復(fù)發(fā)性口腔潰瘍與幽門螺桿菌的相關(guān)性研究

張俊祥 陳康

復(fù)發(fā)性口腔潰瘍(recurrent oral ulcer，ROU)是一種長期反復(fù)發(fā)作的口腔感染性疾病之一，近年來國內(nèi)外有不少學(xué)者報(bào)道，ROU的發(fā)病與幽門螺旋桿菌(Helicobacter pylori，Hp)有一定的關(guān)聯(lián)性［1］，Hp是一種革蘭氏陰性微需氧菌，是消化道潰瘍的重要致病因子，而口腔粘膜與胃粘膜有相似的組織學(xué)特征，因此ROU的發(fā)病與口腔內(nèi)HP的感染日益引起人們的關(guān)注。為了進(jìn)一步證實(shí)其相關(guān)性，筆者在常規(guī)治療ROU的同時(shí)，利用三聯(lián)法治療HP的感染，使ROU的復(fù)發(fā)率下降，取得了較好的療效。

臨床資料與方法

1.臨床資料:選取我院口腔門診自2010年2月～2011年7月就診的RAU患者40例作為治療組，所有患者均HP陽性，診斷標(biāo)準(zhǔn)參照口腔內(nèi)科學(xué)第4版。男27例，女13例;年齡15～56歲，平均年齡(42.4±18.7)歲。納入標(biāo)準(zhǔn):所有患者均有口腔潰瘍病史1年以上，病程反復(fù)1年以上，至少每6周發(fā)作1次。排除標(biāo)準(zhǔn):患其它確診的口腔粘膜病者及較嚴(yán)重的系統(tǒng)性疾病者;不能遵醫(yī)囑用藥者;有長期皮質(zhì)類固醇或免疫抑制劑使用者;治療2周內(nèi)有其它抗生素使用者。隨機(jī)分為治療組與對照組，每組各20例患者，兩組患者在性別、年齡，病程，治療經(jīng)過及基礎(chǔ)性疾病差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，具有可比性。

2.治療方法:對照組患者給予RAU常規(guī)治療2周，甲硝唑0.4g/次，每日3次，局部用口腔潰瘍散涂布(規(guī)格3g，北京同仁堂股份有限公司同仁堂制藥廠國藥準(zhǔn)字Z11020184)，治療組用三聯(lián)療法治療:枸櫞酸鉍鉀膠囊(麗珠得樂)(0.3g×20s麗珠集團(tuán)麗珠制藥廠，國藥準(zhǔn)字 H10920098)飯前半小時(shí)110mg/次，每日4次;阿莫西林膠囊(0.25g×24s珠海聯(lián)邦制藥股份有限公司H44021351)1.0g/次，每天3次;甲硝唑0.4/次，每日3次。連續(xù)兩周，局部給以潰瘍散涂布。半年后復(fù)查，統(tǒng)計(jì)RAU復(fù)發(fā)率，半年內(nèi)只要有過一次RAU，即為復(fù)發(fā)。于治療結(jié)束后檢測患者口腔中HP。治療后半年統(tǒng)計(jì)兩組患者的復(fù)發(fā)率。

3.HP的檢測:所有患者取樣前用無菌生理鹽水漱口，然后用棉簽蘸取RAU患者潰瘍面假膜及其周圍唾液1ml用無菌刮匙取潰瘍，置于含生理鹽水的同一試管內(nèi)，液氮速凍保存待二氧化硅微粒法提取DNA。將凍存標(biāo)本自液氮中取出后立即放在冰上，加標(biāo)本體積3倍的結(jié)合液A及10/A玻璃奶，置于55℃恒溫器上5分鐘并每分鐘搖動(dòng)一次，以促進(jìn)DNA和玻璃奶的結(jié)合。然后用離心機(jī)10000rpm離心20秒，棄上清，再加入洗滌液0.5ml，用震蕩器使玻璃奶重懸。如此重復(fù)洗滌共3次，短暫離心后吸盡洗滌液，放在55℃恒溫器上至完全干燥。再加入TE緩沖液30ml，混勻后在55℃恒溫器上放置2分鐘，12000rpm離心3分鐘，小心吸出上清，4℃保存。然后進(jìn)行PCR擴(kuò)增，引物根據(jù)尿素酶C基因和CagA基因進(jìn)行設(shè)計(jì)。最后進(jìn)行聚丙烯酰胺凝膠電泳，凝膠中的DNA片段用銀染方法顯色。

