石墨爐原子吸收光譜法測定中成藥中重金屬的含量

張玨，徐暉，李倩（1.天津市河西醫(yī)院，天津000；.天津市津南中醫(yī)醫(yī)院，天津0050；.南開大學(xué)醫(yī)院，天津 00071）

當(dāng)今，隨著人們保健意識(shí)的不斷增強(qiáng)，綠色消費(fèi)已成為時(shí)尚，因而植物藥逐漸獲得了國內(nèi)外市場的青睞，擁有巨大的市場潛力。針對當(dāng)前中成藥及中藥材在臨床的需求日益增大，我國作為中藥生產(chǎn)大國，還遠(yuǎn)沒有達(dá)到所預(yù)期的效益，有許多療效不錯(cuò)的中藥不能進(jìn)入國際市場，重金屬和有害元素的含量超標(biāo)就是較為重要的原因之一。其中，鎘（Cd）、鉛（Pb）、砷（As）等是較為常見且對人體危害很大的重金屬污染物，是重要的檢測指標(biāo)。因此，國內(nèi)外都特別對中藥中的重金屬含量作了嚴(yán)格規(guī)定，如As≤5 μg·g-1、Pb≤10 μg·g-1、Cd≤0.2 μg·g-1等[1]。

探討、尋找簡便的測定中成藥中重金屬含量的方法對控制中藥質(zhì)量尤為重要[2]。銀丹心腦通膠囊、金蓮花膠囊和七葉安神滴丸皆是臨床療效確切且常用的藥物。筆者采用石墨爐原子吸收光譜法，直接測定3種中成藥中As、Pb、Cd的含量，樣品硝化后不需分離，并考察了共存離子的干擾和消解用酸的選擇。結(jié)果表明，方法簡單、可行，所測定的3種中成藥中重金屬含量均符合規(guī)定。

1 儀器與試藥

AA-6800原子吸收分光光度計(jì)、ASC-6100自動(dòng)進(jìn)樣器、GFA-EXT石墨爐原子化器、熱解涂層石墨管（日本島津公司）；Pb、As、Cd空心陰極燈（河北寧強(qiáng)光源公司）；SDMB型封閉數(shù)顯恒溫加熱板（山東聊城華魯電熱儀器有限公司）；BP221S電子分析天平（德國Sartorius公司）。

Pb（批號(hào)：GDW08619）、As（批號(hào)：GDW08611）、Cd（批號(hào)：GDW086194）標(biāo)準(zhǔn)溶液（國家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研究中心）；硝酸、過氧化氫、高氯酸（優(yōu)級(jí)純，天津市化學(xué)試劑五廠）；水為二次亞沸蒸餾水；銀丹心腦通膠囊（貴州百靈企業(yè)集團(tuán)制藥股份有限公司，批號(hào)：20100324、20100413、20100503）；金蓮花膠囊（貴州益康制藥有限公司，批號(hào)：20091202、20091205、20100601）；七葉安神滴丸（云南無敵制藥有限公司，批號(hào)：20100304、20100402、20100501）。

2 方法與結(jié)果

2.1 儀器工作條件

以氬氣為載氣，氘燈扣背景，峰高測量，進(jìn)樣量均為10 μL。Pb、As、Cd的儀器工作參數(shù)見表1；石墨爐升溫程序見表2。

表1 儀器工作參數(shù)Tab 1 Instrument working conditions

表2 石墨爐升溫程序Tab 2 Temperature program for the graphite furnace

2.2 共存離子的影響

在Pb、As、Cd各自的儀器測定條件下，對被測元素測定時(shí)極有可能存在的共存離子進(jìn)行了干擾試驗(yàn)。結(jié)果表明：2 000倍的K+、Na+，1 000倍的Cu2+、Ca2+、Mn2+，500倍的Zn2+、Ni2+、Pb2+，50倍的Mg2+，20倍的Fe3+，均不干擾Cd2+的測定；5 000倍的K+、Na+，2 000倍的Mg2+、Ca2+，50倍的Mn2+，5倍的Ni2+、Cu2+、Co2+，均不干擾 Pb2+測定；2 000倍的K+、Na+，1 000倍的Mg2+、Cu2+、Zn2+、Pb2+、Mn2+及500倍的Fe3+，均不干擾As3+測定。

