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      豬精子差異蛋白質(zhì)組學(xué)在動(dòng)物繁殖生物工程中的應(yīng)用

      2012-08-15 00:54:11李常紅
      科技視界 2012年35期
      關(guān)鍵詞:繁殖力凝膠電泳谷胱甘肽

      李常紅

      (白城師范學(xué)院 吉林 白城 137000)

      蛋白質(zhì)組是指由一個(gè)細(xì)胞或一個(gè)基因組、組織表達(dá)的所有蛋白質(zhì)。蛋白質(zhì)組隨著環(huán)境的改變而發(fā)生變化。蛋白質(zhì)組學(xué)為蛋白質(zhì)組上定量和定性的比較去鑒定影響生物學(xué)進(jìn)程的細(xì)胞內(nèi)機(jī)制[1]。

      傳統(tǒng)上的蛋白質(zhì)組學(xué)分析是采用定量分析眼研究蛋白表達(dá)。隨著后基因組時(shí)代的到來,蛋白功能分析被涵蓋進(jìn)了蛋白質(zhì)組學(xué)已經(jīng)被考慮包括研究。功能蛋白質(zhì)組學(xué)是系統(tǒng)蛋白分析一個(gè)新出現(xiàn)的領(lǐng)域,包含蛋白-蛋白交互作用以及生物學(xué)功能的詳盡信息[2]。在本文綜述中,闡述國內(nèi)外在豬精子蛋白質(zhì)組學(xué)上開展的研究,尤其是涉及到精子的基本生理學(xué)功能,以及展望蛋白質(zhì)組學(xué)在動(dòng)物繁殖生物工程中廣泛的應(yīng)用前景。雖然已有一部分分精子蛋白被進(jìn)行了初步的研究和鑒定,但是仍有大量數(shù)目的精子蛋白未被發(fā)現(xiàn),其生理功能尚未被完全闡明。

      經(jīng)典的2-D凝膠電泳,是采取等電聚焦和十二烷基硫酸鈉聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)結(jié)合的方法,已經(jīng)被列為分析高分辨率的蛋白質(zhì)組的唯一方法[3]。這個(gè)方法可以分離表達(dá)在專有的細(xì)胞或者組織中的成千個(gè)蛋白。在豬生殖道第一次研究蛋白質(zhì)組采用的就是2-D凝膠電泳[4]。

      公豬精子對(duì)于活性氧(ROS)格外敏感是因?yàn)樵谫|(zhì)膜上存在高度富集的多不飽和脂肪酸類以及精子中段的細(xì)胞質(zhì)內(nèi)的不完全的酶抗氧化系統(tǒng)。漿膜上低水平的超氧化物岐化酶(SOD)以及缺乏谷胱甘肽過氧化酶(GPx)和過氧化氫酶表明了公豬精子難以適應(yīng)去抵抗誘導(dǎo)的ROS的毒性作用。然而,這也可以通過硫磺的關(guān)鍵作用來代償,它包括抗氧化劑(L-谷胱甘肽和L-麥角硫因)、左旋維他命C以及精液的高抗過氧化活性的蛋白。

      蛋白的功能促使研究者去尋找其作為生物化學(xué)標(biāo)記,可以作為能育性潛力的一個(gè)診斷指標(biāo)。采用2D電泳,F(xiàn)lowers的研究結(jié)果表明存在豬精液內(nèi)的兩個(gè)蛋白(26 kDa,pI 6.2;55 kDa,pI 4.8)的生物學(xué)重要性,在精液中二者的高濃度(相對(duì)單位大于10)與高產(chǎn)子率(大于86%)和仔豬出生成活數(shù)(大于11)對(duì)應(yīng)。Killian et al表明在牛精液內(nèi)的糖蛋白在高到低的不返情率下不同 (兩種蛋白:26 kDa 6.2 pI;55 kDa 4.5 pI在高能育性的牛占優(yōu)勢(shì)而另兩種蛋白:16 kDa 4.1 pI;16 kDa 6.7 pI在低于平均水平的繁殖力的牛中更加普遍)[5]。Peddinti等比較低繁殖力與高繁殖力牛的精子蛋白,發(fā)現(xiàn)了125個(gè)差異蛋白,并通過信號(hào)通路推測(cè)了與高繁殖力表型相關(guān)的分子標(biāo)志。

      功能蛋白質(zhì)組學(xué)對(duì)于我們理解繁殖過程中精子蛋白功能具有極其重要的理論和現(xiàn)實(shí)意義,它能保證雄性繁殖力的評(píng)估以及檢測(cè)不同動(dòng)物物種生殖道內(nèi)蛋白表達(dá)的改變。

      [1]Carbonaro M.Proteomics:present and future in food quality evaluation[J].Trends in Food Science and Technology.2004,15:209-216.

      [2]Yanagida M.Functional proteomics;current achievements[J].Journal of Chromatography B.2002,771:89-106.

      [3]G?rg A.Advances in 2D gel techniques[J].Proteomics:A Trends Guide.2000,7:3-7.

      [4]Russell LD,Peterson RN,Hunt W,Strack LE.Posttesticular surface modifications and contributions of reproductive tract fluids to the surface polypeptide composition of boar spermatozoa[J].Biology of Reproduction.1984,30:959-978.

      [5]Kilian GJ,Chapman DA,Rogowski LA.Fertility associated proteins in Holstein bull seminal plasma[J].Biology of Reproduction,1993,49:1202-1207.

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