yǎng)物質(zhì)的充分消化吸收與高效代謝利用[9－18]。已有報道證明，在籠養(yǎng)條件下，枯草芽孢桿菌能夠補(bǔ)充畜禽腸道多種內(nèi)源酶不足，從而綜合提高畜禽對飼料營養(yǎng)物質(zhì)的消化與利用[1,5,19－21]。然而，以地面平養(yǎng)為代表的肉雞傳統(tǒng)散養(yǎng)模式，與現(xiàn)代化規(guī)模養(yǎng)殖的籠養(yǎng)模式相比，肉雞的生產(chǎn)性能和健康狀況差異很大[13]。因此，在環(huán)保養(yǎng)殖與安全飼料及飼料添加劑使用日益被提倡的今天，深入研究枯草芽孢桿菌改善肉雞、尤其是地面平養(yǎng)肉雞生長性能的作用機(jī)理十分必要，這對當(dāng)前云南省地面平養(yǎng)肉雞的生產(chǎn)實(shí)際有科學(xué)指導(dǎo)意義[22－24]。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動物與試驗(yàn)設(shè)計

選擇1日齡羅斯肉雞308（ROSS 308）240只，按照飼養(yǎng)方式（地面平養(yǎng)或籠養(yǎng)）和枯草芽孢桿菌的添加不同，分4個處理組，試驗(yàn)設(shè)計見表1。每個處理組設(shè)6個重復(fù)，每個重復(fù)10只，公母各半。

表1 試驗(yàn)設(shè)計

1.2 試驗(yàn)日糧

參考中國農(nóng)業(yè)部標(biāo)準(zhǔn)《雞飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)（NY/T 33－2004）》并結(jié)合云南省肉雞養(yǎng)殖實(shí)際情況配制1～21和22～42日齡肉雞試驗(yàn)飼糧，基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平見表2。處理組1和2肉雞飼糧添加抗生素金霉素，遵守農(nóng)業(yè)部發(fā)布的《飼料藥物添加劑使用規(guī)范》；處理組3和4使用枯草芽孢桿菌（由云南師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院提供）替代抗生素，添加量為5×1011cfu·kg－1全價飼糧。試驗(yàn)飼糧均不添加飼用植酸酶制劑，65℃低溫加工成顆粒飼料。

表2 基礎(chǔ)日糧組成及營養(yǎng)水平

1.3 飼養(yǎng)管理

籠養(yǎng)采用3層重疊式肉雞籠（1.65 m×0.70 m×0.45 m），水泥地面平養(yǎng)為每個重復(fù)1個小圈，放置食料桶和飲水桶。所有試驗(yàn)雞均飼養(yǎng)于同一有窗雞舍內(nèi)，專人負(fù)責(zé)飼養(yǎng)試驗(yàn)。自然光照輔以人工照明，光照時間22 h。按常規(guī)免疫程序進(jìn)行免疫。試驗(yàn)在云南農(nóng)業(yè)大學(xué)試驗(yàn)雞場進(jìn)行，從2012年5月3日開始，試驗(yàn)期42 d。

1.4 測定指標(biāo)

測定體重、飼料消耗量，統(tǒng)計死亡肉雞數(shù)量，計算平均日增重、平均日采食量、飼料增重比等生長性能指標(biāo)[13]。采用Cr2O3指示劑法，在試驗(yàn)肉雞36～42日齡進(jìn)行飼料營養(yǎng)物質(zhì)的表觀代謝率研究，具體方法參考丁雪梅等報道[25]。試驗(yàn)肉雞42日齡早晨空腹稱重后，每個重復(fù)，隨機(jī)抽取1只健康肉雞，進(jìn)行心臟采血。制備血清后，用全自動生化分析儀（Olympus Au600型）測定血液生化指標(biāo)。分析測定在云南省動物營養(yǎng)與飼料科學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室完成。

1.5 統(tǒng)計分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS統(tǒng)計軟件進(jìn)行兩因素方差分析和多重比較，結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤”表示。