2.3 消解方式的選擇

傳統(tǒng)的樣品消解方法有干法、濕法、微波消解。其中干法的前處理時(shí)間長，且灰化溫度的選擇對測定結(jié)果影響較大，灰化溫度高，Cd在前處理過程中會(huì)損失；灰化溫度低，許多樣品難以灰化徹底。微波消解時(shí)間短，但稱樣量小，有時(shí)不能滿足低含量樣品的測定需要[3，4]。本方法選擇傳統(tǒng)的濕法消解方式，無需任何昂貴的消解設(shè)備，前處理時(shí)間短，消解效果好，且能夠滿足測定靈敏度的需要。

2.4 樣品消解用酸的選擇

濕法消解樣品時(shí)，所用酸的種類及混合用酸的比例不同，獲得效果可能不一樣。稱取所測定樣品，分別用硝酸、硝酸+過氧化氫（4∶1）、硝酸+鹽酸（4∶1）、硝酸+高氯酸（4∶1）溶液消解樣品。測定結(jié)果顯示，硝酸+高氯酸（4∶1）消解法測得的結(jié)果較高。從而提示了在用濕法消解樣品時(shí)，用硝酸+高氯酸（4∶1）消解樣品比用其他比例的酸消解較完全。

2.5 樣品處理方法

稱取1.000 g樣品，置于100 mL小燒杯中，加入10 mL硝酸+高氯酸（4∶1）的混酸浸泡30 min，在電熱板上120℃加熱約2 h。加熱到溶液還有1～2 mL時(shí)，再分2～3次加入硝酸+高氯酸（4∶1）的混酸約10 mL，加熱近干，用1%硝酸溶解，若有少許懸浮物，可過濾，并將濾液合并定容至10 mL容量瓶中，備用。

2.6 線性關(guān)系考察

2.6.1 Pb線性關(guān)系考察 取1.0 mg·mL-1的Pb標(biāo)準(zhǔn)貯備液適量，用0.1 mol·L-1硝酸溶液稀釋，配成濃度為3、6、9、12、15、18 μg·L-1的Pb標(biāo)準(zhǔn)系列溶液，在設(shè)定的儀器條件下測定吸光度值，制備標(biāo)準(zhǔn)曲線。以進(jìn)樣濃度（c）對吸光度值（A）進(jìn)行線性回歸，得回歸方程為A＝－0.261 3+0.147 9c（r＝0.999 6）。

2.6.2 Cd線性關(guān)系考察 取1.0 mg·mL-1的Cd標(biāo)準(zhǔn)貯備液適量，用0.1 mol·L-1硝酸溶液稀釋，配成濃度為0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2 μg·L-1的Cd標(biāo)準(zhǔn)系列溶液，在設(shè)定的儀器條件下測定吸光度值，制備標(biāo)準(zhǔn)曲線。以進(jìn)樣濃度（c）對吸光度值（A）進(jìn)行線性回歸，得回歸方程為A＝0.023 53+0.247 3c（r＝0.999 8）。

2.6.3 As線性關(guān)系考察 取1.0 mg·mL-1的As標(biāo)準(zhǔn)貯備液適量，用0.1 mol·L-1硝酸溶液稀釋，配成濃度為20、40、60、80 μ g·L-1的As標(biāo)準(zhǔn)系列溶液，在設(shè)定的儀器條件下測定吸光度值，制備標(biāo)準(zhǔn)曲線。以進(jìn)樣濃度（c）對吸光度值（A）進(jìn)行線性回歸，得回歸方程為A＝0.013 56+0.003 275c（r＝0.999 9）。

2.7 方法的精密度和檢出限考察

配制Pb、As、Cd的標(biāo)準(zhǔn)溶液，在上述儀器條件下平行測定10次，計(jì)算其精密度；再測定空白溶液10次，計(jì)算檢出限。方法的精密度和檢出限見表3。

