胃癌血清及骨髓中CA72-4、MG7-Ag、CEA聯(lián)合檢測的意義

劉 羽 焦志凱 李 勇 范立僑 趙 群 郝英杰 檀碧波

(河北醫(yī)科大學第四醫(yī)院外三科，河北 石家莊 050011)

胃癌是我國常見的惡性腫瘤之一，其病死率居各種惡性腫瘤之首。早期發(fā)現(xiàn)、早期診斷對胃癌的防治具有重要意義。目前胃癌主要依靠胃鏡及活檢病理確診，有一定痛苦，患者不易接受，且不適合對大樣本高危人群動態(tài)觀察，血清、血漿腫瘤標志物由于檢查方便、快速、無創(chuàng)，易于被患者接受，已成為最方便、最廣泛應用于臨床的輔助檢查方法。近年來，腫瘤標志物的研究已成為防治胃癌的熱點〔1～3〕，但對其報道一般僅限于患者的外周血，對胃癌患者骨髓的研究尚未見報道，本研究選用癌胚抗原(CEA)、糖類抗原 72-4(CA72-4)、胃癌相關抗原(MG7-Ag)三種腫瘤標志物，進行胃癌患者血清及骨髓中三種腫瘤標志物的檢測，分析其單項、聯(lián)合檢測的意義，為臨床早期診斷胃癌提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 研究對象 選取河北醫(yī)科大學第四醫(yī)院外三科2009年10月至2010年12月入院的胃癌患者61例，均行根治性手術切除，未接受過放、化療。其中男49例，女12例，年齡30～76〔平均(59.51±9.30)〕歲。取血清及骨髓為研究對象，均得到患者或委托人同意并簽字。正常組標本均來自健康志愿捐獻者，共計32例。

1.2 實驗試劑與儀器 CEA放射免疫分析試劑盒(北京北免東雅生物技術研究所)，MG7-Ag ELISA試劑盒(Altru Biomedical Inc USA)，CA72-4 ELISA 試劑盒(Altru Biomedical Inc USA)。超低溫冰箱(日本SANYO MDFU50V)，酶標儀(澳大利亞biocell ht2)，恒溫水溫箱(溫州永強醫(yī)療器械廠)，放射免疫γ計數(shù)器(上海原子核研究所日環(huán)儀器一廠SN-684型)。

1.3 方法

1.3.1 外周血及骨髓采集方法

1.3.1.1 外周血采集 術前由外周靜脈取血3 ml，不加抗凝劑，離心機2000 r/min離心10 min，分離上清儲存至低溫冰箱備用。

1.3.1.2 骨髓采集 以骨髓檢測常用的髂前上棘穿刺法取髓3 ml，不加抗凝劑，離心機2000 r/min離心10 min，分離上清儲存至低溫冰箱備用。

1.3.2 CA72-4、MG7-Ag、CEA檢測 ELISA法檢測外周血及骨髓中CA72-4、MG7-Ag的含量，RIA法檢測外周血及骨髓中CEA的含量。

1.3.3 結(jié)果判定 根據(jù)試劑盒說明書，CA72-4、MG7-Ag均以＞6 U/ml為陽性表達，CEA＞20 ng/ml為陽性表達。

1.4 統(tǒng)計學方法 應用SPSS10.0統(tǒng)計軟件，結(jié)果以±s表示，采用兩樣本均數(shù)比較的t檢驗、χ2檢驗、相關分析等方法。

2 結(jié)果

2.1 胃癌患者與正常人血清及骨髓中CA72-4、MG7-Ag、CEA含量比較 胃癌患者血清及骨髓中CA72-4、MG7-Ag、CEA含量明顯高于相應的正常組(P＜0.01);胃癌患者骨髓中CA72-4、MG7-Ag、CEA含量與胃癌血清中CA72-4、MG7-Ag、CEA含量對比差異無顯著性(P＞0.05)，正常骨髓中CA72-4、MG7-Ag、CEA含量與正常血清中CA72-4、MG7-Ag、CEA含量對比差異無顯著性(P＞0.05)。見表1。

