尿毒癥患者的微炎癥狀態(tài)與心血管并發(fā)癥的相關(guān)性研究

宋宇哲 王宏麗

尿毒癥患者的微炎癥狀態(tài)與心血管并發(fā)癥的相關(guān)性研究

宋宇哲 王宏麗

目的研究尿毒癥患者的微炎癥狀態(tài)與心血管并發(fā)癥的相關(guān)性。方法慢性腎衰竭伴冠心病組和慢性腎衰竭不伴冠心病組，采用梯度離心法分離單核細(xì)胞法對(duì)比。結(jié)果各組數(shù)據(jù)采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示，組間數(shù)據(jù)比較采用t檢驗(yàn)。各組數(shù)據(jù)中計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)。P＜0.05，為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論尿毒癥血液透析患者血清單個(gè)核白細(xì)胞TNF-α、AngⅡ表達(dá)增加，高血壓等心血管并發(fā)癥增加，說(shuō)明尿毒癥患者的微炎癥狀態(tài)與心血管疾病相關(guān)。

尿毒癥患者;微炎癥狀態(tài);心血管并發(fā)癥

美國(guó)、挪威國(guó)家的全國(guó)性調(diào)查顯示慢性腎病(CKD)是常見(jiàn)的慢性疾病，成年人群中 CKD的患病率為 10.2% ～13.0%。中國(guó)CKD患病率為10.8%。CKD與心血管疾病存在復(fù)雜的交互作用。研究表明，與正常腎功能者相比，腎功能輕中度下降者心血管病事件增加40%，并且隨著腎功能下降，風(fēng)險(xiǎn)呈線性增加趨勢(shì)。CKD是心血管疾病(CVD)的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，隨著GFR＜60 ml/min，病死率和心血管事件發(fā)生率明顯增高。約50%～60%的CKD患者在進(jìn)入尿毒癥之前死于CVD［4］，尿毒癥患者CVD病死率約為普通人群的10～20倍，約占尿毒癥患者全因死亡的45%［2］。CVD增加腎損傷危險(xiǎn)，CVD是否為CKD的獨(dú)立危險(xiǎn)因素尚不確定，但防治CVD是延長(zhǎng)CKD患者生存時(shí)間和改善生存質(zhì)量的重要環(huán)節(jié)。糾正CVD危險(xiǎn)因素，除傳統(tǒng)因素如血壓、血糖、血脂外，尤其應(yīng)注意處理CKD相關(guān)危險(xiǎn)因素，如血鈣磷代謝紊亂、慢性炎癥狀態(tài)等［3］。本研究重在尿毒癥患者的微炎癥狀態(tài)與心血管并發(fā)癥的相關(guān)性。

1 資料

1.1 研究對(duì)象及分組

1.1.1 慢性腎衰竭不伴冠心病組(CRF組)18例，選擇2011年9月至2012年3月長(zhǎng)春市中心醫(yī)院門(mén)診規(guī)律血液透析患者，透析時(shí)間2年以上。

1.1.2 慢性腎衰竭伴冠心病組(CRF+CHD組)18例，選擇2011年9月至2012年3月長(zhǎng)春市中心醫(yī)院門(mén)診規(guī)律血液透析患者，透析時(shí)間2年以上。同時(shí)伴有冠狀動(dòng)脈病變:心絞痛，有臨床癥狀，勞累后的心前區(qū)疼痛經(jīng)服用硝酸甘油或休息后緩解;心肌梗死，有胸痛、呼吸困難癥狀，有心電圖或心肌酶學(xué)改變;經(jīng)冠脈成像或血管造影診斷為冠狀動(dòng)脈性心臟病。

1.2 分組特點(diǎn) 組間性別、年齡、血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑(ACEI)和血管緊張素II受體拮抗劑(ARB)類(lèi)藥應(yīng)用情況相匹配。透析患者組選擇體重指數(shù)(BMI)偏小，血白蛋白偏低，C反應(yīng)蛋白(CRP)偏高的患者。排除急性感染和慢性傳染病患者。

2 方法

2.1 留取標(biāo)本 Con組為清晨空腹采血10 mL，CRF組和CRF+CVD組為透析日清晨空腹采血10 ml。靜脈血用肝素抗凝，每1 m l全血用0.1 ml 125～250U/ml的肝素。

2.2 采用梯度離心法分離單核細(xì)胞:

2.2.1 用PBS等倍稀釋血液;

2.2.2 把血液倒入15 ml離心管內(nèi)，用吸管把淋巴細(xì)胞分離液加到血液底下。每10 ml稀釋血加5 ml分離液;

2.2.3 以2000 r/min離心20 min，取中間灰白色層為單個(gè)核細(xì)胞;

2.2.4 所得單個(gè)核細(xì)胞用5倍體積的PBS液洗滌，分別以2000 r/min和1500 r/min離心10 min，進(jìn)一步除去血小板;

2.2.5 培養(yǎng)基定容細(xì)胞;

2.2.6 臺(tái)盼蘭記數(shù)活細(xì)胞。分離后可得單核細(xì)胞數(shù)約3.5 ×104～7.0×104。

2.3 分離出的單核細(xì)胞用1640培養(yǎng)液制成細(xì)胞懸液，滴加至24孔培養(yǎng)板上。

2.4 取培養(yǎng)的上清液，用放免法檢測(cè)TNF-α(TNF-α)濃度。試劑盒購(gòu)自北京中國(guó)原子能科學(xué)研究院，靈敏度6ng/dL。

