某規(guī)?；B(yǎng)豬場豬瘟、藍耳病及偽狂犬抗體檢測與分析

黃增燕 張任娜 朱建國，

（1上海交通大學農業(yè)與生物學院 上海市獸醫(yī)生物重點實驗室，上海市 200240；2江蘇天兆實業(yè)有限公司，江蘇省灌南縣 223500）

隨著養(yǎng)殖業(yè)的科學發(fā)展，在市場經濟的推動下，養(yǎng)豬業(yè)的模式迅速地從散養(yǎng)改變成規(guī)?；?、集約化養(yǎng)殖，疾病的防控已經成為養(yǎng)殖管理過程中的重點內容。我國是豬產品消費大國，現(xiàn)今國家相關部門對于豬產品的品質檢驗和疾病的檢疫越來越嚴格，對養(yǎng)豬業(yè)提出了更高的要求。豬傳染病往往會造成重大的經濟損失，傳染病又有著波及范圍廣、感染時間長、撲滅困難、診斷與治療復雜、隱性帶毒、易復發(fā)等特點[1]。就目前而言，免疫仍然是規(guī)模化養(yǎng)豬場傳染病防控的主要手段[2]，而在免疫環(huán)節(jié)，除了制定并執(zhí)行相對固定的免疫程序外，還應該注重疫苗質量檢測，確保使用質量合格的疫苗，同時應該實行抗體水平監(jiān)測，隨時調整免疫程序，確保免疫效果[2]。

據可靠數(shù)據分析，養(yǎng)豬生產中，豬瘟、豬繁殖與呼吸綜合征、偽狂犬病和豬圓環(huán)病毒病是當前危害中國養(yǎng)豬業(yè)的4種重要疫病。其中豬瘟與豬繁殖與呼吸綜合征是 《2012國家動物疫病強制免疫計劃》中的必須進行強制免疫的兩種傳染病，可見其重要性。

所以通過上述三種疾病抗體水平的檢測來了解豬場的免疫水平，實時監(jiān)測群體免疫狀況，及時微調免疫程序，對于保證被檢豬群安全十分重要，同時，一定階段的抗體水平監(jiān)測數(shù)據積累，可為該豬場制定更為科學合理的免疫程序提供依據。

1 材料和方法

1.1 血清

某規(guī)?；B(yǎng)殖場送檢2012年3～8月份采集的100份的豬血清，采血豬包括15周齡豬、33周齡豬及哺乳母豬。

1.2 檢測試劑盒

IDEXX豬瘟病毒抗體、IDEXX豬藍耳病病毒抗體、IDEXX gB抗體檢測試劑盒，購自上海賽嘉生物科技有限公司。

1.3 檢測方法

1.3.1 豬瘟抗體的檢測

采用ELISA方法，用IDEXX豬瘟病毒抗體檢測試劑盒，按照試劑盒說明書進行操作，結果判定：如果被檢樣本的阻斷率大于或等于40%，該樣本就可以被判為陽性；如果被檢樣本的阻斷率小于或等于30%，該樣本就可以被判為陰性。

1.3.2 豬藍耳病病毒抗體的檢測

采用ELISA方法，按照IDEXX豬藍耳病病毒抗體檢測試劑盒說明書操作。結果判定：如果S/P值低于0.4，樣品應判定為陰性，如果大于或等于0.4，樣品應判定為陽性。

1.3.3 豬偽狂犬病毒gB抗體的檢測

采用ELISA方法，按照IDEXX gB抗體檢測試劑盒說明書進行操作。在快速孵育模式下， （1小時孵育/室溫：18～25℃），若 S/N比值小于或等于0.60，樣品為 PRV抗體陽性。若 S/N比值小于或等于 0.70但大于 0.60，該樣品必須被重測。如果結果相同，則過一段時間后重新從動物取樣進行檢測。若 S/N比值大于 0.70，樣品則為 PRV抗體陰性。

2 檢測結果

2.1 豬瘟抗體檢測結果

豬瘟抗體監(jiān)測結果見表1。

2.2 豬藍耳病病毒抗體檢測結果

豬藍耳病病毒抗體檢測結果見表2。

2.3 豬偽狂犬病毒抗體檢測結果

豬偽狂犬病毒抗體檢測結果見表3。

表1 豬瘟抗體檢測結果

表2 豬藍耳病病毒抗體檢測結果

表3 豬偽狂犬病毒gB抗體檢測結果

3 討論

受檢豬場豬群按照常規(guī)免疫程序進行豬瘟疫苗，藍耳病疫苗及豬偽狂犬病毒gpI缺失疫苗的免疫，所以實時監(jiān)測豬瘟抗體、豬藍耳病抗體、豬偽狂犬病毒gB抗體水平，可及時微調免疫程序，對于相關疫病防制具有重要作用。在國家強制免疫計劃中規(guī)定豬瘟、豬繁殖與呼吸綜合征的抗體合格率必須達到70%以上。從上述結果得知該規(guī)?；B(yǎng)豬場血清抗體陽性率處于可以接受的水平，尤其豬藍耳病的免疫保護率較高。但是要想控制上述幾種疫病，最為理想的豬群抗體陽性率應在90%以上[1]。而從近半年的檢測結果看，該豬場的抗體水平不太理想，不同生長階段的抗體水平也不一致，有的生長階段抗體水平還偏低，需要分析原因，及時增加免疫接種。