表1 各組血清及骨髓中 CA72-4、MG7-Ag、CEA含量(±s)

表1 各組血清及骨髓中 CA72-4、MG7-Ag、CEA含量(±s)

與正常組比較:1)P＜0.01

組別 n CEA(ng/ml) CA72-4(U/ml) MG7-Ag(U/ml)血清正常組 32 11.52±6.75 2.85±1.56 3.21±2.56胃癌組 61 29.73±35.521) 17.37±29.611) 21.76±42.011)骨髓正常組 32 10.58±8.24 3.05±1.16 3.22±1.98胃癌組 61 34.82±35.501) 17.81±23.201) 25.96±43.321)

2.2 胃癌患者血清及骨髓中CA72-4、MG7-Ag、CEA單獨及聯(lián)合檢測的陽性表達 胃癌血清及骨髓檢測陽性率在單一指標檢測和聯(lián)合檢測均高于正常組，差異有統(tǒng)計學意義(均P＜0.01)。胃癌血清三者聯(lián)合陽性率較單一指標CEA、CA72-4為高;胃癌骨髓三者聯(lián)合陽性率均高于單一指標，差異有統(tǒng)計學意義(均P＜0.05)。胃癌血清、骨髓三者聯(lián)合檢測分別為70.49%、78.69%，雖較二指標聯(lián)合檢測陽性率有所升高，但差異無統(tǒng)計學意義。見表2。

表2 各組血清及骨髓CEA、CA72-4、MG7-Ag單一檢測和聯(lián)合檢測的陽性表達情況〔n(%)〕

2.3 胃癌患者血清及骨髓中CA72-4、MG7-Ag、CEA含量的相關性分析

2.3.1 胃癌患者血清中CA72-4、MG7-Ag、CEA含量的相關性分析 胃癌患者血清中CA72-4、MG7-Ag、CEA含量兩兩相比均存在顯著相關。CA72-4含量與CEA含量呈明顯正相關(r=0.722，P＜0.01);MG7-Ag含量與CEA含量呈明顯正相關 (r=0.745，P＜0.01);CA72-4含量與MG7-Ag含量呈明顯正相關(r=0.921，P ＜0.01)。

2.3.2 胃癌患者骨髓中CA72-4、MG7-Ag、CEA含量的相關性分析 胃癌患者骨髓中CA72-4、MG7-Ag、CEA含量兩兩相比均顯著相關。CA72-4含量與CEA含量呈明顯正相關(r=0.826，P＜0.01);MG7-Ag含量與CEA含量呈明顯正相關(r=0.906，P＜0.01);CA72-4含量與 MG7-Ag含量呈明顯正相關(r=0.862，P ＜0.01)。

2.4 CA72-4、MG7-Ag、CEA各自分別在胃癌患者血清及骨髓中含量的相關性分析 CA72-4在胃癌患者血清和骨髓中的含量呈明顯正相關(r=0.871，P＜0.01);MG7-Ag在胃癌患者血清和骨髓中的含量呈明顯正相關(r=0.973，P＜0.01);CEA在胃癌患者血清和骨髓中的含量呈明顯相關(r=0.757，P＜0.01)。

