吐溫80對Bt在作物葉面的展著及蔥田甜菜夜蛾防效的影響

金大勇， 全雪麗， 李翔國， 柳鏞萬

（1.延邊大學農(nóng)學院，延吉 133002；2.忠南大學農(nóng)業(yè)與生命科學學院，韓國 大田 305764）

吐溫80對Bt在作物葉面的展著及蔥田甜菜夜蛾防效的影響

金大勇1＊， 全雪麗1， 李翔國1， 柳鏞萬2

（1.延邊大學農(nóng)學院，延吉 133002；2.忠南大學農(nóng)業(yè)與生命科學學院，韓國 大田 305764）

在蘇云金桿菌中，加入表面活性劑吐溫80，研究了蘇云金桿菌在不同作物上的展著及對蔥田甜菜夜蛾防效的影響。試驗結(jié)果表明，吐溫80能顯著提高Bt在作物葉面的展著量。藥液在不同作物的展著量差異顯著，吐溫80的2 000倍稀釋液，可使CAB109制劑在蔥、玉米、羽衣甘藍、菜豆、草莓、白菜、黃瓜和蘿卜的展著量分別提高8.0、7.9、7.7、2.5、2.3、2.0、1.4倍和1.3倍；可使商品 TB的展著量分別提高4.4、6.4、4.7、1.8、1.9、1.7、1.4倍和1.2倍。吐溫80的1 000倍稀釋液，可使CAB109與TB制劑將蔥田甜菜夜蛾的蟲口減退率分別從63.6%與43.3%，提高到84.5%與62.8%，顯著提高防效。

蘇云金桿菌； 表面活性劑； 吐溫80； 展著； 防效

蘇云金桿菌（Bacillusthuringiensis，Bt）作為一種對人畜安全、無環(huán)境污染的微生物殺蟲劑，在害蟲的防治中發(fā)揮了重要作用，成為國內(nèi)外開發(fā)應(yīng)用最廣泛的生物農(nóng)藥之一［1］。然而，Bt與化學農(nóng)藥相比具有產(chǎn)品穩(wěn)定性較差，殘效期短，殺蟲速度慢等不足［2］。為提高Bt的防治效果，許多學者采取了一些措施來提高Bt的作用效果［3－4］。由于Bt只有胃毒作用，因此Bt制劑在作物表面的附著量將直接影響害蟲的攝取量及其田間防效。不僅如此，植物表面（包括莖、葉、花、果實）的角質(zhì)層，是由角質(zhì)（cutin）和蠟質(zhì)（wax）等組成的膜狀結(jié)構(gòu)，它具有機械防護和失水保護作用。由于角質(zhì)層中蠟質(zhì)的構(gòu)造及含量不同，對Bt在作物表面的附著產(chǎn)生不同的影響，因此同一Bt在不同作物上的防效差異顯著［5］。而表面活性劑能顯著降低水溶液的表面張力，因而可以極大地改善藥液在植物葉面的附著性［6］。本文旨在了解非離子型表面活性劑——吐溫80對Bt在作物葉面的展著及藥效的影響，以便為大面積示范推廣和安全使用提供科學依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 供試菌劑與助劑

Bacillusthuringiensissubsp.aizawaiCAB109菌株由金大勇等在土壤中分離篩選［7］；B.thuringiensissubsp.aizawaiTB（WP）由韓國DONGBU HITEK有限公司生產(chǎn)；吐溫80是由韓國SCIENCESTAR有限公司生產(chǎn)。

1.2 試驗設(shè)計

共進行了2組試驗。

第1組為添加吐溫80對Bt在不同作物葉面展著效果的影響室內(nèi)試驗。在濃度為2×106cfu／mL的CAB109菌劑與濃度為5×105cfu／mL的商品制劑TB里分別添加吐溫80稀釋液，具體處理見表1。作物種類（品種）為：蔥（‘黑金星’）、玉米（‘水源162號’）、羽衣甘藍（‘Estee’）、菜豆（‘深紅’）、草莓（‘多紅’）、白菜（‘中秋’）、黃瓜（‘白針系’）和蘿卜（‘萬豐’）等8種。

第2組為添加吐溫80對Bt防治蔥田甜菜夜蛾效果的影響試驗。在濃度為2×106cfu／mL的CAB109菌劑與濃度為5×105cfu／mL的TB制劑里添加吐溫80稀釋液，具體處理見表2。每個小區(qū)面積為10m2，各小區(qū)隨機排列。以上各處理均重復(fù)3次。