2 試驗(yàn)結(jié)果

2.1 枯草芽孢桿菌對地面平養(yǎng)和籠養(yǎng)肉雞生長性能的影響

枯草芽孢桿菌對地面平養(yǎng)和籠養(yǎng)肉雞生長性能的影響見表3。

表3 枯草芽孢桿菌對地面平養(yǎng)和籠養(yǎng)肉雞生長性能的影響

由表3可見，處理組4肉雞末體重、平均日增重、飼料增重比等指標(biāo)，顯著優(yōu)于處理組1（P＜0.05），處理組2和3差異不顯著（P＞0.05）。試驗(yàn)全期所有處理組肉雞的采食量無差異（P＞0.05）?？莶菅挎邨U菌、飼養(yǎng)方式及其互作顯著影響飼料增重比（P＜0.05）。

2.2 枯草芽孢桿菌對地面平養(yǎng)和籠養(yǎng)肉雞飼料營養(yǎng)表觀代謝率的影響

枯草芽孢桿菌對地面平養(yǎng)和籠養(yǎng)肉雞飼料營養(yǎng)表觀代謝率的影響見表4。

表4 枯草芽孢桿菌對地面平養(yǎng)和籠養(yǎng)肉雞飼料營養(yǎng)表觀代謝率的影響

由表4可見，枯草芽孢桿菌、飼養(yǎng)方式及其互作顯著影響肉雞對飼料粗蛋白質(zhì)的表觀代謝率（P＜0.05），處理組4優(yōu)于處理組2（P＜0.05）；處理組2優(yōu)于處理組1和3?？莶菅挎邨U菌顯著影響飼料磷的表觀代謝率（P＜0.05），處理組4肉雞對飼料磷的表觀代謝率數(shù)值最大。飼養(yǎng)方式顯著影響代謝能的表觀利用率（P＜0.05），處理組2和4籠養(yǎng)肉雞顯著優(yōu)于處理組1和3地面平養(yǎng)肉雞（P＞0.05）。

2.3 枯草芽孢桿菌對地面平養(yǎng)和籠養(yǎng)肉雞血清生化指標(biāo)的影響

枯草芽孢桿菌對地面平養(yǎng)和籠養(yǎng)肉雞血清生化指標(biāo)的影響見表5。由表5可見，枯草芽孢桿菌顯著影響肉雞血清尿酸和血糖的濃度（P＜0.05），處理組2和4肉雞血清尿酸濃度顯著低于處理組1（P＜0.05）；血糖濃度指標(biāo)，處理組4肉雞顯著低于處理組1和3（P＜0.05）?？莶菅挎邨U菌、飼養(yǎng)方式及其互作顯著影響肉雞血清白蛋白的濃度（P＜0.05），處理組4優(yōu)于處理組1，處理組2和3差異不顯著（P＞0.05）。

表5 枯草芽孢桿菌對地面平養(yǎng)和籠養(yǎng)肉雞血清生化指標(biāo)的影響

3 討論

3.1 枯草芽孢桿菌對地面平養(yǎng)和籠養(yǎng)肉雞生長性能的影響

在試驗(yàn)全期所有處理組肉雞的采食量無顯著差異基礎(chǔ)上，枯草芽孢桿菌、飼養(yǎng)方式及其互作顯著影響肉雞的飼料增重比。總體而言，采食添加枯草芽孢桿菌飼糧的處理組3和4肉雞飼料增重比，優(yōu)于飼用抗生素組的處理組1和2肉雞；其中，以籠養(yǎng)方式的處理組4肉雞飼料增重比最佳。說明無論是地面平養(yǎng)還是籠養(yǎng)方式，枯草芽孢桿菌替代抗生素對改善肉雞的生長性能有良好效果。此外，由于本次試驗(yàn)在昆明地區(qū)5～6月氣溫適宜（17～25℃）的時候進(jìn)行，且本試驗(yàn)飼養(yǎng)密度較前期試驗(yàn)飼養(yǎng)密度低，因此總體上本次試驗(yàn)的飼料增重比和死亡率指標(biāo)均優(yōu)于前期試驗(yàn)[13]。