3 討論

CA72-4屬糖蛋白類癌胚抗原，由乳腺癌肝轉(zhuǎn)移細胞的細胞膜成分免疫小鼠所得，對惡性腫瘤特異性高，在健康人和良性疾病患者血液中極少出現(xiàn)，對癌癥的正確診斷具有一定價值，文獻報道其陽性檢測率為36% ～94%〔4〕;MG7-Ag是由鼠源性抗人胃癌單克隆抗體MG7發(fā)現(xiàn)的胃腸道腫瘤相關抗原，亦屬糖蛋白抗原，對胃癌有較高的敏感性和特異度〔5，6〕;CEA是研究較為成熟的腫瘤標志物，在診斷、監(jiān)測預后和指導治療中均有一定意義，且具有價廉等優(yōu)點，適用于消化道腫瘤的聯(lián)合檢測及對比研究〔7〕。本研究結(jié)果顯示胃癌患者血清中CA72-4、MG7-Ag、CEA含量明顯高于相應的對照組，與文獻報道一致。同時我們還檢測了胃癌患者骨髓中CA72-4、MG7-Ag、CEA的含量，旨在為腫瘤診斷尋找新的領域，結(jié)果顯示胃癌患者骨髓中CA72-4、MG7-Ag、CEA含量亦明顯升高，可能的解釋為:抗原物質(zhì)經(jīng)血液循環(huán)進入造血系統(tǒng);骨髓中有轉(zhuǎn)移的癌細胞或形成轉(zhuǎn)移灶，進而產(chǎn)生抗原物質(zhì)。結(jié)果還顯示CA72-4、MG7-Ag、CEA在胃癌血清、骨髓中存在明顯的正相關性，說明骨髓中有著與血中類似的表達趨勢，因此，檢測骨髓中CA72-4、MG7-Ag、CEA含量對胃癌診斷也具有一定價值。

單一檢測某項腫瘤標志物有一定的局限性，因此近年來許多學者著重于聯(lián)合檢測腫瘤標志物，以提高診斷的敏感性和特異性，其中 CEA、CA724、MG7-Ag 二二聯(lián)合檢測常見報道〔8〕，但三種指標的聯(lián)合檢測在文獻上并不多見。我們將CEA、CA724、MG7-Ag進行聯(lián)合檢測，發(fā)現(xiàn)其陽性率均高于70%，且其含量兩兩比較均顯著正相關，提示它們在產(chǎn)生和分泌的機制上可能有共同之處，在胃癌的侵襲轉(zhuǎn)移中可能發(fā)揮著類似或協(xié)同的作用，同時聯(lián)合檢測時相互之間可能會有互補作用，從而提高陽性率并保持一定的特異性。

總之，本研究發(fā)現(xiàn)聯(lián)合檢測腫瘤標志物具有提高胃癌陽性檢出率的優(yōu)點，較單一指標具有優(yōu)勢。但本研究樣本較小，應進一步擴大研究規(guī)模，以期為聯(lián)合檢測診斷胃癌提供依據(jù)。

1 周 琦，張 瓊，魏 來.聯(lián)合檢測 CA19-9、CEA、CA72-4、MG-Ag對胃癌的診斷價值〔J〕.世界華人消化雜志，2010;18(25):2698-701.

2 Bain GH，Petty RD.Predicting response to treatment in gastroesophageal junction adenocarcinomas:combining clinical，imaging，and molecular biomarkers〔J〕.Oncologist，2010;15(3):270-84.

3 Cappellani A，Zanghi A，Di Vita M，et al.Clinical and biological markers in gastric cancer:update and perspectives〔J〕.Front Biosci，2010;2:403-12.

4 李建剛，陳 忠，劉 云，等.CEA、CA19-9、CA72-4、MG-Ag單項及聯(lián)合檢測對診斷胃癌的臨床價值〔J〕.同位素，2002;15(1):58-60.

5 Chen Z，Hong L，Liu L，et al.Monoclonal antibody MG7 as a screening tool for gastric cancer〔J〕.Hybridoma，2010;29(1):27-30.

6 黃立群，郭光華，黃杰雄，等.血清腫瘤標志物MG7Ag在胃癌診斷中的意義〔J〕.中國醫(yī)師雜志，2002;4(6):691-2.

7 Kumar Y，Tapuria N，Kirmani N，et al.Tumour M2-pyruvate kinase:a gastrointestinal cancer marker〔J〕.Eur J Gastroenterol Hepatol，2007;19(3):265-76.

8 郭成業(yè)，閆 春，于文軍，等.聯(lián)合檢測血清CA72-4、CA19-9和CEA對胃癌臨床價值的探討〔J〕.中國腫瘤臨床，2000;27(10):776-7.