4.統(tǒng)計(jì)學(xué)處理:采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)分析軟件進(jìn)行處理，陽性率的比較采用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié) 果

治療結(jié)束后，治療組中有4例出現(xiàn)HP陽性，陽性率為20%，對照組有7例出現(xiàn)HP陽性，陽性率35%，二者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P＜0.05;治療后半年復(fù)查，所有患者均到訪，治療組患者中有9例復(fù)發(fā)，復(fù)發(fā)率45%，對照組患者中有13例復(fù)發(fā)，復(fù)發(fā)率65%，二者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。

討 論

HP是一種革蘭氏陰性、微需氧菌，它的穩(wěn)定生長需要微環(huán)境中含5% －8%氧氣，能夠活動(dòng)，特別適合于人胃內(nèi)的酸性環(huán)境，它通過產(chǎn)生尿素酸、磷脂酶、脂肪酶等破壞胃十二指腸黏膜表面粘液層結(jié)構(gòu)，損傷屏障功能，通過破壞粘液屏障引起消化道潰瘍。Hp已是公認(rèn)的慢性活動(dòng)性胃炎的致病菌，是消化性潰瘍的重要致病因子，并與胃癌及胃黏膜相關(guān)淋巴組織淋巴瘤密切相關(guān)。ROU是當(dāng)前一種非常普遍的口腔粘膜病，發(fā)作有自限性和周期性，間歇期幾天或2～3個(gè)月不等，好發(fā)于青壯年，女性多見。病因尚不十分清楚?？谇火つづc胃黏膜同屬消化系統(tǒng).均來自于外胚層，其結(jié)構(gòu)、功能、生理、病理有許多相似之處，其組織表面可能存在共同的抗原成分，ROU與上消化道疾病的共同病理基礎(chǔ)，使得Hp可能是耳腔黏膜病共同的致病菌。大量研究證實(shí)ROU患者口腔中(HP的檢出率明顯高于正常人群，而且隨著潰瘍程度的加重HP的感染率明顯上升［2－3］。龍寶軍等［4］研究發(fā)現(xiàn)與其它檢測技術(shù)相比，二氧化硅微粒法提取DNA具有靈敏度高，特異性好的特點(diǎn)。對HP的檢測技術(shù)本次研究應(yīng)用二氧化硅提取DNA，然后再應(yīng)用PCR技術(shù)及銀染色，提高了本次研究結(jié)果的可信度。我們在ROU常規(guī)治療的同時(shí)，應(yīng)用三聯(lián)法治療HP的感染，因?yàn)槿?lián)法是目前公認(rèn)的治療HP的最佳方法，患者的HP陽性率明顯減低，取得了較好的療效，使ROU的復(fù)發(fā)率明顯下降，這從另一個(gè)方面說明了ROU和HP的相關(guān)性，但尚需進(jìn)一步研究證明。

1 張榮.復(fù)發(fā)性口腔潰瘍與幽門螺桿菌相關(guān)性的研究分析［J］.中國社區(qū)醫(yī)師，2009，11(19):149.

2 張國華.抗幽門螺桿菌治療對復(fù)發(fā)性口腔潰瘍復(fù)發(fā)率的影響［J］.中外醫(yī)療，2009，(8):67.

3 孫?；?，周明，馬才順，等.幽門螺桿菌在復(fù)發(fā)性口腔潰瘍發(fā)病中的意義［J］.現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志，2003，12(18):1936－1937，1949.

4 龍寶軍，陳柯，吳補(bǔ)領(lǐng)，等.復(fù)發(fā)性口腔潰瘍患者口腔幽門螺桿菌的檢測［J］.南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2007，27(4):477－478.