3.2 枯草芽孢桿菌對地面平養(yǎng)和籠養(yǎng)肉雞飼料營養(yǎng)利用率的影響

肉雞良好的生長性能取決于對飼料營養(yǎng)物質(zhì)的充分消化、吸收與利用，采用Cr2O3指示劑法測定的營養(yǎng)物質(zhì)表觀代謝率能夠客觀反映肉雞對飼糧的消化與利用狀況[25－27]。本試驗(yàn)采用了玉米－豆粕型飼糧，排除了基礎(chǔ)飼料原料對本試驗(yàn)的干擾。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，枯草芽孢桿菌、飼養(yǎng)方式及其互作顯著影響飼料粗蛋白質(zhì)的利用率?？傮w而言，使用枯草芽孢桿菌飼糧的處理組3和4肉雞對飼料粗蛋白質(zhì)的利用率高于飼用抗生素組的處理組1和2的肉雞；以籠養(yǎng)方式的處理組2和4的肉雞對飼料粗蛋白質(zhì)的利用率高于地面平養(yǎng)組的處理組1和3的肉雞；尤其是處理組4肉雞的粗蛋白質(zhì)利用率最高。這些結(jié)果與表3肉雞生長性能的結(jié)果基本一致，充分說明飼糧添加枯草芽孢桿菌有利于提高肉雞對飼料蛋白質(zhì)的利用率，從而改善肉雞的生長性能，且在籠養(yǎng)肉雞上的使用效果顯著優(yōu)于地面平養(yǎng)肉雞。研究結(jié)果也印證了過去關(guān)于枯草芽孢桿菌具有補(bǔ)充或維持動物腸道多種消化酶，提高營養(yǎng)利用率，改善畜禽生長性能的機(jī)理[1,5,19－21]。在所有試驗(yàn)飼料沒有添加植酸酶的條件下，處理組4肉雞對飼料磷的表觀代謝率數(shù)值最大，說明飼糧添加枯草芽孢桿菌具有改善肉雞對飼料磷利用率的作用。這印證了過去關(guān)于枯草芽孢桿菌具有分泌植酸酶的功能，對畜禽提高飼料磷利用率，降低養(yǎng)殖環(huán)境污染有積極意義[1,5,8]。也提示飼糧中使用枯草芽孢桿菌可以適當(dāng)降低日糧無機(jī)磷的添加量，但降低幅度有待于進(jìn)一步試驗(yàn)探討。

此外，本次試驗(yàn)沒有發(fā)現(xiàn)枯草芽孢桿菌對飼料代謝能、粗脂肪、粗纖維利用率的改善效果，其原因可能與本次試驗(yàn)的飼糧營養(yǎng)水平一致以及低纖維、高消化率的優(yōu)質(zhì)基礎(chǔ)飼料原料（玉米、豆粕、魚粉）選擇有關(guān)。

3.3 枯草芽孢桿菌對地面平養(yǎng)和籠養(yǎng)肉雞血清生化指標(biāo)的影響

血液生化指標(biāo)是反映畜禽體內(nèi)物質(zhì)代謝變化和組織機(jī)能狀態(tài)變化的指標(biāo)物，可以作為機(jī)體營養(yǎng)代謝利用、應(yīng)激、健康狀態(tài)的綜合表征[28－32]。血清總蛋白包括白蛋白與球蛋白，血清白蛋白由肝臟合成，是機(jī)體蛋白質(zhì)營養(yǎng)需求的主要來源，用于修補(bǔ)組織器官和提供能量，還具有維持血漿滲透壓及作為其他營養(yǎng)物質(zhì)的載體等多種功能[29－30]。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，枯草芽孢桿菌、飼養(yǎng)方式及其互作顯著影響肉雞血清白蛋白的濃度，這一結(jié)果與肉雞對飼糧蛋白質(zhì)的利用率結(jié)果相符。處理組4肉雞的血清白蛋白濃度最高，主要因?yàn)樵诨\養(yǎng)條件下，采食添加枯草芽孢桿菌飼糧的肉雞攝入更多的飼料蛋白質(zhì)，且主要用于生長發(fā)育，因此處理組4肉雞生長性能最佳。

