黃芩有效化學(xué)成分及抑菌作用分析

劉國華 張延敏

黃芩是中醫(yī)臨床中比較常見的一味中藥，該藥物主要具有清熱燥濕、瀉火解毒、止血安胎的臨床治療功效。經(jīng)過現(xiàn)代藥理學(xué)的相關(guān)研究后表明，該藥物主要具有非常理想的抗菌降壓、保肝利膽、抗過敏等臨床作用［1］。為了對中藥黃芩的有效化學(xué)成分及其抑菌作用進(jìn)行總結(jié)分析，使臨床充分了解黃芩的有效成分及抑菌作用效果，為臨床提供對藥物的有效成分進(jìn)行提取的理想方法，使該藥能夠更好的為廣大臨床患者服務(wù)，我們組織進(jìn)行了本次研究。在研究的整個過程中，我們選用同一產(chǎn)地的黃芩，分別采用水煮法和超聲提取法對其有效化學(xué)成分進(jìn)行提取，針對其對腸炎沙門氏菌的活性抑制作用效果進(jìn)行比較分析?，F(xiàn)將分析結(jié)果報告如下。

1 資料和方法

1.1 一般材料 黃芩、MH肉湯、瓊脂、其他試劑均為分析純。

1.2 相關(guān)儀器 采用我院現(xiàn)有的旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器、超凈工作臺、恒溫培養(yǎng)箱、超聲波發(fā)生器。

1.3 方法 分別采用水煮法和超聲提取法對其有效化學(xué)成分進(jìn)行提取，再將兩種方法提取得到的有效成分物質(zhì)制成結(jié)晶物，對提取得到的上述四種物質(zhì)對腸炎沙門氏菌的活性抑制作用效果進(jìn)行比較分析。

1.4 水煮法 水煎提取液:精稱50 g黃芩飲片，分別加500 g和400 g的水各進(jìn)行1次煎煮，每次進(jìn)行1 h，過濾處理，將濾液合并，濃縮處理至50 ml，此時濃度為1000 mg/ml，滅菌處理后備用。結(jié)晶物制備:精稱50 g黃芩飲片，分別加500 g和400 g的水各進(jìn)行1次煎煮，每次進(jìn)行1 h，過濾處理，將濾液合并，在濾液中加入適量的濃鹽酸，將濾液pH值調(diào)節(jié)到1～2范圍內(nèi)，在80℃條件下保持30 min左右，靜置12 h后將上清液棄去，沉淀物加入適量水，在攪拌均勻后加濃度為40%的NaOH溶液使黃芩素溶解，將pH值調(diào)節(jié)到6～7，加等體積的濃度為95%的乙醇，此時溶液含醇量在50%左右，加熱至50℃，過濾處理，用濃度為10%的鹽酸將pH值調(diào)至2～3，在50℃條件下水浴靜置30 min左右，使黃芩結(jié)晶物完全析出，濾出，洗至中性，60℃條件下干燥至恒重，得黃芩結(jié)晶物，制成濃度為10 mg/ml溶液，滅菌處理后備用。

1.5 超聲提取法 取適量同一廠家生產(chǎn)的黃芩飲片，在60℃條件下進(jìn)行烘干處理，粉碎過10目篩，精稱50 g粗粉，加入10倍量的水，在20kHz的頻率下進(jìn)行超聲處理，隨時對水進(jìn)行補(bǔ)充，使液面的高度維持相對平衡，處理1 h左右在進(jìn)行過濾操作，在濾液中加入適量鹽酸，保證pH在1～2之間，在80℃條件下水浴加熱處理30 min左右，待黃色結(jié)晶物析出完全后，進(jìn)行過濾處理。中加蒸餾水進(jìn)行攪拌，再加濃度為40%的NaOH溶液使黃芩素充分溶解，將pH控制在6～7之間，入等體積的濃度為95%的乙醇，此時溶液的含醇量在50%左右，加熱至50℃，進(jìn)行過濾，濾液用濃度為10%鹽酸，將pH值調(diào)至2～3，50℃條件下水浴靜置30 min左右，使結(jié)晶物完全析出，濾出結(jié)晶物，洗至中性，進(jìn)行抽濾，60℃條件下干燥至恒重，得黃芩結(jié)晶物，配制成濃度為10 mg/ml溶液，滅菌處理后備用。