2.5 取培養(yǎng)的上清液，3000轉(zhuǎn)離心10 min去除顆粒和聚合物。用ELISA方法測(cè)定 AngⅡ。最低檢測(cè)濃度小于1.0 pg/mL。

3 結(jié)果

3.1 各組間例數(shù)、CRF+CHD組例數(shù)18人，其中男性9人、女性9人，年齡66～71歲，冠心病例數(shù)18人，高血壓例數(shù)15人。CRF組例數(shù)18人，其中男性10人、女性8人，年齡37～71歲，冠心病例數(shù)0人，高血壓例數(shù)16人，兩組性別及年齡無(wú)差異，伴高血壓例數(shù)增多，P＜0.05。

3.2 各組患者血清單個(gè)核白細(xì)胞AngⅡ和TNF-α表達(dá)比較CRF組AngⅡ98.12±13.09#(ng/L);2 cRF+CHD組AngⅡ160.98±39.31#*(ng/L)AnⅡ濃度高于CRF組，P＜0.05。

4 討論

慢性腎臟(CKD)病患者有較高的心血管病的發(fā)病危險(xiǎn)，有50%左右透析患者是由于上述原因而導(dǎo)致死亡的，本研究結(jié)果表明，尿毒癥伴發(fā)冠心病的患者，高血壓的發(fā)病率也明顯增加。尿毒癥患者都存在不同程度的貧血，導(dǎo)致機(jī)體長(zhǎng)期處于乏氧狀態(tài)，加重了冠心病的癥狀，本研究中血液透析患者的貧血程度沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，分析與促紅細(xì)胞生成素的治療有關(guān)。

此外，尿毒癥患者的非傳統(tǒng)心血管病危險(xiǎn)因素-炎癥開(kāi)始引起人們的關(guān)注。慢性腎衰竭患者呈現(xiàn)持續(xù)慢性炎癥反應(yīng)狀態(tài)，稱(chēng)為微炎癥狀態(tài)。與下列因素有關(guān):

4.1 血液透析的影響 首先，透析過(guò)程中補(bǔ)體成分活化，促進(jìn)促炎癥細(xì)胞因子活化;其次，透析液中的內(nèi)毒素或細(xì)菌碎片等進(jìn)入血液循環(huán)，刺激炎癥介質(zhì)的表達(dá)與釋放;最后，生物膜的不相容性刺激血液細(xì)胞活化及表達(dá)促炎癥細(xì)胞因子。

4.2 感染 CRF患者存在不同程度的細(xì)胞免疫和體液免疫的缺陷，機(jī)體抗感染能力降低，此外，臨時(shí)血管通路和腹膜透析插管處可能發(fā)生潛在感染。

4.3 尿毒癥本身的相關(guān)因素 尿毒癥患者腸道黏膜屏障作用受損，導(dǎo)致內(nèi)毒素經(jīng)腸道進(jìn)入體內(nèi);慢性腎衰患者晚期糖基化終產(chǎn)物和氧化蛋白產(chǎn)物水平顯著升高，它們作用于炎癥細(xì)胞，促進(jìn)炎癥因子釋放。

尿毒癥炎癥狀態(tài)是一個(gè)細(xì)胞因子驅(qū)動(dòng)的、以促氧化應(yīng)激過(guò)程為特征的慢性炎癥狀態(tài)，血管內(nèi)皮細(xì)胞功能紊亂、中性粒細(xì)胞和單核細(xì)胞髓過(guò)氧化物酶激活參與其中［4］?，F(xiàn)已證實(shí)，慢性腎衰時(shí)血循環(huán)中炎性標(biāo)志物質(zhì)AngⅡ升高。本研究觀察到，尿毒癥合并冠心病患者外周血單個(gè)核白細(xì)胞分泌的AngII明顯高于不伴有冠心病的患者。因此AngⅡ也可能在腎衰透析患者的炎癥、動(dòng)脈粥樣硬化中起到重要作用。

總之，尿毒癥透析患者有較高的心血管并發(fā)癥危險(xiǎn)，而血液透析患者伴有心血管并發(fā)癥有其特有的機(jī)制，在透析患者中微炎癥狀態(tài)、與心血管并發(fā)癥有關(guān)。尿毒癥血液透析患者血清單個(gè)核白細(xì)胞AngⅡ表達(dá)增加，高血壓等心血管并發(fā)癥增加，說(shuō)明尿毒癥患者的微炎癥狀態(tài)與心血管疾病相關(guān)。

［1］ National Kidney Foundation.K/DOQI clinical practice guidelines for chronic kidney disease:evaluation，classification，and stratification.Am JKidney Dis，2002，39(2 Suppl1):S1-266．

［2］ Hage FG，Venkataraman R，Zoghbi GJ，et al.The scope of coronary heart disease in patients with chronic kidney disease.J Am Coll Cardior，2009，53:2129-2140．

［3］ 陳楠，史浩，等.慢性腎臟病患者心血管疾病的現(xiàn)狀與思考.中華內(nèi)科雜志，2012，51:499-450．

［4］ 王喜超，甘華，杜曉剛，等．氧化應(yīng)激促進(jìn)維持性血透患者血清體外誘導(dǎo)血管新生．重慶醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2008，33(6):661-664．

吉林省教育廳“十二五”科學(xué)技術(shù)研究項(xiàng)目(項(xiàng)目編號(hào):吉教科合字2011-421)

130031長(zhǎng)春醫(yī)學(xué)高等專(zhuān)科學(xué)校

王宏麗