1.3 試驗和調(diào)查方法

1.3.1 吐溫80對作物的安全性觀察

在試驗中，采用目測法仔細觀察吐溫80不同濃度的稀釋液在作物葉片的分布情況，以及處理后第7天作物葉片的顏色及形態(tài)變化等。

1.3.2 吐溫80對Bt在不同作物葉片展著效果的影響

本試驗于2009年5月20日在韓國忠南大學農(nóng)業(yè)與生命科學學院的溫室內(nèi)進行。分別選擇播后生長1～2個月的8種作物的干凈葉片，按設(shè)計濃度稀釋CAB109與TB制劑，在預(yù)試驗的基礎(chǔ)上，用小型噴霧器距離傾斜45°左右的8種作物葉面20cm處水平方向分別噴8次。待藥液干后，用直徑為2cm的打孔器取3個圓片后放入50mL離心管中，加滅菌水20mL后用混勻器混勻，用移液器取0.2mL涂抹于d＝9cm的NA培養(yǎng)基上，放入27℃的恒溫箱中培養(yǎng)1d后計菌落數(shù)。

1.3.3 吐溫80對Bt田間防效的影響

本試驗于2009年8月14日在韓國全南珍島的蔥田進行。在CAB109與商品TB稀釋液各1 600mL里分別添加1.6mL吐溫80后，用手動氣壓常量噴霧器（型號：HP－3800，噴頭：切向離心式單噴頭，流量：400mL／min）在每個小區(qū)（10m2）的蔥葉上分別均勻噴霧，以清水處理為空白對照。在小區(qū)內(nèi)隨機取30株蔥，調(diào)查藥前和藥后第7天的甜菜夜蛾幼蟲數(shù)，計算蟲口減退率。

調(diào)查數(shù)據(jù)應(yīng)用SPSS11.5進行方差分析，多重比較采用Duncan新復(fù)極差法。

2 結(jié)果與分析

2.1 吐溫80對作物的安全性

在溫室和田間施藥時目測觀察發(fā)現(xiàn)，Bt藥液中添加吐溫80后，藥液在作物葉片上的擴展速度快，霧點分布均勻，并且對于富含角質(zhì)層的蔥、玉米和羽衣甘藍等作物葉面的附著量明顯比對照多。藥后第7天觀察，沒有發(fā)現(xiàn)8種作物的葉片出現(xiàn)白化、壞死、卷葉及落葉等藥害癥狀。表明在本試驗條件下，吐溫80對作物是安全的。

2.2 吐溫80對Bt在不同作物上展著效果的影響

添加吐溫80后，CAB109在8種作物的展著量存在顯著差異，且吐溫80的濃度越高，其展著量也就越多（表1）。以吐溫80的2 000倍稀釋液看，展著量增加倍數(shù)從多到少排序依次為：蔥、玉米、羽衣甘藍、菜豆、草莓、白菜、黃瓜和蘿卜。商品制劑TB中加入吐溫80后在8種作物葉片展著量的變化趨勢與CAB109菌劑基本一致，只是展著量的增幅略低?？傮w上看，添加吐溫80對于蔥、玉米、羽衣甘藍、菜豆和草莓的展著效果顯著，特別是對蔥、玉米和羽衣甘藍這3種植物；而對白菜、黃瓜和蘿卜的展著效果并不顯著。在展著量的提高上CAB109比TB要高，這是由于TB制劑含有一定量的表面活性劑有關(guān)。對蔥而言，吐溫80的2 000倍稀釋液可節(jié)省CAB109菌劑87.5%，節(jié)省TB制劑77.0%。從圖1中直觀看出，吐溫80對CAB109藥液在蔥葉展著的影響，濃度越高，其展著量也明顯增加。

表1 不同濃度的吐溫80對Bt在8種作物上展著效果的影響

圖1 不同濃度吐溫80對Bt CAB109藥液在蔥葉上展著效果的影響

2.3 吐溫80對Bt田間防治蔥田甜菜夜蛾效果的影響

為了驗證吐溫80能否增加CAB109和TB制劑的防治效果，選擇富含角質(zhì)層的蔥田進行了防治甜菜夜蛾效果試驗。結(jié)果表明，吐溫80的1 000倍液能顯著提高CAB109與TB菌劑的蟲口減退率（表2），添加吐溫80后田間蟲口減退率分別從63.6%和43.3%提高到84.5%和62.8%。

表2 添加吐溫80后Bt制劑對蔥田甜菜夜蛾的防治效果1）

3 小結(jié)與討論

施用莖葉處理的農(nóng)藥時，藥液在植物葉面的展著性能是影響藥效的重要因素，對于表面擁有蠟質(zhì)層的植物尤其如此。試驗證明：吐溫80能顯著提高Bt在蔥、玉米、羽衣甘藍、菜豆和草莓葉上的展著效果，且吐溫80的濃度越高，展著量也就越多。

通過對8種作物上展著量的調(diào)查，發(fā)現(xiàn)蔥、玉米和羽衣甘藍是藥液非常難展著的作物，其次是菜豆、草莓和白菜，而黃瓜和蘿卜是藥液相對容易展著的作物。對于表面擁有豐富蠟質(zhì)的作物，即使是已經(jīng)商品化的Bt農(nóng)藥，其展著量也是有限的，這將直接影響防治效果。對于上述8種之外的其他作物，應(yīng)通過大量試驗，劃分藥液展著的難易等級，為今后有效利用Bt和其他化學農(nóng)藥提供依據(jù)。

