膜式液基薄層細(xì)胞制作技術(shù)

孫 雁 金壽同 陳淑云

(江蘇省金壇市中醫(yī)醫(yī)院病理科 213200)

液基薄層細(xì)胞制片技術(shù)是指薄層制片自動裝置制備細(xì)胞學(xué)標(biāo)本的技術(shù)。薄層制片自動裝置如同病理組織切片機(jī)一樣，只是制片的機(jī)器，此裝置在恒定的面積上均勻地分布著很薄的一層細(xì)胞，克服了傳統(tǒng)的制片技術(shù)存在的材料太厚、細(xì)胞重疊、背景模糊和染色不佳等問題。具有代表性的液基薄層細(xì)胞制作技術(shù)是沉降式液基薄層細(xì)胞制片技術(shù)和膜式液基薄層細(xì)胞制作技術(shù)?，F(xiàn)就膜式薄層細(xì)胞制作技術(shù)介紹如下。

1 制片機(jī)制與技術(shù)特點

1.1 通過過濾膜將細(xì)胞樣本過濾，使細(xì)胞貼附在濾膜上，再通過負(fù)壓作用將濾膜上的細(xì)胞轉(zhuǎn)移到載玻片上，最后將細(xì)胞涂片放入固定液中固定。整個過程在制片機(jī)自動完成。

1.2 制片機(jī)中的過濾器是一個直徑為25mm的真空柱狀容器，下面為過濾膜，濾膜孔徑通常為5μm和7μm，分別用于非婦科細(xì)胞樣本和較大的婦科細(xì)胞樣本，可制成直徑2mm的細(xì)胞薄層，方便在直徑2mm區(qū)域進(jìn)行觀察。

2 主要制片操作步驟

2.1 根據(jù)采集的細(xì)胞樣本類型，選擇對應(yīng)的運行程序，機(jī)器進(jìn)行自檢。

2.2 機(jī)器進(jìn)入程序自動操作，直到細(xì)胞片移到含95%的乙醇固定液的瓶中。

2.3 手工取出細(xì)胞片集中到另一含有固定液的容器存放待染色，然后繼續(xù)下一例樣本制片操作。

2.4 將涂片進(jìn)行巴氏染色。

3 制片質(zhì)量控制

3.1 血性的細(xì)胞標(biāo)本在上機(jī)前應(yīng)先進(jìn)行去紅細(xì)胞處理:(1)經(jīng)平衡后放入離心機(jī)以2000轉(zhuǎn)/分，離心10分鐘;(2)吸出清夜后將5ml1%的冰醋酸加入到沉渣，振蕩5分鐘;(3)棄去冰醋酸后將原標(biāo)本上清液加到沉渣里，混勻后即可放入制片機(jī)制片。

3.2 若標(biāo)本量較少則直接將其倒入標(biāo)本瓶內(nèi)，靜止15分鐘后制片。

3.3 痰液等黏液性標(biāo)本可加入消化液進(jìn)行消化處理。

3.4 對于胸腹水標(biāo)本應(yīng)在取樣時加入抗凝劑，若標(biāo)本量較多，在前期處理時應(yīng)取自然沉淀后底部的標(biāo)本10 ～15ml。

3.5 制片前必須檢測是否裝載好樣本瓶、過濾器和載玻片，根據(jù)樣本類型選擇合適孔徑的濾膜。

3.6 95%的乙醇固定液需每天更換。

4 小結(jié)

膜式液基薄層細(xì)胞制片技術(shù)可明顯提高癌癥確診率，能為臨床提供可靠的診斷依據(jù)。在篩查宮頸癌方面由于傳統(tǒng)的巴氏染色涂片技術(shù)，采用TBS報告系統(tǒng)國際診斷標(biāo)準(zhǔn)，以得到了普遍認(rèn)可。該技術(shù)用于痰液、尿液、漿膜腔積液也能提高惡性細(xì)胞的檢出率，為臨床治療提供可靠的診斷依據(jù)。但該技術(shù)也有不足之處，成本較高，不能在基層醫(yī)院普及。在技術(shù)方面一些問題還有待改進(jìn)，如細(xì)胞固縮等

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