尿酸是禽類動物體內(nèi)氨基酸及核苷酸等含氮化合物代謝的終產(chǎn)物，也是禽類動物排出體內(nèi)多余氨，維持機(jī)體正常機(jī)能的重要方式之一[29]。飼糧粗蛋白質(zhì)水平、飼糧氨基酸平衡狀況、動物的生理代謝、健康狀況等多種因素，綜合影響禽類血清尿酸濃度。一般認(rèn)為，較低血清尿酸濃度表征禽類對飼料蛋白質(zhì)和氨基酸的良好代謝利用，有利于禽類的生長發(fā)育和健康狀況[29]。本試驗(yàn)在飼糧營養(yǎng)水平和飼養(yǎng)條件一致的前提下，處理組4肉雞的血清尿酸濃度最低，結(jié)合處理組4肉雞對飼料蛋白質(zhì)最佳的利用率結(jié)果，說明枯草芽孢桿菌促進(jìn)了肉雞對飼料蛋白質(zhì)的消化率，減少氮排放，增加機(jī)體蛋白質(zhì)的沉積，從而改善了生長性能。

血清中葡萄糖、甘油三酯和總膽固醇反映了畜禽對飼料糖類、脂質(zhì)營養(yǎng)物質(zhì)的利用及其在相關(guān)機(jī)體組織內(nèi)的代謝綜合情況，這些指標(biāo)易受到飼糧營養(yǎng)水平（尤其是氨基酸種類、含量）、飼料原料選擇（谷物、油脂等能量飼料）、血清激素水平（主要是甲狀腺素、胰島素、胰高血糖素、生長激素、糖皮質(zhì)激素等）、肝臟脂質(zhì)相關(guān)代謝酶（脂肪酸合成酶、乙酰輔酶A羧化酶、激素敏感性甘油三酯脂酶、肝脂酶、脂蛋白脂酶等）、動物健康狀況等多種因素影響[26,29－30]。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，枯草芽孢桿菌顯著影響肉雞血糖濃度，處理組4肉雞血糖濃度顯著低于處理組1和3。推測是由于枯草芽孢桿菌增加了飼料蛋白質(zhì)和氨基酸的攝入量，血液中較高濃度的蛋白質(zhì)和（或）氨基酸濃度，激發(fā)了甲狀腺素和（或）胰島素分泌。這兩種激素均有增加血清蛋白質(zhì)向機(jī)體組織沉積以及適當(dāng)降低血糖濃度的作用，以符合機(jī)體組織正常對營養(yǎng)物質(zhì)及能量的代謝需求。當(dāng)然，這一推測有待于進(jìn)一步試驗(yàn)分析相關(guān)的指標(biāo)。

此外，本試驗(yàn)沒有發(fā)現(xiàn)枯草芽孢桿菌對飼料粗脂肪利用率和肉雞血清甘油三酯及膽固醇濃度的影響，這可能與肝臟脂質(zhì)相關(guān)代謝酶的活性有關(guān)。

4 小結(jié)

本試驗(yàn)證明，無論是傳統(tǒng)的肉雞地面平養(yǎng)方式還是現(xiàn)代的規(guī)?；怆u籠養(yǎng)方式，添加枯草芽孢桿菌微生態(tài)制劑，均可以安全高效的替代飼用抗生素，改善肉雞生長性能，其作用機(jī)理主要是提高飼料蛋白質(zhì)的消化和代謝利用率。

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