表3 方法的精密度和檢出限（n＝10）Tab 3Precision test and detection limit tes（tn＝10）

2.8 樣品含量測定

稱取一定量樣品，按上述方法消解后進(jìn)行測定并同時(shí)進(jìn)行加樣回收率試驗(yàn)，結(jié)果分別見表4和表5。

表4 樣品測定結(jié)果（n＝5）Tab 4Determination results of samples（n＝5）

表5 加樣回收率結(jié)果（n＝6）Tab 5Results of recovery test（n＝6）

由表4、表5可見，銀丹心腦通膠囊等3種中成藥的Pb、As、Cd的加樣回收率在95%～103%之間，測定結(jié)果符合要求。

3 討論

3.1 樣品的消解

中成藥組成復(fù)雜，消解困難。對樣品進(jìn)行消解不僅要考慮到使樣品消化完全，還要盡量減少干擾物質(zhì)的引入。采用濕法選取最佳比例的混合酸消解樣品能達(dá)到比較完全的消解效果。另外，在保證完全消解的同時(shí)，盡量減少消解混合酸的用量，以避免帶來很高濃度的試劑空白，給準(zhǔn)確定量帶來干擾。

3.2 重金屬元素的測定

中藥及其制劑中微量重金屬元素的測定方法有：原子吸收光譜法（AAS）、原子發(fā)射光譜法（AES）、電感耦合等離子體發(fā)射光譜法（ICP-AES）、中子活化法（AA）、電化學(xué)分析法、光度分析法、色譜分析法、X-射線分析法、化學(xué)分析法等[5，6]。其中，原子吸收光譜法靈敏度高、準(zhǔn)確度高、選擇性好、簡便、分析速度快，往往不需經(jīng)過分離而在同一溶液中直接測定多種元素。我國藥典也在最近兩版（2005年版和2010年版）引入原子吸收光譜法來測定中藥及其制劑中的金屬元素[7]。因此，目前許多中藥中微量元素定量分析均采用該方法。

3.3 測定微量重金屬的意義

近年來，中藥里含有的重金屬及砷鹽引起人們的廣泛關(guān)注，出口的中藥首先被檢測的就是此類成分。所以，對中藥中重金屬和砷化物的安全性評價(jià)正成為毒理學(xué)、中藥藥理學(xué)、生物無機(jī)化學(xué)的研究熱點(diǎn)。環(huán)境污染對中藥材的影響越來越嚴(yán)重，安全性評價(jià)研究可對中藥材的選取和在中成藥的制備過程中避免引入過量重金屬離子、提高制備工藝均有良好的指導(dǎo)意義。因此，建立中藥中重金屬含量快捷準(zhǔn)確的檢測分析方法，無論是對人民身體健康還是對我國出口的經(jīng)濟(jì)效益來講都具有非常重要的意義。

[1]李 敏，劉 渝，周 睿.國內(nèi)外有關(guān)中藥中重金屬和砷鹽的限量標(biāo)準(zhǔn)及分析[J].時(shí)珍國醫(yī)國藥，2007，18（11）：2 859.

[2]趙德華，李居安，楊天壽.原子吸收分光光度法測定復(fù)方甘草片中重金屬的含量[J].中國藥房，2010，21（48）：4 599.

[3]陳 練，陳新煥，楊萬彪，等.石墨爐原子吸收光譜法測定植物提取物中微量鎘[J].光譜實(shí)驗(yàn)室，2008，25（5）：897.

[4]韓立路.石墨爐原子吸收分光光度法測定丹梔逍遙片中鉛的含量[J].中國醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)，2009，6（18）：20.

[5]Viitak A，Volynsky AB.Simple procedure for the determination of Cd，Pb，As and Se in biological samples by electrothermal atomic absorption spectrometry using colloidal Pd modifier[J].Talanta，2006，70（4）：890.

[6]Switzer JA ，Rajasekharan VV，Boonsalee S，et al.Evidence that monochloramine disinfectant could lead to elevated Pb levels in drinking dater[J].Environ Sci Technol，2006，40（10）：3 384.

[7]國家藥典委員會(huì).中華人民共和國藥典（一部）[S].2010年版.北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010：附錄45.