由表1豬瘟抗體檢測結果顯示，33周齡豬、哺乳母豬、15周齡豬的抗體陽性率依次降低。這表明33周齡豬和哺乳母豬經過多次免疫而達到較佳的抗體水平，15周齡豬免疫次數(shù)較少，所以免疫合格率最低，從而影響了整個豬群的豬瘟抗體水平。這不但提示該階段需要加強免疫，同時也應該從疫苗質量及疫苗注射操作方法上進行分析，也許預示著免疫程序調整的可能性。臨床上母豬很少出現(xiàn)典型癥狀豬瘟暴發(fā),這也與母豬的整體抗體水平較高有關,這一結果提示在臨床上應從免疫劑量和免疫程序上改進豬瘟免疫[3]。

由表2豬藍耳病病毒抗體檢測結果顯示哺乳母豬的抗體陽性率最低，而藍耳病不但引起懷孕母豬的流產、早產、產木乃伊胎和死胎等[4]，還會由此引起仔豬發(fā)病及死亡。這說明哺乳母豬的免疫對防制藍耳病至關重要。本文所獲得的檢測結果提示需要加強哺乳母豬藍耳病的免疫，建議一方面分析疫苗質量及其注射操作方法，一方面在母豬的每個生產周期進行2次PRRS疫苗的防疫[5]。至于是否需要調整常規(guī)免疫程序，則有待于進一步積累更多的抗體檢測資料。

由表3豬偽狂犬病毒gB抗體檢測結果顯示，33周齡豬、哺乳母豬、15周齡豬的抗體陽性率依次降低。尤其是15周齡豬抗體陽性率最低，這表明要加強新生仔豬的免疫接種。豬偽狂犬gE抗體與gB抗體ELISA試劑盒為PR的根除創(chuàng)造了條件，豬群血清抗體的監(jiān)測成為制定免疫計劃、疫病根除計劃有效的手段[6]。本文所獲得的檢測結果，不但提示該階段需要加強15周齡豬偽狂犬病的免疫，同時也應該從疫苗質量及其注射操作方法上進行分析。該結果也說明，必須繼續(xù)進行抗體水平監(jiān)測，以進一步積累更多的抗體檢測資料，為最終決定是否調整常規(guī)免疫程序提供科學依據。

現(xiàn)今對于規(guī)模豬場應做好豬常見傳染病抗體免疫監(jiān)測，及時了解掌握豬群抗體水平，并根據抗體水平科學制定個性化的免疫程序，以確保免疫效果，最大限度地降低母源抗體對免疫接種的干擾[7]，并盡量縮短抗體水平較低的空窗期。對注射疫苗后產生的抗體達不到保護水平的豬群，應及時加強免疫，對加強免疫后抗體水平仍然達不到要求的免疫耐受豬，要堅決淘汰，逐步凈化豬群。并實施封閉式管理，做好日常消毒工作[8]，盡量減少從外界引種傳入疫病的機會。只有采取以上綜合防控措施，才能有效控制豬傳染病的發(fā)生。

[1]陳溥言.獸醫(yī)傳染病學(第5版).北京：中國農業(yè)出版社，2006.

[2]朱建國,原泉水.疫區(qū)豬瘟免疫力水平評價標準的研究.中國預防獸醫(yī)學報，2000，22(2)：154-155.

[3]何啟蓋,陳煥春.規(guī)?；i場豬瘟、細小病毒、口蹄疫抗體水平監(jiān)測和免疫效果分析.中國預防獸醫(yī)學報,2000,22(1),5-9.

[4]李智麗.高致病性豬藍耳病綜合防控體會.中國動物保健，2011（11）：40-46.

[5]王君瑋,徐天剛.山東省部分地區(qū)豬繁殖與呼吸綜合征的血清學調查.畜牧與獸醫(yī)，2004,36(4)：32-33.

[6]戴愛玲.福建省龍巖市規(guī)?；i場偽狂犬野毒感染的血清學調查.龍巖學院學報，2011,29(2)：80-83.

[7]韓崇江,張大丙.部分豬場豬瘟抗體有效保護水平的探.中國畜牧獸醫(yī),2009，36(10)，191-192.

[8]王大林,索緒峰,王建新,等.海南省規(guī)?；i場豬瘟免疫抗體的檢測與免疫效果分析.養(yǎng)豬，2005（5）：32.