膠質(zhì)瘤組織表皮生長因子受體和血管內(nèi)皮生長因子的表達(dá)及意義

白新學(xué)

(南陽市中心醫(yī)院神經(jīng)外科，河南 南陽 473000)

膠質(zhì)瘤占顱腦腫瘤的45%～50%。多種基因或蛋白參與膠質(zhì)瘤發(fā)生發(fā)展。表皮生長因子受體(EGFR)屬酪氨酸激酶Ⅰ型受體家族，是多種腫瘤DNA合成和細(xì)胞生長的催化劑，其過度表達(dá)常引起細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化及浸潤〔1〕。血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)是血管內(nèi)皮細(xì)胞的特異有絲分裂原，可促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖，促進(jìn)新生血管生成，加速腫瘤生長及轉(zhuǎn)移〔2〕。本研究觀察腦膠質(zhì)瘤中EGFR和VEGF蛋白表達(dá)及二者關(guān)系。

1 材料與方法

1.1 一般資料 2008年1月至2010年12月我院診治的腦膠質(zhì)瘤并手術(shù)患者，留取術(shù)后存檔的蠟塊組織93例為觀察組，年齡21～67(平均48.6)歲，其中男50例，女43例，術(shù)前均未進(jìn)行任何放、化療。納入均經(jīng)病理科主治醫(yī)師再次診斷，并符合WHO關(guān)于腦膠質(zhì)瘤診斷標(biāo)準(zhǔn)，同時選取正常腦組織標(biāo)本70例為對照，均為急性顱腦損傷行內(nèi)減壓術(shù)切除的腦組織，并經(jīng)病理科主治醫(yī)師確認(rèn)。其中男40例，女30例，年齡23～64(平均48.3)歲，兩組一般臨床特征無明顯差別。

1.2 試劑及方法 兔抗人EGFR和VEGF蛋白濃縮液均購自武漢博士德生物技術(shù)有限公司，正式實驗前均進(jìn)行預(yù)實驗，并選擇最佳稀釋比例。EGFR和VEGF表達(dá)應(yīng)用免疫組化SP法，操作均由同一病理技師完成，以避免人為誤差，同時嚴(yán)格按照說明書操作，做好免疫組化的質(zhì)量控制。

1.3 免疫組化結(jié)果判讀標(biāo)準(zhǔn) 免疫組化結(jié)果判讀均由病理科主治醫(yī)師應(yīng)用盲法進(jìn)行判斷。EGFR和VEGF蛋白陽性部位為細(xì)胞質(zhì)，呈均勻棕黃色顆粒，每個切片選取有代表性的高倍鏡視野(×400)共5個，計算陽性細(xì)胞百分比，取其平均值，以＜25%的陽性細(xì)胞為陰性，以≥25%的陽性細(xì)胞為陽性。

1.4 統(tǒng)計學(xué)處理 應(yīng)用SAS6.12統(tǒng)計軟件進(jìn)行χ2檢驗及相關(guān)性分析。

2 結(jié)果

2.1 兩組EGFR和VEGF陽性表達(dá)比較 觀察組EGFR〔65(69.89%)vs 24(34.29%)〕和 VEGF表達(dá)陽性率〔60(64.52%)vs 18(25.71%)〕明顯高于對照組(χ2=20.427 3，P ＜0.000 1;χ2=24.096 8，P ＜0.000 1)。

2.2 觀察組不同臨床特征患者EGFR和VEGF表達(dá)差別 觀察組不同分級、不同最大腫瘤直徑、不同Ki67表達(dá)的EGFR和VEGF陽性表達(dá)差別顯著(P＜0.05，P＜0.01)。見表1。

表1 EGFR和VEGF在觀察組不同臨床特征患者中的表達(dá)差別〔n(%)〕

2.3 膠質(zhì)瘤EGFR和VEGF表達(dá)關(guān)系 經(jīng)線性相關(guān)分析，膠質(zhì)瘤EGFR和VEGF表達(dá)呈正相關(guān)(r=0.44，P=0.024 1)。