由于蔥葉的特殊形狀和富有蠟質(zhì)的角質(zhì)層以及甜菜夜蛾的為害習性，使蔥田甜菜夜蛾防治很困難，但在CAB109與TB制劑里添加吐溫80稀釋液能顯著提高防治效果。顯然，對不同作物應(yīng)采取不同的防治策略。對于藥液難以展著的作物可適當添加表面活性劑，有利于提高藥效。

在田間噴霧中，單純依靠提高噴霧量來提高藥物的附著量及防治效果是事倍功半的。而在農(nóng)藥中添加適量的表面活性劑可有效降低藥液在作物表面的接觸角，增加藥液在作物表面的潤濕和鋪展能力，提高農(nóng)藥的有效利用率［8］。同時還可以大量減少農(nóng)藥的使用量。

Bt是生物農(nóng)藥，許多化學助劑能影響其殺蟲活性或降低它的儲存穩(wěn)定性［9］。由于吐溫系列表面活性劑對生物特別柔和［10］，又在食品加工中被廣泛作為添加劑使用，因此，吐溫80作為表面活性劑，可廣泛應(yīng)用于無公害綠色農(nóng)產(chǎn)品生產(chǎn)中。

［1］焦蕊，馮書亮，董建臻，等.蘇云金芽孢桿菌HBF－1芽孢對棉鈴蟲幼蟲生長發(fā)育及酶活的影響［J］.中國生物防治，2007，23（1）：28－32.

［2］彭可凡.蘇云金芽孢桿菌殺蟲劑的劑型加工研究進展［J］.微生物學雜志，2000，20（1）：35－37.

［3］申繼忠，錢傳范.蘇云金桿菌殺蟲劑增效途徑研究進展［J］.生物防治通報，1994，10（3）：135－140.

［4］Salama H S，F(xiàn)oda M S，Sharaby A.Potential of some chemicals to increase the effectiveness ofBacillusthuringiensisBerl.againstSpodopteralittoralisBoisd［J］.Zeitschrift für Angewandte Entomologie，1985，100（5）：425－433.

［5］張宏宇，喻子牛.影響蘇云金芽孢桿菌制劑防蟲效果的因素［J］.植物保護，1997，23（4）：41－44.

［6］由振國，李秉禮，吳羅羅，等.表面活性劑，噴液量及雜草葉角對普殺特噴后附著量的影響［J］.植物保護學報，1994，21（3）：283－287.

［7］金大勇，柳鏞萬.對甜菜夜蛾高毒力蘇云金桿菌的分離及生物測定［J］.延邊大學農(nóng)學學報，2010，32（4）：238－242.

［8］邱占奎，袁會珠，李永平，等.添加劑有機硅表面活性劑對低容量噴霧防治小麥蚜蟲的影響［J］.植物保護，2006，32（2）：34－36.

［9］李榮森，戴順英，李小剛，等.化學助劑對蘇云金芽孢桿菌的影響及新型懸乳劑的研制［J］.微生物學通報，1991，18（2）：68－71.

［10］張俊亭，李治祥，張克強，等.蘇云金桿菌液體劑型的研制［J］.農(nóng)業(yè)環(huán)境保護，1998，17（4）：158－161.

Effects of Tween 80 on spreading ofBacillusthuringiensison crop leaves and its control efficacy againstSpodopteraexiguain scallion fields

Jin Dayong1， Quan Xueli1， Li Xiangguo1， Liu Yongwan2
（1.CollegeofAgriculture，YanbianUniversity，Yanji133002，China；2.CollegeofAgricultureandLifeSciences，ChungnamNationalUniversity，Daejon305764，Korea）

In order to increase the control efficacy ofBacillusthuringiensis，spreading ofB.thuringiensison crop leaves and control efficacy againstSpodopteraexiguawere explored by adding surfactant Tween 80.The results showed that Tween 80 could significantly improve the spreading effect on crop leaves.There was significant difference in spreading effects among different reagents.The spreading effect ofB.thuringiensissubsp.aizawaiCAB109 was improved by 8.0times，7.9 times，7.7 times，2.5 times，2.3 times，2.0times，1.4 times and 1.3 times，respectively，and that ofB.thuringiensissubsp.aizawaiTB by 4.4 times，6.4 times，4.7 times，1.8 times，1.9 times，1.7 times，1.4 times and1.2 times，respectively，by treatment of 2 000×diluent of Tween80 on scallion，corn，kale，kidney bean，strawberry，Chinese cabbage，cucumber and radish.By treatment of 1 000×diluent of Tween80，CAB109 and TB could raise the decrease rate of noctuid populations in scallion fields from63.6%and 43.3%to 84.5%and 62.8%，respectively，and their control efficacy were significant.

Bacillusthuringiensis； surfactants； Tween 80； spread； control efficacy

TQ 450.45

A

10.3969／j.issn.0529－1542.2012.05.030

2012－03－13

2012－04－18

韓國農(nóng)業(yè)振興廳項目；延邊大學科研項目（2011－34）

＊ 通信作者E－mail：jindy66＠hotmail.com