1.6 統(tǒng)計學(xué)方法 在本次研究過程中所得到的所有相關(guān)數(shù)據(jù)，均采用SPSS 14.0統(tǒng)計學(xué)數(shù)據(jù)處理軟件進(jìn)行處理分析，當(dāng)P＜0.05時，我們認(rèn)為數(shù)據(jù)之間差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

經(jīng)過仔細(xì)研究后我們發(fā)現(xiàn)，采用水煮法得到的提取液對腸炎沙門氏菌的最低抑菌濃度范圍在130～520 mg/ml之間，采用超聲提取法得到的提取液對腸炎沙門氏菌的最低抑菌濃度范圍在65.0～260 mg/ml之間，經(jīng)水煮法提取再制成的黃芩結(jié)晶對腸炎沙門氏菌的最低抑菌濃度范圍在1.30～5.20 mg/ml之間，經(jīng)超聲法提取再制成的黃芩結(jié)晶對腸炎沙門氏菌的最低抑菌濃度范圍在0.65～2.60 mg/ml之間。

3 討論

中醫(yī)學(xué)研究認(rèn)為黃芩主要具有清熱解毒的臨床治療功效，現(xiàn)代藥理學(xué)經(jīng)過研究后認(rèn)為該藥物主要具有利膽、保肝、抗炎、抗變態(tài)反應(yīng)等臨床作用，該藥具有非常廣泛的抗菌譜，對臨床上比較常見的金葡菌、沙門氏菌和綠膿桿菌都具有非常明顯的抑制作用，在臨床實際應(yīng)用過程中主要將其用于對患有肺熱咳嗽、熱病煩燥、煩渴、濕熱瀉痢等疾病的患者進(jìn)行治療［2］。近些年來，相關(guān)臨床研究結(jié)果顯示，黃芩素還具有非常理想的抗病毒作用。目前對黃芩苷進(jìn)行提取的方法主要以水煎煮提取法最為常見，但該法加熱的時間比較長，且生產(chǎn)效率相對較低［3］。在本次研究過程，我們分別用采用水煮和超聲提取兩種方法對中藥黃芩的有效成分進(jìn)行提取分離，并通過制備得到兩法提取的黃芩有效成分結(jié)晶物，對4種有效成分提取物對腸炎沙門氏菌體外活性抑制情況進(jìn)行比較分別。最終研究結(jié)果顯示，超聲提取法所得到的提取液和結(jié)晶物對該菌種的體外活性抑制作用效果均較水煮法理想得多;兩種方法提取的黃芩有效成分結(jié)晶物對試驗?zāi)c炎沙門氏菌的抗菌活性均較提取液大出100倍左右。這一事實充分說明，采用超聲提取法對中藥黃芩的有效成分進(jìn)行提取后其抑菌效果較水煮法更理想。

總而言之，黃芩苷元、黃芩苷、漢黃芩苷和漢黃芩素是中藥黃芩的主要有效成分，采用超聲提取法得到的黃芩的有效成的抑菌效果更加理想，可以將該方法作為臨床對該中藥進(jìn)行有效成分提取的常規(guī)方法。

［1］趙鐵華.黃芩莖葉活性部位抗菌作用的研究.中國藥理學(xué)通報，2007，12(17):885-886．

［2］黎丹戎.漢黃芩素對人卵巢癌細(xì)胞株SKOV3裸鼠移植瘤生長及端粒酶活性的抑制作用.中國藥理學(xué)通報，2007，23(14):537-538．

［3］魏述永.黃芩有效成分提取物對沙門氏菌的抑菌活性比較研究. 中國醫(yī)藥雜志，2008，16(11):240-241．