3 討論

實體腫瘤細(xì)胞生長分為血管生長前期和血管化浸潤性生長期，在血管前期，其原發(fā)腫瘤直徑常小于3 mm，中心部位主要靠彌散作用獲得營養(yǎng)，因此病變相對靜止，腫瘤生長緩慢，當(dāng)腫瘤生長進(jìn)入浸潤性生長期，此時將新生大量血管。膠質(zhì)瘤是一種富含血管的惡性實體腫瘤，其生長和侵襲與血管生成密切相關(guān)，其血管生成是一復(fù)雜過程，VEGF是公認(rèn)的最重要的血管生成因子〔3，4〕，對惡性腫瘤基質(zhì)的血管新生及促進(jìn)腫瘤進(jìn)展均具有重要作用。VEGF基因定位于染色體的6p21.3，全長14 kb，由8個外顯子及7個內(nèi)含子構(gòu)成，常在正常胚胎發(fā)育時發(fā)揮功能，也在損傷修復(fù)時發(fā)揮作用，VEGF表達(dá)與多種腫瘤預(yù)后有重要關(guān)系。EGFR及其信號傳導(dǎo)通路是機(jī)體對細(xì)胞增殖及調(diào)控的重要途徑。EGFR酪氨酸激酶域被激活后，引起Ras-MAPK、PI3K-Akt及STAT等通路的活化，使細(xì)胞核外信號傳導(dǎo)到細(xì)胞核內(nèi)，調(diào)控細(xì)胞生長及分裂。如果EGFR表達(dá)持續(xù)增加，使細(xì)胞增殖能力增加，抑制細(xì)胞凋亡能力下降，引起機(jī)體調(diào)控異常，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖;有觀點也顯示EGFR可對腫瘤血管生成有重要促進(jìn)作用，主要以VEGF為中介蛋白，促使腫瘤血管內(nèi)皮細(xì)胞增生，誘發(fā)血管新生〔5〕。

腦膠質(zhì)瘤發(fā)生發(fā)展涉及多種基因和蛋白交叉作用。本研究結(jié)果提示EGFR和VEGF參與腫瘤發(fā)生發(fā)展，二者有協(xié)同正向作用。EGFR可作為調(diào)節(jié)基因或作用的中介位點，調(diào)節(jié)VEGF過表達(dá)，進(jìn)而過度抑制血管內(nèi)皮細(xì)胞凋亡并促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞增殖，導(dǎo)致腫瘤血管新生〔6，7〕。EGFR高表達(dá)提示了惡性腫瘤細(xì)胞的強(qiáng)大增殖能力，在此過程中增生的腫瘤細(xì)胞對周圍間質(zhì)的壓迫作用，引起局部缺氧，而缺氧環(huán)境可使VEGF分泌明顯增多，引起微血管出芽生長或新血管內(nèi)皮增生，血管密度增加，血供增加，以滿足腫瘤生長的需要。此協(xié)同機(jī)制提供一條腫瘤治療的信息，即對EGFR促進(jìn)血管生成通路的干預(yù)，可有效減弱或阻斷腫瘤細(xì)胞增生及新生血管形成，抑制腫瘤旺盛的繁殖能力和快速生長能力，為開展以EGFR和VEGF為通路的靶向治療提供了重要理論基礎(chǔ)。

1 Gan HK，Lappas M，Cao DX，et al.Targeting a unique EGFR epitope with monoclonal antibody 806 activates NF-kappaB and initiates tumour vascular normalization〔J〕.JCell Mol Med，2009;13(9B):3993-4001.

2 王國棟，李 俠，王連聰，等.胃癌組織EGFR和VEGF的表達(dá)及其意義〔J〕.實用腫瘤雜志，2009;24(1):34-7.

3 劉愛東，龐久玲，劉士生.胃癌中基質(zhì)金屬蛋白酶-9和CD105表達(dá)關(guān)系的研究〔J〕.中國老年學(xué)雜志，2009;29(7):886-7.

4 劉愛東.CD105在胃癌中的表達(dá)及意義探討〔J〕.臨床合理用藥雜志，2011;4(6A):90-1.

5 李新舉，張 偉，袁育康.非小細(xì)胞肺癌血清及癌組織中EGFR蛋白定量檢測〔J〕.第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報，2008;29(14):1303-5.

6 韓 影，刁文卓，陳 萍.腦膠質(zhì)瘤中VEGF、EGFR表達(dá)意義研究〔J〕.中國實驗診斷學(xué)，2012;16(2):320-1.

7 曾凡玉，譚文勇，胡德勝.表皮生長因子受體和血管內(nèi)皮生長因子在腦膠質(zhì)瘤治療中的表達(dá)和意義〔J〕.中國腫瘤，2009;18(11):920-2.